豚鼠胚胎細(xì)胞；104C1價(jià)格懸浮細(xì)胞: 一般傳代可直接將細(xì)胞原液分置其它培養(yǎng)瓶?jī)?nèi)，加入*培養(yǎng)基繼續(xù)培養(yǎng)，如要高濃度可先離心1000rpm，5min后加入*培養(yǎng)基，輕輕吹勻后，分置其它培養(yǎng)瓶?jī)?nèi)加入*培養(yǎng)基繼續(xù)培養(yǎng)。需要指出的是，在不同的科研小組中這些術(shù)語(yǔ)的定義會(huì)有所不同。許多研究員不用細(xì)胞系這個(gè)詞表示細(xì)胞群除非細(xì)胞經(jīng)過(guò)了遺傳改造。
細(xì)胞名稱(chēng)  豚鼠胚胎細(xì)胞；104C1價(jià)格
形態(tài)特性 成纖維細(xì)胞樣

品牌 貼壁生長(zhǎng)

特征特性 104C1細(xì)胞初期源于2/N株豚鼠的胎組織，后來(lái)細(xì)胞群體用苯并芘(Benzopyrene)處理7天誘導(dǎo)細(xì)胞產(chǎn)生惡性轉(zhuǎn)化，連續(xù)克隆后獲得傳代細(xì)胞系。細(xì)胞染色體保留2倍體特征，但接種豚鼠產(chǎn)生實(shí)體腫瘤。

培養(yǎng)條件 RPMI 1640 (w/o Hepes) 新生牛血清，10%

傳代方法 1：3~1：8

傳代情況 P32

凍存條件 基礎(chǔ)培養(yǎng)基+5%DMSO+20%FBS

支原體檢測(cè) 培養(yǎng)法（-）

STR

同工酶

染色體

使用權(quán)限 A類(lèi)

貼壁細(xì)胞: 對(duì)于貼壁細(xì)胞應(yīng)先吸(倒)盡培養(yǎng)基，吸的越干凈越好，以免中和后加入的消化液，使強(qiáng)度減弱（或PBS洗1－3次）。50ml培養(yǎng)瓶加入消化液約1-3ml，按此比例進(jìn)行消化，(根據(jù)經(jīng)驗(yàn))，晃動(dòng)使消化液鋪均勻置37度培養(yǎng)箱約2-5分鐘，鏡下見(jiàn)細(xì)胞收縮變圓或少數(shù)脫落后，輕輕振動(dòng)瓶底使細(xì)胞全部脫落，加入2-3ml*培養(yǎng)基后，輕輕吹打，使細(xì)胞基本成單個(gè)懸浮，然后分置其它無(wú)菌培養(yǎng)瓶?jī)?nèi)，加入*培養(yǎng)基后繼續(xù)培養(yǎng)或?qū)嶒?yàn)。

操作流程：
1.1 主要試劑與儀器：倒置相差顯微鏡（日本 olympus imt-413），co2孵箱（日本yamato it-61）。
1.2 hek-293細(xì)胞的復(fù)蘇培養(yǎng)傳代及凍存：
1.2.1 細(xì)胞的復(fù)蘇培養(yǎng) 從液氮罐中取出凍存管,立即投入37℃水浴,并不斷的搖動(dòng),使之迅速融化。 將溶解的細(xì)胞凍存管取出,用酒精消毒后打開(kāi),吸出溶有細(xì)胞的凍存液,加入事先裝好培養(yǎng)液（37℃預(yù)熱，8～10倍體積）離心管內(nèi),稍微吹打混勻,然后1000rpm 5min,去除上清,加入適量培養(yǎng)液,吹打成細(xì)胞懸液, 以1×105/ml密度接種于25cm2培養(yǎng)瓶?jī)?nèi)，在37℃、5％co2及飽和濕度下培養(yǎng)。
1.2.2 細(xì)胞傳代 原代培養(yǎng)的hek－293細(xì)胞48h換液1次，細(xì)胞長(zhǎng)至60%～70%融合時(shí)，用0.25%胰酶消化1～2min，將培養(yǎng)瓶再用手掌輕輕敲打使細(xì)胞脫壁、懸浮、分散，為使細(xì)胞進(jìn)一步分散可用吹打管輕輕吹打幾次，獲得細(xì)胞懸液，然后加入倍量的培養(yǎng)基，溫和混勻，吸管分裝混合液，傳代擴(kuò)增細(xì)胞。
1.3 細(xì)胞形態(tài)的觀(guān)察 在倒置顯微鏡下觀(guān)察并記錄細(xì)胞的生長(zhǎng)情況及形態(tài)特征。
1.4 細(xì)胞的計(jì)數(shù) 常規(guī)消化細(xì)胞，待細(xì)胞變圓、脫壁并浮起，加入少量培養(yǎng)基離心，再用pbs重懸并吹打制成細(xì)胞懸液。在細(xì)胞計(jì)數(shù)板蓋玻片的一側(cè)加微量細(xì)胞懸液，用10×物鏡觀(guān)察計(jì)數(shù)板四角大方格細(xì)胞數(shù)，按公式計(jì)算出細(xì)胞數(shù)。細(xì)胞數(shù)/ml原液＝(四方格細(xì)胞數(shù)之和/4) ×104。
1.5 細(xì)胞的貼壁率 指數(shù)生長(zhǎng)期的細(xì)胞，以0.25％胰酶消化成單細(xì)胞懸液，計(jì)數(shù)后分別接種于12個(gè)25cm2培養(yǎng)瓶中，每?jī)尚r(shí)隨機(jī)取出3瓶細(xì)胞，吸除培養(yǎng)基及未貼壁細(xì)胞，加入胰消化酶消化、計(jì)數(shù)已貼壁細(xì)胞，取其平均值，按照公式：貼壁率(%)=(已貼壁細(xì)胞數(shù)/接種細(xì)胞數(shù)) ×100％，計(jì)算貼壁率。 
1.6 生長(zhǎng)曲線(xiàn) 取指數(shù)生長(zhǎng)期的細(xì)胞用胰酶消化制成單細(xì)胞懸液，以1×104/孔接種于24孔板，每孔加入1ml培養(yǎng)基。每天隨機(jī)取3孔，計(jì)數(shù)每孔細(xì)胞的數(shù)目并計(jì)算平均值。連續(xù)計(jì)數(shù)10d，繪制細(xì)胞生長(zhǎng)曲線(xiàn)
Anti-Egr-1/FITC 熒光素標(biāo)記早期反應(yīng)基因-1/應(yīng)急反應(yīng)生長(zhǎng)基因1抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml

Anti-MMP-1/FITC 熒光素標(biāo)記基質(zhì)金屬蛋白酶-1抗體Multi-class antibodies規(guī)格： 0.2ml

Rhesus antibody Rh C2orf44 2號(hào)染色體開(kāi)放閱讀框44抗體 規(guī)格 0.2ml

ABCD-1/CCL22 嗜酸粒細(xì)胞趨化蛋白22抗原 0.2mg

H2BFM 英文名稱(chēng)： H2B組蛋白家族M蛋白抗體 0.2ml

Rhesus antibody Rh SAMD15/C14orf174 14號(hào)染色體開(kāi)放閱讀框174 規(guī)格 0.2ml

Anti-MMP-1/FITC 熒光素標(biāo)記基質(zhì)金屬蛋白酶-1抗體Multi-class antibodies規(guī)格： 0.2ml
LIF 人白血病抑制因子Multi-class antibodies規(guī)格： 48T

Anti-Cripto-1 畸胎瘤衍化生長(zhǎng)因子抗體(C端)Multi-class antibodies規(guī)格： 0.2ml

Rhesus antibody Rh Nitrotyrosine 硝基酪氨酸抗體 規(guī)格 0.2ml

Human cytoplasmic immunoglobulin,CIg ELISA Kit 人胞漿免疫球蛋白 96T

phospho-ARP2 (Thr237) 英文名稱(chēng)： 磷酸化肌動(dòng)蛋白相關(guān)蛋白2抗體 0.1ml

CENTB1 英文名稱(chēng)： 胞吞再循環(huán)相關(guān)銜接蛋白CENTB1抗體 0.1ml

Anti-Cripto-1 畸胎瘤衍化生長(zhǎng)因子抗體(C端)Multi-class antibodies規(guī)格： 0.2ml
Rabbit Anti-mouse IgG-Fc/Bio 生物素標(biāo)記的兔抗小鼠IgG-Fc 0.1ml

GOLGA7 英文名稱(chēng)： 高爾基體膜相關(guān)蛋白7抗體 0.2ml

Rhesus antibody Rh Amphiregulin 雙調(diào)蛋白(結(jié)腸直腸細(xì)胞源性生長(zhǎng)因子)抗體 規(guī)格 0.1ml

Anti-Integrin Alpha6/CD49f/VLA-6/FITC 熒光素標(biāo)記整合素α6抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml

Rhesus antibody Rh Rabbit Anti-horse IgG/Gold 膠體金標(biāo)記的兔抗馬IgG 規(guī)格 0.5ml

Anti-phospho-SHC (Tyr349) /FITC 熒光素標(biāo)記磷酸化SH2結(jié)構(gòu)域轉(zhuǎn)化蛋白1抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml
Anti-ID1/Inhibitor of DNA binding 1 /FITC 熒光素標(biāo)記DNA結(jié)合抑制因子1抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml

Anti-PKC gamma/SCA14/FITC 熒光素標(biāo)記蛋白激酶C亞型G抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml

Rhesus antibody Rh ARSH 芳香基酯酶H抗體 規(guī)格 0.2ml

Donkey Anti-human IgG/PE-CY5 PE-CY5標(biāo)記的驢抗人IgG 0.1ml

GCAP3 英文名稱(chēng)： 鳥(niǎo)苷酸環(huán)化酶激活蛋白3抗體 0.2ml

Rhesus antibody Rh Rabbit Anti-Monkey IgG/PE PE標(biāo)記的兔抗猴IgG 規(guī)格 0.1ml

Anti-PKC gamma/SCA14/FITC 熒光素標(biāo)記蛋白激酶C亞型G抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml