E-EL-H6075 人基質金屬蛋白酶9(MMP-9)
| 參考價 | ￥ 2400 |
| 訂貨量 | ≥1 盒 |
- 公司名稱 武漢伊萊瑞特生物科技股份有限公司
- 品牌 其他品牌
- 型號 E-EL-H6075
- 產(chǎn)地 湖北武漢
- 廠商性質 生產(chǎn)廠家
- 更新時間 2022/5/27 10:29:08
- 訪問次數(shù) 297
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| 供貨周期 | 現(xiàn)貨 | 規(guī)格 | 96T |
|---|---|---|---|
| 貨號 | E-EL-H6075 | 應用領域 | 生物產(chǎn)業(yè) |
| 主要用途 | 科研 |
用途
該試劑盒用于體外定量檢測Human 血清，血漿或其他生物體液中天然及部分重組MMP-9濃度
檢測原理
本試劑盒采用雙抗體夾心ELISA法。用抗人MMP-9抗體包被于酶標板上，實驗時樣品或標準品中的人MMP-9會與包被抗體結合，游離的成分被洗去。依次加入生物su化的抗人MMP-9抗體和辣根過氧化物酶標記的親和素。抗人MMP-9抗體與結合在包被抗體上的人MMP-9結合、生物su與親和素特異性結合而形成免疫復合物，游離的成分被洗去。加入顯色底物(TMB)，TMB在辣根過氧化物酶的催化下呈現(xiàn)藍色，加終止液后變成黃色。用酶標儀在450nm波長處測OD值，MMP-9濃度與OD450值之間呈正比，通過繪制標準曲線計算出樣品中MMP-9的濃度。
| 反應類型 | 夾心法 |
| 規(guī)格 | 96T |
| 反應時間 | 3.5h |
| 反應性 | Human |
| 檢測方法 | Colormetric |
| 檢測范圍 | 0.16—10 ng/mL |
| 靈敏度 | 0.10 ng/mL |
| 樣本體積 | 100μL |
| 樣本類型 | 血清，血漿或其他生物體液 |
特異性
可檢測樣本中的人MMP-9，且與其它相關蛋白無明顯交叉反應。
重復性
板內(nèi)，板間變異系數(shù)均<10%。
典型數(shù)據(jù)
由于實驗操作條件的不同（如操作者、移液技術、洗板技術和穩(wěn)定條件等），標準曲線的OD值會有所差異。以下數(shù)據(jù)和曲線僅供參考，實驗者需根據(jù)自己的實驗建立標準曲線。
| (ng/mL) | O.D | Average | Corrected |
|---|---|---|---|
| 10 | 2.476 2.408 | 2.442 | 2.383 |
| 5 | 1.686 1.63 | 1.658 | 1.599 |
| 2.5 | 0.916 0.95 | 0.933 | 0.874 |
| 1.25 | 0.504 0.482 | 0.493 | 0.434 |
| 0.63 | 0.276 0.261 | 0.269 | 0.21 |
| 0.32 | 0.184 0.176 | 0.18 | 0.121 |
| 0.16 | 0.125 0.111 | 0.118 | 0.059 |
| 0 | 0.06 0.058 | 0.059 | -- |
 |
精密度
板內(nèi)精密度:低濃度樣本,中濃度樣本和高濃度樣本分別在1塊板子上檢測20次。
板間精密度:低濃度樣本,中濃度樣本和高濃度樣本分別在3塊板子上檢測20次。
| Intra-assay Precision | Inter-assay Precision | |||||
|---|---|---|---|---|---|---|
| Sample | 1 | 2 | 3 | 1 | 2 | 3 |
| n | 20 | 20 | 20 | 20 | 20 | 20 |
| Mean (ng/mL) | 0.47 | 1.05 | 4.76 | 0.48 | 1.15 | 4.56 |
| Standard deviation | 0.03 | 0.05 | 0.20 | 0.03 | 0.06 | 0.19 |
| C V (%) | 6.38 | 4.76 | 4.20 | 6.25 | 5.22 | 4.17 |
回收率
分別往5個不同樣本中添加已知濃度的目標蛋白，做回收實驗，得出回收率范圍和平均回收率。
| Sample Type | Range (%) | Average Recovery (%) |
|---|---|---|
| Serum (n=8) | 87-97 | 93 |
| EDTA plasma (n=8) | 98-110 | 103 |
| Cell culture media (n=8) | 90-102 | 95 |
試劑盒組成及保存
未拆封的試劑盒可在2-8℃保存一周；如果一周以后才使用試劑盒，請拆開試劑盒按照下表中的條件分別保存各組分。
| 中文名稱 | 英文名稱 | 規(guī)格 | 保存條件 |
|---|---|---|---|
| ELISA酶標板(可拆卸) | Micro ELISA Plate(Dismountable) | 8 孔×12 條 | -20℃，可存放6個月 |
| 凍干標準品 | Reference Standard | 2 支 | |
| 濃縮生物素化抗體(100×) | Concentrated Biotinylated Detection Ab | 1支 120 μL | |
| 濃縮HRP酶結合物(100×) | Concentrated HRP Conjugate | 1支 120 μL | -20℃(避光)，可存放6個月 |
| 標準品&樣品稀釋液 | Reference Standard & Sample Diluent | 1瓶 20 mL | 2-8℃.可存放6個月 |
| 生物素化抗體稀釋液 | Biotinylated Detection Ab Diluent | 1瓶 14 mL | |
| 酶結合物稀釋液 | HRP Conjugate Diluent | 1瓶 14 mL | |
| 濃縮洗滌液(25×) | Concentrated Wash Buffer (25×) | 1瓶 30 mL | |
| 底物溶液(TMB) | Substrate Reagent | 1瓶 10 mL | 2-8℃(避光) |
| 反應終止液 | Stop Solution | 1瓶 10 mL | 2-8℃ |
| 封板覆膜 | Plate Sealer | 5 張 | |
| 產(chǎn)品說明書 | Product Description | 1 份 | |
| 質檢報告 | Certificate of Analysis | 1 份 |
說明：所有試劑瓶蓋須旋緊以防止蒸發(fā)和微生物的污染。
試劑體積以實際發(fā)貨版說明書為準。相關試劑在分裝時會比標簽上標明的體積稍多一些，請在使用時量取而非直接倒出。
試驗所需自備物品
1. 酶標儀(450nm波長濾光片)
2. 高精度移液器，EP管及一次性吸頭：0.5-10 μL, 2-20 μL, 20-200 μL, 200-1000 μL
3. 37℃恒溫箱，雙蒸水或去離子水
4. 吸水紙
操作步驟
 | 1. 對應板孔中加入100μL標準品工作液或樣本，37℃孵育90分鐘 |
 | 2. 棄掉板內(nèi)液體后，立即加入100μL生物素化抗體工作液，37℃孵育60分鐘 |
 | 3. 棄掉板內(nèi)液體，洗板3次 |
 | 4. 每孔加入100μL HRP酶結合物工作液，37℃孵育30分鐘，棄掉板內(nèi)液體，洗板5次 |
 | 5. 每孔加入90μL底物溶液，37℃孵育15分鐘左右 |
 | 6. 每孔加入50μL終止液 |
 | 7. 立即在450nm波長下讀數(shù)，處理數(shù)據(jù) |
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