豬白介素17測(cè)定試劑盒/IL-17檢測(cè)ELISA試劑盒濟(jì)南北京方程生物公司現(xiàn)貨供應(yīng)

本試劑僅供研究使用 目的：本試劑盒用于測(cè)定人血清，血漿及相關(guān)液體樣本中豬白介素17測(cè)定試劑盒/IL-17檢測(cè)ELISA試劑盒濟(jì)南的含量。
實(shí)驗(yàn)原理：
本試劑盒應(yīng)用雙抗體夾心法測(cè)定標(biāo)本中水平。用純化的抗體包被微孔板，制成固相抗體，往包被單抗的微孔中依次加入 ，再與 HRP標(biāo)記的抗體結(jié)合，形成抗體-抗原-酶標(biāo)抗體復(fù)合物，經(jīng)過*洗滌后加底物TMB 顯色。TMB 在 HRP 酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍(lán)色，并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成zui終的黃色。顏色的深淺和樣品中的 呈正相關(guān)。 用酶標(biāo)儀在 450nm 波長(zhǎng)下測(cè)定吸光度 （OD值） ，通過標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算樣品中人濃度。

 

2.　加樣：加一定稀釋的待檢樣品0.1ml于上述已包被之反應(yīng)孔中，置37℃ 孵育1小時(shí).然后洗滌.（同時(shí)做空白孔，陰性對(duì)照孔及陽性對(duì)照孔）

 

Sepharose 4B指4%的瓊脂糖Sepharose CL-4B指4%高度鉸鏈的瓊脂糖他們的區(qū)別在于鉸鏈程度不一樣,在親和層析色譜中,介質(zhì)鉸鏈程度越高,化學(xué)穩(wěn)定性就應(yīng)該越高.這樣就可以耐受更加苛刻條件洗脫而偶聯(lián)的配基不會(huì)脫落.越是硬質(zhì)的介質(zhì),耐受的流速也會(huì)越高.這樣更節(jié)省平衡洗脫的時(shí)間.

 

 樣本處理及要求：
1. 血清：室溫血液自然凝固 10-20 分鐘，離心 20 分鐘左右（2000-3000 轉(zhuǎn)/分） 。仔細(xì)收集上清，保存過程中如出現(xiàn)沉淀，應(yīng)再次離心。
2. 血漿：應(yīng)根據(jù)標(biāo)本的要求選擇 EDTA 或檸檬酸鈉作為抗凝劑，混合 10-20 分鐘后，離心20 分鐘左右（2000-3000 轉(zhuǎn)/分） 。仔細(xì)收集上清，保存過程中如有沉淀形成，應(yīng)該再次離心。
3. 尿液：用無菌管收集，離心 20 分鐘左右（2000-3000 轉(zhuǎn)/分） 。仔細(xì)收集上清保存過程中如有沉淀形成，應(yīng)再次離心。胸腹水、腦脊液參照實(shí)行。
4. 細(xì)胞培養(yǎng)上清：檢測(cè)分泌性的成份時(shí)，用無菌管收集。離心 20 分鐘左右（2000-3000 轉(zhuǎn)/分） 。仔細(xì)收集上清。檢測(cè)細(xì)胞內(nèi)的成份時(shí)，用 PBS（PH7.2-7.4）稀釋胞懸液，細(xì)胞濃度達(dá)到 100 萬/ml 左右。通過反復(fù)凍融，以使細(xì)胞破壞并放出細(xì)胞內(nèi)成份。離心 20 分鐘左右（2000-3000 轉(zhuǎn)/分） 。仔細(xì)收集上清。保存過程中如有沉淀形成，應(yīng)再次離心。
5. 組織標(biāo)本：切割標(biāo)本后，稱取重量。加入一定量的 PBS，PH7.4。用液氮迅速冷凍保存?zhèn)?br />用。標(biāo)本融化后仍然保持 2-8℃的溫度。加入一定量的 PBS（PH7.4） ，用手工或勻漿器將標(biāo)本勻漿充分。離心 20 分鐘左右（2000-3000 轉(zhuǎn)/分） 。仔細(xì)收集上清。分裝后一份待檢測(cè)，其余冷凍備用。
6. 標(biāo)本采集后盡早進(jìn)行提取，提取按相關(guān)文獻(xiàn)進(jìn)行，提取后應(yīng)盡快進(jìn)行實(shí)驗(yàn)。若不能馬上進(jìn)行試驗(yàn)，可將標(biāo)本放于-20℃保存，但應(yīng)避免反復(fù)凍融.
7. 不能檢測(cè)含 NaN3 的樣品，因 NaN3 抑制辣根過氧化物酶的（HRP）活性。

 

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