HEEC 人正常食管上皮細(xì)胞|HEEC細(xì)胞有鑒定
- 公司名稱 青旗(上海)生物技術(shù)發(fā)展有限公司
- 品牌 其他品牌
- 型號(hào)
- 產(chǎn)地
- 廠商性質(zhì) 生產(chǎn)廠家
- 更新時(shí)間 2023/6/29 12:37:48
- 訪問(wèn)次數(shù) 1435
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上海青旗生物科技有限公司是一批由美國(guó)留學(xué)歸來(lái)的致力于服務(wù)中國(guó)生物領(lǐng)域的青年創(chuàng)辦的一家新型公司。公司自創(chuàng)辦以來(lái),以優(yōu)質(zhì)的產(chǎn)品、快捷的速度和完善的售后服務(wù),贏得生物界老師的厚愛(ài),您選擇青旗的理由: 產(chǎn)品齊全:囊括實(shí)驗(yàn)室儀器、設(shè)備、實(shí)驗(yàn)室耗材、免疫生物學(xué)試劑、動(dòng)物生物學(xué)試劑、植物生物學(xué)試劑、微生物學(xué)試劑、細(xì)胞生物學(xué)試劑、遺傳學(xué)生物試劑、生物化學(xué)試劑、分子生物學(xué)試劑。 品牌齊全:囊括國(guó)內(nèi)外100多個(gè)知名品牌。 方便、快捷,訂貨周期短,選擇服務(wù)質(zhì)量好的快遞,全稱跟蹤,及時(shí)到達(dá)您的手中。青旗生物努力打造生物領(lǐng)域內(nèi)的京東商城。 平價(jià):同等質(zhì)量的產(chǎn)品,我們這里價(jià)格實(shí)惠,為您節(jié)省每一分錢(qián)。 優(yōu)質(zhì)的售后服務(wù):實(shí)驗(yàn)過(guò)程,我們有技術(shù)全程跟蹤指導(dǎo),若有問(wèn)題,我們*時(shí)間為您處理,保證您售后無(wú)憂。 多姿多彩的技術(shù)服務(wù):免疫學(xué)技術(shù)服務(wù)、Western Blotting技術(shù)服務(wù)、實(shí)時(shí)熒光定量PCR(RealTime PCR)技術(shù)服務(wù)、病理學(xué)檢測(cè)技術(shù)服務(wù)等。 總之,青旗生物是您值得信賴的地方:誠(chéng)實(shí)正直,以客戶的切身利益為出發(fā)點(diǎn),關(guān)注客戶,協(xié)助客戶一起成長(zhǎng)!
細(xì)胞名稱:HEEC 人正常食管上皮細(xì)胞|HEEC細(xì)胞有鑒定
一、細(xì)胞培養(yǎng)
(一)原理 細(xì)胞培養(yǎng)(Cell culture)是模擬機(jī)體內(nèi)生理?xiàng)l件,將細(xì)胞從機(jī)體中取出,在人工條件下使其生存、生長(zhǎng)、繁殖和傳代,進(jìn)行細(xì)胞生命過(guò)程、細(xì)胞癌變、細(xì)胞工程等問(wèn)題的研究。近年來(lái),廣泛地應(yīng)用于分子生物學(xué)、遺傳學(xué)、免疫學(xué)、腫瘤學(xué)、細(xì)胞工程等領(lǐng)域,發(fā)展成一種重要生物技術(shù),并取得顯著成就。由體內(nèi)直接取出組織或細(xì)胞進(jìn)行培養(yǎng)叫原代培養(yǎng)。原代培養(yǎng)細(xì)胞離體時(shí)間短,性狀與體內(nèi)相似,適用于研究。一般說(shuō)來(lái),幼稚狀態(tài)的組織和細(xì)胞,如:動(dòng)物的胚胎、幼仔的臟器等更容易進(jìn)行原代培養(yǎng)。
(二)操作 1.取材 用頸椎脫位法使乳兔迅速死亡。然后,把整個(gè)動(dòng)物浸入盛有75%乙醇的燒杯中數(shù)秒鐘消毒,取出后放在大平皿中攜入超凈臺(tái)。用消過(guò)毒的剪刀剪開(kāi)用碘酒和乙醇再次消毒后的皮膚,剖腹取出肝臟或腎臟。置于無(wú)菌平皿中。 2.切割 用滅菌的PBS液將取出的臟器清洗三次,然后用眼科手術(shù)剪刀仔細(xì)將組織反復(fù)剪碎,直到成1mm3左右的小塊,再用PBS清洗,洗到組織塊發(fā)白為止。移入無(wú)菌離心管中,靜置數(shù)分鐘,使組織塊自然沉淀到管底,棄去上清。 3.消化、接種培養(yǎng) 吸取0.25%胰蛋白酶一0.02%EDTA混合消化液1ml,加入離心管中,與組織塊混勻后,加上管口塞子,37℃水浴中消化8~10分鐘,每隔幾分鐘搖動(dòng)一下試管,使組織與消化液充分接觸,靜止,吸去上清,向離心管中加入5~10ml含5%小牛血清的MEM培養(yǎng)基,用吸管吹打混勻,移入二個(gè)培養(yǎng)瓶中,置于二氧化碳培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。
(三)結(jié)果 細(xì)胞接種后一般幾小時(shí)內(nèi)就能貼壁,并開(kāi)始生長(zhǎng),如接種的細(xì)胞密度適宜,5天到一周即可形成單層。
HEEC 人正常食管上皮細(xì)胞|HEEC細(xì)胞有鑒定
2BS 人胚肺二倍體細(xì)胞
293(HEK-293;HEK293)人胚腎細(xì)胞
293 Ad5人原胚腎轉(zhuǎn)化細(xì)胞
2V6.11人胚腎細(xì)胞
BEAS-2B人正常肺上皮細(xì)胞
Caco-2人結(jié)直腸腺癌細(xì)胞
Caov-3人乳頭狀卵巢腺癌細(xì)胞
C918人侵襲性脈絡(luò)膜黑色素瘤細(xì)胞
CNLMG-B5537SKIN 人類成纖維細(xì)胞
CNLMG-B5538LC 人永生化淋巴細(xì)胞
CNLMG-B5538SKIN 人類成纖維細(xì)胞
CCC-ESF-1人胚皮膚成纖維細(xì)胞
CCC-HB-2人胚膀胱組織來(lái)源細(xì)胞
CCC-HBE-2人胚氣管組織來(lái)源細(xì)胞
做細(xì)胞實(shí)驗(yàn)的同學(xué)看過(guò)來(lái)。原裝ATCC細(xì)胞現(xiàn)貨來(lái)啦。
選擇上海青旗生物細(xì)胞有3個(gè)理由:
1、細(xì)胞狀態(tài)好,形態(tài)佳,易成活,是市面上比較好養(yǎng)的細(xì)胞之一;
2、物流迅速,復(fù)蘇好后發(fā)貨,次日就能到;
3、使用我司推薦的進(jìn)口品牌血清進(jìn)行培養(yǎng)實(shí)驗(yàn),效果更佳。
專業(yè)技術(shù)人員李工收藏的細(xì)胞培養(yǎng)小技巧:
1. 買(mǎi)細(xì)胞要去靠譜的地方買(mǎi),比如 ATCC 或者青旗生物。一般上面會(huì)有針對(duì)細(xì)胞的介紹,這樣培養(yǎng)之前可以了解細(xì)胞正常生長(zhǎng)的狀態(tài)圖、傳代、培養(yǎng)基的類型等。
2. 不管是買(mǎi)的細(xì)胞,還是別人惠贈(zèng)的細(xì)胞,剛拿到手趕緊的做兩件事:檢測(cè)是否有支原體污染;迅速擴(kuò)增凍存,凍存細(xì)胞復(fù)蘇后第二天*更換一次培養(yǎng)基。
3. 發(fā)現(xiàn)細(xì)胞有污染迅速處理掉,特別是當(dāng)你養(yǎng)了很多種細(xì)胞時(shí)。細(xì)菌污染、真菌污染很容易發(fā)現(xiàn),支原體污染的話,細(xì)胞會(huì)長(zhǎng)的慢,可以買(mǎi)個(gè)支原體檢測(cè)的試劑盒定期檢測(cè)一下。
4. 不同細(xì)胞生長(zhǎng)周期不同。有的生長(zhǎng)很快,比如說(shuō) MDA-MB-231,傳代的時(shí)候取離心懸液的十分之一就已經(jīng)足夠了。有的又是特別慢,比如 BT474,傳代是一分二,復(fù)蘇起始的時(shí)候兩周多才能長(zhǎng)滿。這就需要要在培養(yǎng)細(xì)胞的過(guò)程中多多摸索。
5. 對(duì)于嬌弱的細(xì)胞,就得細(xì)心呵護(hù)。胰酶消化不能過(guò)久,吹得時(shí)候要輕柔,離心時(shí)候也要注意轉(zhuǎn)速和時(shí)間。每天都要去看一下細(xì)胞,肉眼觀察培養(yǎng)基狀況、顯微鏡下觀察細(xì)胞生長(zhǎng)狀況。記住,是每天。
細(xì)胞培養(yǎng)常見(jiàn)問(wèn)題及解決方法
問(wèn)題 | 原因 | 解決方案 |
細(xì)胞生長(zhǎng)緩慢 | 生長(zhǎng)培養(yǎng)基使用不當(dāng) | 按照生產(chǎn)商的建議,使用相應(yīng)的預(yù)熱生長(zhǎng)培養(yǎng)基。 |
生長(zhǎng)培養(yǎng)基中血清質(zhì)量差 | 使用其他批次血清。 | |
傳代操作不當(dāng) | 按照生產(chǎn)商的建議消化時(shí)間及傳代比例進(jìn)行操作。 | |
換液過(guò)于頻繁 | 降低換液頻率,參考生產(chǎn)商推薦的換液頻率。 | |
細(xì)胞傳代次數(shù)過(guò)多 | 使用傳代次數(shù)較少的健康細(xì)胞。 | |
細(xì)胞生長(zhǎng)超過(guò)匯合狀態(tài) | 哺乳動(dòng)物細(xì)胞傳代應(yīng)在細(xì)胞處于對(duì)數(shù)期、未達(dá)到匯合狀態(tài)時(shí)進(jìn)行,建議細(xì)胞密度達(dá) 80-90%傳代。 | |
細(xì)胞被支原體污染 | 將細(xì)胞、培養(yǎng)基和試劑丟棄;新取一只凍存細(xì)胞,并且使用新的培養(yǎng)基和試劑。 | |
細(xì)胞復(fù)蘇存活率低 | 細(xì)胞凍存不當(dāng) | 新取一只凍存細(xì)胞,并儲(chǔ)存在液氮中。將細(xì)胞儲(chǔ)存在液氮中,直至復(fù)蘇。 |
自行制備的凍存細(xì)胞無(wú)活性 | 將細(xì)胞按照生產(chǎn)商推薦的密度凍存。 | |
制備凍存細(xì)胞時(shí)使用傳代次數(shù)少的細(xì)胞。 | ||
嚴(yán)格按照生產(chǎn)商推薦的操作程序凍存細(xì)胞。請(qǐng)注意本手冊(cè)推薦的冷凍程序是凍存細(xì)胞的一般流程,只能作為指導(dǎo)原則使用。 | ||
新取一只凍存細(xì)胞。 | ||
細(xì)胞復(fù)蘇方法不當(dāng) | 嚴(yán)格按照生產(chǎn)商推薦的操作程序復(fù)蘇細(xì)胞。請(qǐng)注意本手冊(cè)推薦的解凍程序是復(fù)蘇細(xì)胞的一般流程,只能作為指導(dǎo)原則使用。 | |
確保冷凍細(xì)胞解凍迅速,接種前用預(yù)熱的生長(zhǎng)培養(yǎng)基緩慢稀釋細(xì)胞。 | ||
復(fù)蘇培養(yǎng)基使用不當(dāng) | 使用生產(chǎn)商推薦的培養(yǎng)基。確保培養(yǎng)基使用前已經(jīng)預(yù)熱。 | |
細(xì)胞稀釋過(guò)度 | 按照生產(chǎn)商的建議,將解凍后的細(xì)胞高密度接種,以改善復(fù)蘇效果。 | |
處理細(xì)胞時(shí)動(dòng)作不夠輕柔 | 凍存和復(fù)蘇過(guò)程對(duì)大多數(shù)細(xì)胞都會(huì)造成不利影 響。不要通過(guò)渦旋振蕩或者用力敲打培養(yǎng)瓶的方法使細(xì)胞脫落(培養(yǎng)昆蟲(chóng)細(xì)胞時(shí)除外),也不要高速離心細(xì)胞。 | |
凍存液中所用保護(hù)劑在儲(chǔ)存過(guò)程中未避光 | 如果未避光儲(chǔ)存,凍存保護(hù)劑會(huì)轉(zhuǎn)變?yōu)閷?duì)細(xì)胞有毒性的物質(zhì);新取一只凍存保護(hù)劑,重新凍存細(xì)胞。 |
★由于細(xì)胞庫(kù)現(xiàn)有細(xì)胞類目多,為了不出現(xiàn)混亂錯(cuò)誤,需要了解相關(guān)細(xì)胞價(jià)格及詳細(xì)資料直接call,對(duì)您造成的不便還請(qǐng)見(jiàn)諒!
★注:如運(yùn)輸過(guò)程中導(dǎo)致細(xì)胞污染或者死亡,我們將無(wú)條件補(bǔ)發(fā)
收貨后十個(gè)工作日內(nèi)有其他問(wèn)題提供照片可半價(jià)重發(fā)
最后,通過(guò)低溫保藏儲(chǔ)備一些細(xì)胞,以防支原體大面積來(lái)襲。如果支原體有抬頭的跡象,或常規(guī)檢測(cè)呈陽(yáng)性結(jié)果,那么較可靠的補(bǔ)救措施是扔掉所有培養(yǎng)物,清潔培養(yǎng)箱和超凈臺(tái),一切從頭開(kāi)始。當(dāng)然,你得確保儲(chǔ)備的細(xì)胞是不含支原體的。