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人APP基因轉(zhuǎn)染CHO細(xì)胞株;7WD10培養(yǎng)

具體成交價(jià)以合同協(xié)議為準(zhǔn)
  • 公司名稱 上海研生實(shí)業(yè)有限公司
  • 品牌 ATCC
  • 型號
  • 產(chǎn)地 進(jìn)口/國產(chǎn)
  • 廠商性質(zhì) 經(jīng)銷商
  • 更新時(shí)間 2018/5/7 15:47:40
  • 訪問次數(shù) 509
產(chǎn)品標(biāo)簽

人APP基因轉(zhuǎn)7WD10

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上海研生實(shí)業(yè)有限公司成立于2011年專業(yè)銷售各種科學(xué)實(shí)驗(yàn)產(chǎn)品,包括分子生物學(xué)、細(xì)胞生物學(xué)、免疫學(xué)、等多個(gè)研究及應(yīng)用領(lǐng)域。旗下有“上研生”品牌。


  我們努力將歐美進(jìn)口品牌的產(chǎn)品推薦給各類研究人員;另一方面也非常重視國內(nèi)科研市場的產(chǎn)品開發(fā),推出了一系列具有競爭力的產(chǎn)品和服務(wù)。


  同時(shí)國家對于生物行業(yè)的發(fā)展給予極大的重視,更多地側(cè)重于科研的投入。公司的服務(wù)和業(yè)務(wù)在同行獲得認(rèn)可。也具備豐富的管理經(jīng)驗(yàn),同時(shí)我們建立了集技術(shù)支持、售后服務(wù)等多方位的服務(wù)體系。我們有激情、有理想,更有責(zé)任感,是您科研道路上值得信賴的伙伴。


  公司的理念是:以誠信為本,努力打造優(yōu)質(zhì)品牌,為您提供產(chǎn)品的售中、售后服務(wù)。









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細(xì)胞名稱  人APP基因轉(zhuǎn)染CHO細(xì)胞株;7WD10培養(yǎng)
形態(tài)特性 梭形 

品牌 貼壁生長

特征特性 采用脂質(zhì)體轉(zhuǎn)染的方法,穩(wěn)定轉(zhuǎn)染CHO細(xì)胞野生型AβPPTS1 基因,所得細(xì)胞表達(dá)野生型AβPPTS1蛋白。

培養(yǎng)條件 DMEM-H:

Dulbecco's Modified Eagle's Medium (DME H-21 4.5g/Liter Glucose) 10%FBS;250ug/ml G418  

傳代方法 1:

3傳代;2~3天一次。  

傳代情況 不詳

凍存條件 基礎(chǔ)培養(yǎng)基+5%DMSO+20%FBS 

支原體檢測 培養(yǎng)法(-) 

STR -

同工?
人APP基因轉(zhuǎn)染CHO細(xì)胞株;7WD10培養(yǎng)貼壁細(xì)胞: 對于貼壁細(xì)胞應(yīng)先吸(倒)盡培養(yǎng)基,吸的越干凈越好,以免中和后加入的消化液,使強(qiáng)度減弱(或PBS洗1-3次)。50ml培養(yǎng)瓶加入消化液約1-3ml,按此比例進(jìn)行消化,(根據(jù)經(jīng)驗(yàn)),晃動使消化液鋪均勻置37度培養(yǎng)箱約2-5分鐘,鏡下見細(xì)胞收縮變圓或少數(shù)脫落后,輕輕振動瓶底使細(xì)胞全部脫落,加入2-3ml*培養(yǎng)基后,輕輕吹打,使細(xì)胞基本成單個(gè)懸浮,然后分置其它無菌培養(yǎng)瓶內(nèi),加入*培養(yǎng)基后繼續(xù)培養(yǎng)或?qū)嶒?yàn)。
操作流程:
1.1 主要試劑與儀器:倒置相差顯微鏡(日本 olympus imt-413),co2孵箱(日本yamato it-61)。
1.2 hek-293細(xì)胞的復(fù)蘇培養(yǎng)傳代及凍存:
1.2.1 細(xì)胞的復(fù)蘇培養(yǎng) 從液氮罐中取出凍存管,立即投入37℃水浴,并不斷的搖動,使之迅速融化。 將溶解的細(xì)胞凍存管取出,用酒精消毒后打開,吸出溶有細(xì)胞的凍存液,加入事先裝好培養(yǎng)液(37℃預(yù)熱,8~10倍體積)離心管內(nèi),稍微吹打混勻,然后1000rpm 5min,去除上清,加入適量培養(yǎng)液,吹打成細(xì)胞懸液, 以1×105/ml密度接種于25cm2培養(yǎng)瓶內(nèi),在37℃、5%co2及飽和濕度下培養(yǎng)。
1.2.2 細(xì)胞傳代 原代培養(yǎng)的hek-293細(xì)胞48h換液1次,細(xì)胞長至60%~70%融合時(shí),用0.25%胰酶消化1~2min,將培養(yǎng)瓶再用手掌輕輕敲打使細(xì)胞脫壁、懸浮、分散,為使細(xì)胞進(jìn)一步分散可用吹打管輕輕吹打幾次,獲得細(xì)胞懸液,然后加入倍量的培養(yǎng)基,溫和混勻,吸管分裝混合液,傳代擴(kuò)增細(xì)胞。
1.3 細(xì)胞形態(tài)的觀察 在倒置顯微鏡下觀察并記錄細(xì)胞的生長情況及形態(tài)特征。
1.4 細(xì)胞的計(jì)數(shù) 常規(guī)消化細(xì)胞,待細(xì)胞變圓、脫壁并浮起,加入少量培養(yǎng)基離心,再用pbs重懸并吹打制成細(xì)胞懸液。在細(xì)胞計(jì)數(shù)板蓋玻片的一側(cè)加微量細(xì)胞懸液,用10×物鏡觀察計(jì)數(shù)板四角大方格細(xì)胞數(shù),按公式計(jì)算出細(xì)胞數(shù)。細(xì)胞數(shù)/ml原液=(四方格細(xì)胞數(shù)之和/4) ×104。
1.5 細(xì)胞的貼壁率 指數(shù)生長期的細(xì)胞,以0.25%胰酶消化成單細(xì)胞懸液,計(jì)數(shù)后分別接種于12個(gè)25cm2培養(yǎng)瓶中,每兩小時(shí)隨機(jī)取出3瓶細(xì)胞,吸除培養(yǎng)基及未貼壁細(xì)胞,加入胰消化酶消化、計(jì)數(shù)已貼壁細(xì)胞,取其平均值,按照公式:貼壁率(%)=(已貼壁細(xì)胞數(shù)/接種細(xì)胞數(shù)) ×100%,計(jì)算貼壁率。 
1.6 生長曲線 取指數(shù)生長期的細(xì)胞用胰酶消化制成單細(xì)胞懸液,以1×104/孔接種于24孔板,每孔加入1ml培養(yǎng)基。每天隨機(jī)取3孔,計(jì)數(shù)每孔細(xì)胞的數(shù)目并計(jì)算平均值。連續(xù)計(jì)數(shù)10d,繪制細(xì)胞生長曲線
Anti-HPV/FITC 熒光素標(biāo)記人類狀瘤病毒抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格: 0.2ml

Anti-phospho-c-Jun (Ser63) /FITC 熒光素標(biāo)記磷酸化原癌基因c-Jun抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格: 0.2ml

Rhesus antibody Rh AT2R/AT1 血管緊張素Ⅱ受體1抗體 規(guī)格 0.2ml

Mouse Anti-human IgG(3D3)/PE-CY5 PE-CY5標(biāo)記的鼠抗人IgG單克隆抗體 0.1ml

GSTA1 英文名稱: 谷胱甘肽S轉(zhuǎn)移酶α1抗體 0.2ml

Rhesus antibody Rh Rabbit Anti-mouse IgG-Fc/Alexa Fluor 647 Alexa Fluor 647標(biāo)記的兔抗小鼠IgG-Fc 規(guī)格 0.1ml

Anti-phospho-c-Jun (Ser63) /FITC 熒光素標(biāo)記磷酸化原癌基因c-Jun抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
LPO(Human lipid peroxlde) ELISA Kit 人過氧化脂質(zhì)/乳過氧化物酶Multi-class antibodies規(guī)格: 48T

Anti-NGX6 鼻咽癌細(xì)胞相關(guān)基因6抗體Multi-class antibodies規(guī)格: 0.1ml

Rhesus antibody Rh IL-17 白介素-17抗體 規(guī)格 0.1ml

Human anti-IVIgG antibody ELISA Kit 人抗IVIgG抗體 96T

PTPN7 英文名稱: 非受體型蛋白酪酸磷酸酶7抗體 0.2ml

Phospho-CDC42 (Ser71) 英文名稱: 磷酸化細(xì)胞分化周期CDC42蛋白抗體 0.1ml

Anti-NGX6 鼻咽癌細(xì)胞相關(guān)基因6抗體Multi-class antibodies規(guī)格: 0.1ml
Rabbit anti-mouse Kappa light chain/Alexa Fluor 555 Alexa Fluor 555標(biāo)記的兔抗小鼠k鏈 0.1ml

Grpa 英文名稱: 半乳糖凝集素相關(guān)蛋白A抗體 0.2ml

Rhesus antibody Rh AP2M1/AP-2 接頭相關(guān)蛋白復(fù)合體AP-2μ鏈1抗體 規(guī)格 0.2ml

Anti-IL-18R Alpha/FITC 熒光素標(biāo)記白細(xì)胞介素-18受體α鏈抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格: 0.2ml

Rhesus antibody Rh Rabbit Anti-human IgM/Bio 生物素標(biāo)記的兔抗人IgM 規(guī)格 0.3ml

Anti-Phospho-Raptor (Ser792) /FITC 熒光素標(biāo)記磷酸化mTOR相關(guān)調(diào)控蛋白抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
Anti-PRDX3/FITC 熒光素標(biāo)記過氧化還原酶3抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格: 0.2ml

Rabbit Anti-horse IgG Whole serum 兔抗馬IgG抗血清Multi-class antibodies規(guī)格: 1ml

擬南芥IKI3抗體 Anti-IKI3 family protein 0.2ml

Donkey anti-Gpig IgG whole serum 驢抗豚鼠IgG抗血清 1ml

FAKD3 英文名稱: 下頜發(fā)育不良綜合征相關(guān)蛋白FAKD3抗體 0.2ml

Rhesus antibody Rh phospho-PTPN7(Ser93) 磷酸化非受體型蛋白酪氨酸磷酸酶7抗體 規(guī)格 0.1ml

Rabbit Anti-horse IgG Whole serum 兔抗馬IgG抗血清Multi-class antibodies規(guī)格: 1ml
懸浮細(xì)胞: 一般傳代可直接將細(xì)胞原液分置其它培養(yǎng)瓶內(nèi),加入*培養(yǎng)基繼續(xù)培養(yǎng),如要高濃度可先離心1000rpm,5min后加入*培養(yǎng)基,輕輕吹勻后,分置其它培養(yǎng)瓶內(nèi)加入*培養(yǎng)基繼續(xù)培養(yǎng)。需要指出的是,在不同的科研小組中這些術(shù)語的定義會有所不同。許多研究員不用細(xì)胞系這個(gè)詞表示細(xì)胞群除非細(xì)胞經(jīng)過了遺傳改造。



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