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HL0006 CHO-S倉鼠卵巢細胞價格

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哈靈生物 是一家面向從事科研機構所需得各類試劑、耗材、得產品專業(yè)性公司。主要從事:分子生物學試劑、生物制品、ELISA試劑盒、動物血清、培養(yǎng)基、細胞、抗體等產品的銷售。其中動物血清及培養(yǎng)基為自研品牌,可根據(jù)客戶實驗要求進行定制。 代理品牌 ThermoFisher、國藥、Roche、Sigma、麥克林、阿拉丁 BD、Oxoid、三藥 中檢所、德國DR、USP、EP、JP、QCC、TCL、TRC、LGC、STD IBL、R&D、RB、Abcam、santa cruz、Cell Signaling Technology (CST) GIBCO、HyClone、Biological Industries(BI)

 

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本頁描述的產品僅供科學實驗研究使用,不用于臨床,非醫(yī)療器械,不做其他用途。

CHO-S倉鼠卵巢細胞價格

規(guī)格:1×106個/管
培養(yǎng)基:CHO無動物源培養(yǎng)基
運輸:干冰運輸
保存:液氮保存

質量控制: 

本細胞經過了檢測,不含有細菌、真菌、病毒(HIV、HBV、HCV)、支原體。 
培養(yǎng)條件:
37℃,8% CO2,PH值7.2~7.4,125rpm,無菌恒溫培養(yǎng)。

用途: 
本產品只提供給進一步的科研使用,不可應用于治療等其他方面。
細胞相關操作:

CHO-S倉鼠卵巢細胞價格
CHO-S細胞復蘇
1.37°C水浴預熱培養(yǎng)基(CHO細胞無血清培養(yǎng)基);
2.從液氮中取出細胞迅速放入37°C水浴快速解凍(解凍后不要繼續(xù)暖細胞);
3.在超凈臺中加入5ml培養(yǎng)基重懸細胞,1000rpm離心5min;
4.棄上清,加入5ml培養(yǎng)基重懸細胞,用血小球計數(shù)板進行細胞計數(shù),按細胞密度6-7×105/ml接種到25ml無菌搖瓶中(帶空氣過濾通氣孔的搖瓶);
5.搖瓶置于37°C,8% CO2培養(yǎng)箱中的搖瓶架上,125rpm培養(yǎng)。
CHO-S細胞傳代
1.取細胞計數(shù)(詳見CHO-S細胞凍存),當細胞密度達到1.0-3.0×106/ml時(不要超過3.0×106cells/ml),可傳代;
2.37°C水浴預熱培養(yǎng)基(CHO細胞無血清培養(yǎng)基);
3.在超凈臺中,加適量預熱好的培養(yǎng)基到無菌搖瓶中,以細胞終密度為6-7×105/ml接種細胞(也可1000rpm,5min離心后棄上清,用預熱好的培養(yǎng)基重懸并調整細胞密度為6-7×105/ml),轉移到無菌搖瓶中;
4. 搖瓶置于37°C,8% CO2的培養(yǎng)箱中的搖瓶架上,125rpm培養(yǎng)。
注:CHO-S細胞對氧的要求較高,因此,懸浮培養(yǎng)必須具有高表面積體積比,否則細胞的生長會受到抑制。培養(yǎng)基的體積不能超過搖瓶的五分之二;即100毫升的搖瓶不能超過40ml培養(yǎng)基,250ml搖瓶不能超過100ml培養(yǎng)基。
CHO-S細胞凍存
1.細胞計數(shù):
1)洗凈晾干血小板計數(shù)板和蓋玻片,將蓋玻片*覆蓋計數(shù)區(qū)
2)充分混勻細胞,取少量(0.1-0.5ml)細胞懸液與等體積的染色液臺盼藍混合,移液器吹吸混合均勻,用移液器取20ul混合液從蓋玻片兩端(與中間凹槽平行的兩端)分別打入細胞,以細胞懸液剛好浸濕蓋玻片為佳
3)顯微鏡下,數(shù)四個計數(shù)區(qū)的總細胞數(shù),無活性細胞染成藍色,活細胞不被染色
4)細胞密度=細胞總數(shù)/4×10000×2
這里10000是不變的,因為計數(shù)的細胞是在體積為1mm×1mm×0.1mm即10-4cm3計數(shù)池內,1cm3=1ml,將四個計數(shù)區(qū)的細胞數(shù)除以4取平均數(shù),乘2是補償加等體積臺盼藍形成的稀釋。
5)細胞活性=活細胞數(shù)/細胞總數(shù)×100%
注:細胞密度高時,可調整細胞懸液和臺盼藍的比例,計數(shù)時乘以相應的稀釋倍數(shù)即可。
2.當細胞密度達到傳代密度且細胞活性在90%以上時,可以凍存細胞。
3.37°C水浴預熱培養(yǎng)基(CHO細胞無血清培養(yǎng)基)。
4.在超凈臺中將要凍存的細胞移入離心管,1000rpm離心5min。
5.棄上清,用90%培養(yǎng)液+10%DMSO的混合液重懸細胞,并調整細胞密度為5-10×106/ml。
6.將細胞懸液分裝到凍存管中(1-1.5ml/管)。
7.將裝有細胞的凍存管放入程序降溫凍存盒,-20°C放1-2h后,-80°C過YE,然后快速轉移到液氮中。

CHO-S細胞貼壁培養(yǎng)
1.37°C水浴預熱培養(yǎng)基(CHO細胞無血清培養(yǎng)基+10%FBS);
2.從液氮中取出細胞迅速放入37°C水浴快速解凍(解凍后不要繼續(xù)暖細胞);
3.在超凈臺中加入5ml培養(yǎng)基重懸細胞,1000rpm離心5min;
4.棄上清,加入5ml培養(yǎng)基重懸細胞后轉入T25培養(yǎng)瓶中,輕輕晃勻;
5.置于37°C,8% CO2培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
6.4-6小時后,用新鮮的培養(yǎng)基給細胞換液后繼續(xù)培養(yǎng);
7.每天觀察細胞的狀態(tài)和長勢;
8.當細胞融合度達到90%以上時,給細胞傳代;
9.在超凈臺中,棄培養(yǎng)基,加入2-5mlPBS清洗細胞后,再加入1ml胰酶消化細胞;
10.顯微鏡下觀察到細胞變圓,有細胞開始脫離瓶壁時,加入5ml培養(yǎng)基(CHO細胞無血清培養(yǎng)基+10%FBS)終止消化;
11.用移液器輕輕吹下瓶壁上剩余的細胞,并輕輕吹打將細胞吹散;
12.將細胞移入離心管中,1000rpm離心5min;
13.棄上清,加入15-20ml的培養(yǎng)基(含血清)重懸細胞后轉入T75培養(yǎng)瓶中或按適當比例傳到T25瓶中(確保細胞貼壁后融合度在25-50%之間),細胞密度在1×104 cells/cm2 (2.5×105 cells/T-25瓶),混勻細胞懸液,確保細胞均勻分布;
14.將培養(yǎng)瓶置于37°C

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