E-EL-M3001 小鼠單核細(xì)胞趨化蛋白1(MCP-1)
參考價(jià) | ¥ 2400 |
訂貨量 | ≥1盒 |
- 公司名稱 武漢伊萊瑞特生物科技股份有限公司
- 品牌 其他品牌
- 型號(hào) E-EL-M3001
- 產(chǎn)地 湖北武漢
- 廠商性質(zhì) 生產(chǎn)廠家
- 更新時(shí)間 2022/5/27 10:36:23
- 訪問次數(shù) 348
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供貨周期 | 現(xiàn)貨 | 規(guī)格 | 96T |
---|---|---|---|
貨號(hào) | E-EL-M3001 | 應(yīng)用領(lǐng)域 | 生物產(chǎn)業(yè) |
主要用途 | 科研 |
用途
該試劑盒用于體外定量檢測(cè)Mouse 血清,血漿或其他生物體液中天然及部分重組MCP-1濃度
檢測(cè)原理
本試劑盒采用雙抗體夾心ELISA法。用抗小鼠MCP-1抗體包被于酶標(biāo)板上,實(shí)驗(yàn)時(shí)樣品或標(biāo)準(zhǔn)品中的小鼠MCP-1會(huì)與包被抗體結(jié)合,游離的成分被洗去。依次加入生物su化的抗小鼠MCP-1抗體和辣根過氧化物酶標(biāo)記的親和素??剐∈驧CP-1抗體與結(jié)合在包被抗體上的小鼠MCP-1結(jié)合、生物su與親和素特異性結(jié)合而形成免疫復(fù)合物,游離的成分被洗去。加入顯色底物(TMB),TMB在辣根過氧化物酶的催化下呈現(xiàn)藍(lán)色,加終止液后變成黃色。用酶標(biāo)儀在450nm波長處測(cè)OD值,MCP-1濃度與OD450值之間呈正比,通過繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算出樣品中MCP-1的濃度。
反應(yīng)類型 | 夾心法 |
規(guī)格 | 96T |
反應(yīng)時(shí)間 | 3.5h |
反應(yīng)性 | Mouse |
檢測(cè)方法 | Colormetric |
檢測(cè)范圍 | 31.25—2000 pg/mL |
靈敏度 | 18.75 pg/mL |
樣本體積 | 100μL |
樣本類型 | 血清,血漿或其他生物體液 |
特異性
可檢測(cè)樣本中的小鼠MCP-1,且與其它相關(guān)蛋白無明顯交叉反應(yīng)。
重復(fù)性
板內(nèi),板間變異系數(shù)均<10%。
典型數(shù)據(jù)
由于實(shí)驗(yàn)操作條件的不同(如操作者、移液技術(shù)、洗板技術(shù)和穩(wěn)定條件等),標(biāo)準(zhǔn)曲線的OD值會(huì)有所差異。以下數(shù)據(jù)和曲線僅供參考,實(shí)驗(yàn)者需根據(jù)自己的實(shí)驗(yàn)建立標(biāo)準(zhǔn)曲線。
(pg/mL) | O.D | Average | Corrected |
---|---|---|---|
2000 | 2.484 2.439 | 2.462 | 2.403 |
1000 | 1.658 1.699 | 1.679 | 1.62 |
500 | 0.973 0.978 | 0.976 | 0.917 |
250 | 0.486 0.478 | 0.482 | 0.423 |
125 | 0.261 0.271 | 0.266 | 0.207 |
62.5 | 0.17 0.174 | 0.172 | 0.113 |
31.25 | 0.12 0.115 | 0.118 | 0.059 |
0 | 0.055 0.062 | 0.059 | -- |
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精密度
板內(nèi)精密度:低濃度樣本,中濃度樣本和高濃度樣本分別在1塊板子上檢測(cè)20次。
板間精密度:低濃度樣本,中濃度樣本和高濃度樣本分別在3塊板子上檢測(cè)20次。
Intra-assay Precision | Inter-assay Precision | |||||
---|---|---|---|---|---|---|
Sample | 1 | 2 | 3 | 1 | 2 | 3 |
n | 20 | 20 | 20 | 20 | 20 | 20 |
Mean (pg/mL) | 94.05 | 210.98 | 994.91 | 88.91 | 244.77 | 840.43 |
Standard deviation | 5.14 | 10.06 | 47.86 | 4.82 | 12.09 | 45.97 |
C V (%) | 5.47 | 4.77 | 4.81 | 5.42 | 4.94 | 5.47 |
回收率
分別往5個(gè)不同樣本中添加已知濃度的目標(biāo)蛋白,做回收實(shí)驗(yàn),得出回收率范圍和平均回收率。
Sample Type | Range (%) | Average Recovery (%) |
---|---|---|
Serum (n=8) | 94-104 | 100 |
EDTA plasma (n=8) | 87-99 | 92 |
Cell culture media (n=8) | 90-100 | 96 |
試劑盒組成及保存
未拆封的試劑盒可在2-8℃保存一周;如果一周以后才使用試劑盒,請(qǐng)拆開試劑盒按照下表中的條件分別保存各組分。
中文名稱 | 英文名稱 | 規(guī)格 | 保存條件 |
---|---|---|---|
ELISA酶標(biāo)板(可拆卸) | Micro ELISA Plate(Dismountable) | 8 孔×12 條 | -20℃,可存放6個(gè)月 |
凍干標(biāo)準(zhǔn)品 | Reference Standard | 2 支 | |
濃縮生物素化抗體(100×) | Concentrated Biotinylated Detection Ab | 1支 120 μL | |
濃縮HRP酶結(jié)合物(100×) | Concentrated HRP Conjugate | 1支 120 μL | -20℃(避光),可存放6個(gè)月 |
標(biāo)準(zhǔn)品&樣品稀釋液 | Reference Standard & Sample Diluent | 1瓶 20 mL | 2-8℃.可存放6個(gè)月 |
生物素化抗體稀釋液 | Biotinylated Detection Ab Diluent | 1瓶 14 mL | |
酶結(jié)合物稀釋液 | HRP Conjugate Diluent | 1瓶 14 mL | |
濃縮洗滌液(25×) | Concentrated Wash Buffer (25×) | 1瓶 30 mL | |
底物溶液(TMB) | Substrate Reagent | 1瓶 10 mL | 2-8℃(避光) |
反應(yīng)終止液 | Stop Solution | 1瓶 10 mL | 2-8℃ |
封板覆膜 | Plate Sealer | 5 張 | |
產(chǎn)品說明書 | Product Description | 1 份 | |
質(zhì)檢報(bào)告 | Certificate of Analysis | 1 份 |
說明:所有試劑瓶蓋須旋緊以防止蒸發(fā)和微生物的污染。
試劑體積以實(shí)際發(fā)貨版說明書為準(zhǔn)。相關(guān)試劑在分裝時(shí)會(huì)比標(biāo)簽上標(biāo)明的體積稍多一些,請(qǐng)?jiān)谑褂脮r(shí)量取而非直接倒出。
試驗(yàn)所需自備物品
1. 酶標(biāo)儀(450nm波長濾光片)
2. 高精度移液器,EP管及一次性吸頭:0.5-10 μL, 2-20 μL, 20-200 μL, 200-1000 μL
3. 37℃恒溫箱,雙蒸水或去離子水
4. 吸水紙
操作步驟
![]() | 1. 對(duì)應(yīng)板孔中加入100μL標(biāo)準(zhǔn)品工作液或樣本,37℃孵育90分鐘 |
![]() | 2. 棄掉板內(nèi)液體后,立即加入100μL生物素化抗體工作液,37℃孵育60分鐘 |
![]() | 3. 棄掉板內(nèi)液體,洗板3次 |
![]() | 4. 每孔加入100μL HRP酶結(jié)合物工作液,37℃孵育30分鐘,棄掉板內(nèi)液體,洗板5次 |
![]() | 5. 每孔加入90μL底物溶液,37℃孵育15分鐘左右 |
![]() | 6. 每孔加入50μL終止液 |
![]() | 7. 立即在450nm波長下讀數(shù),處理數(shù)據(jù) |