i-PTH試劑盒

一、產(chǎn)品概述

二、檢測原理

三、試劑盒組成

四、樣本收集、處理及保存方法

1. 血清：使用不含熱原和內(nèi)毒素的試管，操作過程中避免任何細胞刺激，收集血液后，3000 轉(zhuǎn)離心 10 分鐘將血清和紅細胞迅速小心地分離。

2. 血漿：EDTA、檸檬酸鹽或肝素抗凝。3000 轉(zhuǎn)離心 30 分鐘取上清。

3. 細胞上清液：3000 轉(zhuǎn)離心 10 分鐘去除顆粒和聚合物。

4. 組織勻漿：將組織加入適量生理鹽水搗碎。3000 轉(zhuǎn)離心 10 分鐘取上清。

5. 保存：如果樣本收集后不及時檢測，請按一次用量分裝，凍存于 - 20℃，避免反復凍融，在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。

五、自備物品

1. 酶標儀（450nm）。

2. 高精度加樣器及槍頭：0.5-10uL、2-20uL、20-200uL、200-1000uL。

3. 37℃恒溫箱。

六、操作注意事項

1. 試劑盒保存在 2-8℃，使用前室溫平衡 20 分鐘。從冰箱取出的濃縮洗滌液會有結(jié)晶，這屬于正?，F(xiàn)象，水浴加熱使結(jié)晶wan全溶解后再使用。

2. 實驗中不用的板條應立即放回自封袋中，密封（低溫干燥）保存。

3. 預處理后的樣本無需稀釋，直接取 10μL 加樣即可。

4. 嚴格按照說明書中標明的時間、加液量及順序進行溫育操作。

5. 所有液體組分使用前充分搖勻。

七、操作步驟

1. 從室溫平衡 20min 后的鋁箔袋中取出所需板條，剩余板條用自封袋密封放回 4℃。

2. 設置標準品孔和樣本孔，標準品孔各加不同濃度的標準品 50μL；

3. 待測樣本孔先加待測樣本 10μL，再加樣本xi釋液 40μL；

4. 隨后標準品孔和樣本孔中每孔加入辣根過氧化物酶（HRP）標記的檢測抗體 100μL，用封板膜封住反應孔，37℃水浴鍋或恒溫箱溫育 60min。

5. 棄去液體，吸水紙上拍干，每孔加滿洗滌液，靜置 1min，甩去洗滌液，吸水紙上拍干，如此重復洗板 5 次（也可用洗板機洗板）。

6. 每孔加入底物 A、B 各 50μL，37℃避光孵育 15min。

7. 每孔加入終止液 50μL，15min 內(nèi)，在 450nm 波長處測定各孔的 OD 值。

八、結(jié)果判斷

九、試劑盒性能

1. 準確性：標準品線性回歸與預期濃度相關(guān)系數(shù) R 值，大于等于 0.9900。

2. 靈敏度：最di檢測濃度小于 0.1 pg/mL。

3. 特異性：不與其它可溶性結(jié)構(gòu)類似物交叉反應。

4. 重復性：板內(nèi)變異系數(shù)小于 10%、板間變異系數(shù)小于 15%。

十、貯藏及有效期

1. 貯藏：2-8℃，避光防潮保存。

2. 有效期：6 個月。

十一、注意事項

1. 本試劑盒僅供科研使用，不得用于臨床診斷。

2. 試劑盒使用前應平衡至室溫，使用后應及時放回 2-8℃保存。

3. 洗滌過程要充分，避免殘留物質(zhì)影響檢測結(jié)果。

4. 底物 A 和底物 B 應避免長時間暴露在空氣中，使用后應立即蓋好瓶蓋。

5. 終止液為強酸，使用時應注意安全，避免接觸皮膚和眼睛。

6. 實驗過程中應嚴格遵守操作規(guī)程，避免交叉污染。

7. 如出現(xiàn)任何質(zhì)量問題，請及時與本公司聯(lián)系。