l 本試劑盒用于體外定量檢測(cè)血清、血漿、組織、細(xì)胞上清及相關(guān)液體樣本中犬腫瘤壞死因子α（TNF-α）的含量。

l 有效期：6個(gè)月

l 保存條件：2-8℃

l 本試劑盒僅供體外研究使用，不用于臨床診斷

實(shí)驗(yàn)原理

試劑盒采用雙抗體一步夾心法酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)（ELISA）。往預(yù)先包被犬腫瘤壞死因子α（TNF-α）捕獲抗體的包被微孔中，依次加入標(biāo)本、標(biāo)準(zhǔn)品、HRP標(biāo)記的檢測(cè)抗體，經(jīng)過溫育并*洗滌。用底物TMB顯色，TMB在過氧化物酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍(lán)色，并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成zui終的黃色。顏色的深淺和樣品中的犬腫瘤壞死因子α（TNF-α）呈正相關(guān)。用酶標(biāo)儀在450nm 波長(zhǎng)下測(cè)定吸光度（OD 值），計(jì)算樣品濃度。

一、TNF-α,BIM犬腫瘤壞死因子αelisa試劑盒安全性

1.避免直接接觸終止液和底物A、B。一旦接觸到這些液體，請(qǐng)盡快用水沖洗。

2.實(shí)驗(yàn)中不要吃喝、抽煙或使用化妝品。

3.不要用嘴吸取試劑盒里的任何成份。

二、“TNF-α,BIM犬腫瘤壞死因子αelisa試劑盒”操作注意

1.試劑應(yīng)按標(biāo)簽說明書儲(chǔ)存，使用前恢復(fù)到室溫。稀稀過后的標(biāo)準(zhǔn)品應(yīng)丟棄，不可保存。

2.實(shí)驗(yàn)中不用的板條應(yīng)立即放回包裝袋中，密封保存，以免變質(zhì)。

3.使用干凈的塑料容器配置洗滌液。使用前充分混勻試劑盒里的各種成份及樣品。

4.洗滌酶標(biāo)板時(shí)應(yīng)充分拍干，不要將吸水紙直接放入酶標(biāo)反應(yīng)孔中吸水。

5.加入試劑的順序應(yīng)*，以保證所有反應(yīng)板孔溫育的時(shí)間一樣。

三、ELISA OD值的范圍

    在ELISAzui后步驟中OD值的范圍也是有一定講究的，不容小覷。說到OD值范圍，我公司業(yè)務(wù)員在售后問題的處理過程中也常會(huì)有客戶咨詢其范圍是多少。其實(shí)是不一定的，我們以AβELISA為例，2以上就會(huì)偏飽和，變化不容易做出來，所以一般把model組控制在0.8-1.5，而control組的話基本跟空白差不多，不到0.1。

    所以，一般情況下我們會(huì)建議先做個(gè)標(biāo)曲以及樣品的梯度稀釋，然后選擇在標(biāo)曲中間位置的樣品稀釋度作為以后的參照稀釋度。

    同時(shí)，也與使用的detector有關(guān)，detector有自己的檢測(cè)范圍和線性范圍。如果實(shí)驗(yàn)室使用的儀器，說明書上說檢測(cè)范圍是0~4，線性范圍是0~3，但我們自己的實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示的線性范圍是0~2OD。如果只檢測(cè)空白的沒有經(jīng)過處理的Elisa孔，大致在0左右。

四、“TNF-α,BIM犬腫瘤壞死因子αelisa試劑盒”結(jié)果判斷與分析

1.儀器值：于波長(zhǎng)450nm的酶標(biāo)儀上讀取各孔的OD值

2.以吸光度OD值為縱坐標(biāo)（Y），相應(yīng)的待測(cè)物質(zhì)標(biāo)準(zhǔn)品濃度為橫坐標(biāo)（X），做得相應(yīng)的曲線，樣品的待測(cè)物質(zhì)含量可根據(jù)其OD值由標(biāo)準(zhǔn)曲線換算出相應(yīng)的濃度。