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北京ELISA檢測(cè)試劑盒,大鼠透明質(zhì)酸結(jié)合蛋白(HABP)ELISA Kit操作說(shuō)明書

參考價(jià) 86
訂貨量 ≥1
具體成交價(jià)以合同協(xié)議為準(zhǔn)
  • 公司名稱 上海酶遠(yuǎn)生物科技有限公司
  • 品牌 SPECTRUM/上海光譜
  • 型號(hào)
  • 產(chǎn)地 美國(guó)/中國(guó)
  • 廠商性質(zhì) 生產(chǎn)廠家
  • 更新時(shí)間 2017/6/24 14:07:40
  • 訪問次數(shù) 133

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上海酶遠(yuǎn)生物科技有限公司是一家生物*,公司集經(jīng)銷批發(fā)進(jìn)口ELISA試劑盒,大鼠ELISA試劑盒,進(jìn)口大鼠ELISA試劑盒,elisa試劑盒,elisa試劑盒價(jià)格,人elisa試劑盒,小鼠elisa試劑盒為一體的有限責(zé)任公司,是一家經(jīng)國(guó)家相關(guān)部門批準(zhǔn)注冊(cè)的企業(yè)。ELISA試劑盒、微生物培養(yǎng)基、血清、生物試劑、標(biāo)準(zhǔn)品對(duì)照品、抗體等產(chǎn)品已國(guó)內(nèi)大部分地區(qū) ,銷售額逐年穩(wěn)步上升。
    上海酶遠(yuǎn)生物科技有限公司擁有雄厚的實(shí)力、合理的價(jià)格和優(yōu)良的服務(wù),能夠及時(shí)解決和滿足客戶的各方面的需求,與國(guó)內(nèi)多家企業(yè)建立了良好的*合作關(guān)系,在市場(chǎng)上樹立了公司的良好信譽(yù)和形象。

試劑盒,抗體,試劑,血清

北京ELISA檢測(cè)試劑盒,大鼠透明質(zhì)酸結(jié)合蛋白(HABP)ELISA Kit操作說(shuō)明書 

參數(shù)規(guī)格:

【規(guī)格】:96T/48T

【標(biāo)本】:血清、血漿、細(xì)胞上清液、尿液、體液、灌洗液、腦脊髓、心房水、胸房水、組織等。

【特點(diǎn)】:專一性強(qiáng)、靈敏度高、樣品易保存、結(jié)果易觀察、可以定量測(cè)定、可以大規(guī)模測(cè)定樣品、儀器和試劑簡(jiǎn)單。

【運(yùn)輸】:快遞(根據(jù)客戶要求,選擇具體的運(yùn)輸方式)

使用方法:

1、 血清:操作過(guò)程中避免任何細(xì)胞刺激。使用不含熱原和內(nèi)毒素的試管。收集血液后,1000×g離心10分鐘將血紅細(xì)胞迅速小心地分離。

2、 血漿:EDTA、檸檬酸鹽、肝素血漿可用于檢測(cè)。1000×g離心30分鐘去除顆粒。

3、 細(xì)胞上清液:1000×g離心10分鐘去除顆粒和聚合物。

4、 組織勻漿:將組織加入適量鹽水搗碎。1000×g離心10分鐘,取上清液。

5、 保存:如果樣品不立即使用,應(yīng)將其分成小部分-70℃保存,避免反復(fù)冷凍。盡可能的不要使用溶血或高血脂血。如果血清中大量顆粒,檢測(cè)前先離心或過(guò)濾。不要在37℃或更高的溫度加熱解凍。應(yīng)在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。

操作流程:

1. 實(shí)驗(yàn)前標(biāo)準(zhǔn)品、試劑及樣本的準(zhǔn)備;

2. 加樣(標(biāo)準(zhǔn)品及樣本)100μL,37°C孵育1小時(shí);

3. 吸棄,加檢測(cè)溶液A100μL,37°C孵育1小時(shí);

4. 洗板3次;

5. 加檢測(cè)溶液B100μL,37°C孵育30分鐘;

6. 洗板5次;

7. 加TMB底物90μL,37°C孵育15-25分鐘;

8. 加終止液50μL,立即450nm讀數(shù)。

北京ELISA檢測(cè)試劑盒,大鼠透明質(zhì)酸結(jié)合蛋白(HABP)ELISA Kit操作說(shuō)明書 

工作原理:

將轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子β2 (TGFb2)抗體包被于96孔微孔板中,制成固相載體,向微孔中分別加入標(biāo)準(zhǔn)品或標(biāo)本,其中的轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子β2 (TGFb2)與連接于固相載體上的抗體結(jié)合,然后加入生物素化的轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子β2 (TGFb2)抗體,將未結(jié)合的生物素化抗體洗凈后,加入HRP標(biāo)記的親和素,再次*洗滌后加入TMB底物顯色。TMB在過(guò)氧化物酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍(lán)色,并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成zui終的黃色。顏色的深淺和樣品中的轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子β2 (TGFb2)呈正相關(guān)。用酶標(biāo)儀在450nm波長(zhǎng)下測(cè)定吸光度(O.D.值),計(jì)算樣品濃度。

訂購(gòu)流程:

1、確認(rèn)產(chǎn)品后可直接和我們?cè)诰€,或者是,確認(rèn)您購(gòu)買的產(chǎn)品。

2、可以把您需要購(gòu)買的產(chǎn)品確認(rèn)好以郵件的形式發(fā)給我們,這樣您會(huì)在24小時(shí)內(nèi)收到我們給您回復(fù)確認(rèn)的郵件,或者是。

郵寄產(chǎn)品:

現(xiàn)貨,一般當(dāng)天定購(gòu),隔天由倉(cāng)庫(kù)統(tǒng)一出貨

期貨,出貨前由專人通知,倉(cāng)庫(kù)備貨,依其產(chǎn)品性能,路途等選擇進(jìn)行包裝郵寄,客戶如有特別要求,可與銷售人員提前溝通。

ELISA標(biāo)準(zhǔn)操作及技術(shù)服務(wù)的常見問題分析:

.ELISA 標(biāo)準(zhǔn)操作要點(diǎn)

優(yōu)質(zhì)的試劑,良好的儀器和正確的操作是保證ELISA 檢測(cè)結(jié)果準(zhǔn)確可靠的必要條件。ELISA 中用的蒸餾水或去離子水,包括用于洗滌的,應(yīng)為新鮮的和高質(zhì)量的本公司要求使用的純化水電導(dǎo)率小于1.5μs/cm。

1. 標(biāo)本的采取和保存

大部分ELISA 檢測(cè)均以血清為標(biāo)本。血清標(biāo)本可按常規(guī)方法采集,應(yīng)注意避免溶血,紅細(xì)胞溶解時(shí)會(huì)釋放出具有過(guò)氧化物酶活性的物質(zhì),以HRP 為標(biāo)記的ELISA 測(cè)定中,溶血標(biāo)本可能會(huì)增加非特異性顯色。血清標(biāo)本宜在新鮮時(shí)檢測(cè)。如有細(xì)菌污染,菌體中可能含有內(nèi)源性HRP,也會(huì)產(chǎn)生假陽(yáng)性反應(yīng)。一般說(shuō)來(lái),在5 天內(nèi)測(cè)定的血清標(biāo)本可放置于4℃,標(biāo)本在冰箱中保存時(shí)間過(guò)長(zhǎng)導(dǎo)致血清IgG 聚合,使間接法的試劑本底加深。超過(guò)一周測(cè)定的需-20℃保存。凍結(jié)血清融解后,蛋白質(zhì)局部濃縮,分布不均,應(yīng)充分混勻并避免產(chǎn)生氣泡?;鞚峄蛴谐恋淼难鍢?biāo)本應(yīng)先離心或過(guò)濾,澄清后再檢測(cè)。反復(fù)凍融會(huì)使抗體效價(jià)跌落,所以測(cè)抗體的血清標(biāo)本如需保存作多次檢測(cè),宜少量分裝冰存。保存血清自采集時(shí)就應(yīng)注意無(wú)菌操作,也可加入適當(dāng)防腐劑??鼓?的標(biāo)本因纖維蛋白原的干擾而造成假陽(yáng)性,建議盡量不用抗凝血尤其是肝素抗凝劑。

2.加樣

加樣時(shí)應(yīng)將所加物加在ELISA 板孔的底部,避免加在孔壁上部,并注意不可濺出。

3.保溫

在建立ELISA 方法作反應(yīng)動(dòng)力學(xué)研究時(shí),實(shí)驗(yàn)表明,兩次抗原抗體反應(yīng)一般在37℃經(jīng)

1-2 小時(shí),產(chǎn)物的生成可達(dá)。為避免蒸發(fā),板上應(yīng)加蓋,也可用塑料貼封紙或保鮮膜覆蓋板孔,反應(yīng)板不宜疊放,以保證各板的溫度都能迅速平衡。應(yīng)注意溫育的溫度和時(shí)間應(yīng)按規(guī)定力求準(zhǔn)確。由于公司的試劑盒溫育是在空氣浴中完成,采用水浴會(huì)造成值偏高或花板。另外溫育中還有邊緣效應(yīng),邊上的值會(huì)偏高,建議為了客觀的判斷結(jié)果,將質(zhì)控放在非邊緣位置。

4.洗滌

洗滌在ELISA 過(guò)程中雖不是一個(gè)反應(yīng)步驟,但卻決定著實(shí)驗(yàn)的成敗。ELSIA 就是靠洗滌來(lái)達(dá)到分離游離的和結(jié)合的酶標(biāo)記物的目的。通過(guò)洗滌以清除殘留在板孔中沒能與固相抗原或抗體結(jié)合的物質(zhì),以及在反應(yīng)過(guò)程中非特異性地吸附于固相載體的干擾物質(zhì)。聚苯乙烯等塑料對(duì)蛋白質(zhì)的吸附是普遍性的,而在洗滌時(shí)應(yīng)把這種非特異性吸附的干擾物質(zhì)洗滌下來(lái)??梢哉f(shuō)在ELISA 操作中,洗滌是zui主要的關(guān)鍵技術(shù),應(yīng)引起操作者的高度重視,操作者應(yīng)嚴(yán)格按要求洗滌,不得馬虎。

洗滌液多為含非離子型洗滌劑的中性緩沖液。聚苯乙烯載體與蛋白質(zhì)的結(jié)合是疏水性的,非離子型洗滌劑既含疏水基團(tuán),也含親水基團(tuán),其疏水基團(tuán)與蛋白質(zhì)的疏水基團(tuán)借疏水鍵結(jié)合,從而削弱蛋白質(zhì)與固相載體的結(jié)合,并借助于親水基團(tuán)和水分子的結(jié)合作用,使蛋白質(zhì)回復(fù)到水溶液狀態(tài),從而脫離固相載體。洗滌液中的非離子型洗滌劑一般是吐溫20,其濃度可在0.05%-0.2%之間,高于0.2%時(shí),可使包被在固相上的抗原或抗體解吸附而減低試驗(yàn)的靈敏度。

洗板時(shí)注意各種試劑盒的洗液不要混用。如果洗液需要稀釋,應(yīng)按要求稀釋,所用的水電導(dǎo)率在1.5us/cm 之下,洗液如果結(jié)晶應(yīng)待其融解后配制。保證洗板浸泡時(shí)間為40 秒左右,孔內(nèi)液體被洗板機(jī)吸收得越干凈洗滌效果更好,手工洗板防止洗液在孔內(nèi)形成氣泡。

5. 顯色和比色

TMB 經(jīng)HRP 作用后,約40 分鐘顯色達(dá),隨即逐漸減弱,至2 小時(shí)后即可*消退至無(wú)色。TMB 的終止液有多種,疊氮鈉和十二烷基硫酸鈉(SDS)等酶抑制劑均可使反應(yīng)終止。這類終止劑尚能使藍(lán)色維持較長(zhǎng)時(shí)間(12-24 小時(shí))不褪,是目視判斷的良好終止劑。此外,各類酸性終止液則會(huì)使藍(lán)色轉(zhuǎn)變成黃色,此時(shí)可用特定的波長(zhǎng)(450nm)測(cè)讀吸光值。酶標(biāo)比色儀簡(jiǎn)稱酶標(biāo)儀,通常指于測(cè)讀ELISA 結(jié)果吸光度的光度計(jì)。酶標(biāo)儀的主要性能指標(biāo)有:測(cè)讀速度、讀數(shù)的準(zhǔn)確性、重復(fù)性、精確度和可測(cè)范圍、線性等等。優(yōu)良的酶標(biāo)儀的讀數(shù)一般可精確到0.001,準(zhǔn)確性為±1%,重復(fù)性達(dá)0.5%。酶標(biāo)儀不應(yīng)安置在陽(yáng)光或強(qiáng)光照射下,操作時(shí)室溫宜在15~30℃,使用前先預(yù)熱儀器15-30 分鐘,測(cè)讀結(jié)果更穩(wěn)定。

測(cè)讀A 值時(shí),要選用產(chǎn)物的敏感吸收峰,如OPD 用492nm 波長(zhǎng)。有的酶標(biāo)儀可用雙波長(zhǎng)式測(cè)讀,即每孔先后測(cè)讀兩次,*次在zui適波長(zhǎng)(W1),第二次在不敏感波長(zhǎng)(W2),兩次測(cè)定間不 移動(dòng)ELISA 板的位置,zui終測(cè)得的A 值為兩者之差(W1-W2)。雙波長(zhǎng)式測(cè)讀可減少由容器上的劃痕或指印等造成的光干擾。

北京ELISA檢測(cè)試劑盒,大鼠透明質(zhì)酸結(jié)合蛋白(HABP)ELISA Kit操作說(shuō)明書 



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