細(xì)胞名稱(chēng)   牛腎細(xì)胞；MDBK(BVDV-free)品牌
形態(tài)特性 上皮細(xì)胞樣

品牌 貼壁生長(zhǎng)

特征特性 該細(xì)胞由中國(guó)藥品生物制品檢定所細(xì)胞室王佑春主任贈(zèng)送。MDBK細(xì)胞對(duì)包括牛腺病毒、牛細(xì)小病毒、牛腹瀉病毒在內(nèi)的多種病毒敏感，可用于這些病毒的擴(kuò)增、檢測(cè)研究。

培養(yǎng)條件 MEM-EBSS：

Minimum Essential Medium (MEM Eagles with Earle's Balanced Salts) 10%FBS  

傳代方法 1：

3傳代,2-3天傳一代  

傳代情況 C112

凍存條件 基礎(chǔ)培養(yǎng)基+5%DMSO+20%FBS　

支原體檢測(cè)

庫(kù)存狀態(tài)：現(xiàn)貨
細(xì)胞規(guī)格：株
質(zhì)控標(biāo)準(zhǔn)：無(wú)支原體、無(wú)污染、符合標(biāo)準(zhǔn)
運(yùn)輸方式：新鮮運(yùn)輸和凍存管運(yùn)輸
貨期：新鮮運(yùn)輸需要1-2周，凍存管運(yùn)輸?shù)男枰?-3天
本公司的牛腎細(xì)胞；MDBK(BVDV-free)品牌采用胰蛋白酶-膠原酶混合消化法結(jié)合差速貼壁法制備而來(lái)，細(xì)胞總量約為5×10^5cells/瓶；細(xì)胞經(jīng)Vimentin免疫熒光鑒定，純度可達(dá)90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌等。
Anti-EF1a/FITC 熒光素標(biāo)記延伸因子EF-1a抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml

Anti-Myosin Phosphatase/FITC 熒光素標(biāo)記肌球蛋白磷酸酶抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml

Rhesus antibody Rh C3c/Complement fragment 3c 補(bǔ)體片段C3c抗體 規(guī)格 0.2ml

VEGF(Vascular endothelial growth factor) 血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子(多肽抗原) 0.5mg

hCG alpha 4 英文名稱(chēng)： 甲狀腺促進(jìn)激素alpha鏈 0.2ml

Rhesus antibody Rh SARS putative orflab polyprotein 抗體 規(guī)格 0.2ml

Anti-Myosin Phosphatase/FITC 熒光素標(biāo)記肌球蛋白磷酸酶抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml
KGF 大鼠角蛋白生長(zhǎng)因子Multi-class antibodies規(guī)格： 48T

Anti-ENPP3/CD203c ENPP3抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml

Rhesus antibody Rh MURF2 肌肉特異性環(huán)指蛋白2抗體 規(guī)格 0.2ml

f-Hb(Human free haemoglobin) ELISA Kit 人游離血紅蛋白 96T

SLCO3A1 英文名稱(chēng)： 可溶性載質(zhì)轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白3A1抗體 0.2ml

CHRND 英文名稱(chēng)： 型乙酰膽堿受體δ/AChRδ抗體 0.2ml

Anti-ENPP3/CD203c ENPP3抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml
Rabbit Anti-Mink IgG/Gold 膠體金標(biāo)記的兔抗水貂IgG 0.5ml

GCNT7 英文名稱(chēng)： β1-6 N-乙?；咸烟寝D(zhuǎn)移酶7抗體 0.2ml

Rhesus antibody Rh ARMC3 (Cancer/testis antigen 81) /抗原81抗體 規(guī)格 0.2ml

Anti-IGF-IIBP3/FITC 熒光素標(biāo)記胰島素樣生長(zhǎng)因子2 mRNA 結(jié)合蛋白3抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml

Rhesus antibody Rh Rabbit Anti-MK IgM/PE-Cy7 PE-Cy7標(biāo)記的兔抗猴IgM 規(guī)格 0.1ml

Anti-Plexin B1/Semaphorin receptor/FITC 熒光素標(biāo)記神經(jīng)叢蛋白B1抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml
牛腎細(xì)胞；MDBK(BVDV-free)品牌ATA(Human anti-trophoblast antibody,ATA ) ELISA Kit 人抗滋養(yǎng)膜細(xì)胞抗體Multi-class antibodies規(guī)格： 48T

Anti-phospho-Akt(Thr308) 磷酸化蛋白激酶B抗體Multi-class antibodies規(guī)格： 0.1ml

Rhesus antibody Rh HEF1 蛋白激酶底物相關(guān)蛋白抗體 規(guī)格 0.2ml

Human Amylin ELISA Kit 人胰淀素 96T

PKN2 英文名稱(chēng)： 蛋白激酶N2抗體 0.1ml

phospho-Cyclin E2 (Thr392) 英文名稱(chēng)： 磷酸化周期素E2抗體 0.1ml

Anti-phospho-Akt(Thr308) 磷酸化蛋白激酶B抗體Multi-class antibodies規(guī)格： 0.1ml
牛腎細(xì)胞；MDBK(BVDV-free)品牌復(fù)蘇操作要點(diǎn)：
1）將培養(yǎng)基在37℃水浴鍋預(yù)熱；準(zhǔn)備一個(gè)15mL無(wú)菌的離心管，加入8mL預(yù)熱培養(yǎng)基。
2）將凍存細(xì)胞從液氮罐中取出，快速放入37℃水浴鍋中復(fù)溫（可準(zhǔn)備一潔凈的燒杯，裝滿(mǎn)37℃的水，細(xì)胞凍存管取出后迅速放入燒杯內(nèi)，再逐步轉(zhuǎn)移到水浴鍋中）。輕輕晃動(dòng)凍存管，使細(xì)胞能在1~2min內(nèi)*解凍，使細(xì)胞能盡快通過(guò)zui易受損的溫度段（-5~0℃）。注意凍存管管口不能沒(méi)入水中，BRL(大鼠肝細(xì)胞)避免引起污染。
3）用75%酒精擦拭凍存管后再置于超凈臺(tái)內(nèi)，將管內(nèi)細(xì)胞轉(zhuǎn)移至準(zhǔn)備好的離心管內(nèi)，輕輕吹打液體，使細(xì)胞均勻分散，降低DMSO濃度，吹打時(shí)避免產(chǎn)生氣泡。用新鮮培養(yǎng)基洗管壁2次，均轉(zhuǎn)移至離心管內(nèi)。
4）800rpm離心5min，棄上清，加入新鮮的培養(yǎng)基，吹打制成細(xì)胞懸液。
5）將細(xì)胞懸液轉(zhuǎn)移至T25細(xì)胞瓶?jī)?nèi)，補(bǔ)加適量的培養(yǎng)基，輕輕晃動(dòng)細(xì)胞瓶使細(xì)胞分布均勻，放入溫箱內(nèi)培養(yǎng)。
6）第二天觀(guān)察細(xì)胞貼壁生長(zhǎng)情況，換新鮮培養(yǎng)基以去除死細(xì)胞。繼續(xù)培養(yǎng)，待細(xì)胞長(zhǎng)至80~90%匯合時(shí)正常傳代。一般剛復(fù)蘇的細(xì)胞需經(jīng)過(guò)2~3次傳代，細(xì)胞活力恢復(fù)后才能進(jìn)行后續(xù)的實(shí)驗(yàn)。