上海青旗生物有限公司提供ATCC原代細(xì)胞，ATCC菌株代購，同時(shí)上海青旗生物新增細(xì)胞庫，具有自己的研發(fā)細(xì)胞培養(yǎng)庫，上千株細(xì)胞具有STR鑒定，開春大放送，*，同時(shí)還有好禮相送，具體歡迎咨詢我們銷售人員。。。。

HNE1人鼻咽癌細(xì)胞   含STR鑒定

【中文縮寫】HNE1

【中文名稱】HNE1人鼻咽癌細(xì)胞

【背景資料】 見細(xì)胞說明書

【產(chǎn)品來源】 細(xì)胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國內(nèi)外著名大學(xué)建系

"公司提供貼壁、半貼壁、懸浮、半懸浮、貼壁與懸浮混合等細(xì)胞特性，一般細(xì)胞培養(yǎng)PBS量是10%，如果出現(xiàn)細(xì)胞狀態(tài)不良情況，可以提高PBS量到15%，SHEE人永生化食管上皮細(xì)胞待細(xì)胞穩(wěn)定后，調(diào)回PBS量10%，對于初次實(shí)驗(yàn)者，一般細(xì)胞培養(yǎng)，都需要加入雙抗防止細(xì)胞污染，細(xì)胞匯合度達(dá)到90%，我們開始寄送，這樣可以保持細(xì)胞收到時(shí)，良好的細(xì)胞活力。

一、售前
         上海青旗生物專業(yè)為國內(nèi)科研提供高品質(zhì)細(xì)胞和優(yōu)質(zhì)服務(wù)，QC檢測合格后發(fā)貨保證細(xì)胞狀態(tài)良好，發(fā)貨前保證質(zhì)量。
 
二、售后
         收到細(xì)胞7天內(nèi)出現(xiàn)狀態(tài)不佳等情況請及時(shí)反饋，會(huì)有技術(shù)同步指導(dǎo)操作協(xié)助解決，如仍未養(yǎng)活免費(fèi)重發(fā)。建議及時(shí)保種，有備無患！
 
三、細(xì)胞生長條件：

 
四、細(xì)胞收到后處理
    細(xì)胞在培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)至良好狀態(tài)后灌滿*培養(yǎng)液并封好瓶口是細(xì)胞運(yùn)輸?shù)?/span>zui好辦法。收到細(xì)胞回到自己的實(shí)驗(yàn)室后，先打開外包裝，用75%酒精噴灑整個(gè)瓶消毒后放到超凈臺(tái)內(nèi)，嚴(yán)格無菌操作。鏡下觀察：未超過80%匯合度時(shí)，可將瓶裝的*培養(yǎng)液移入廢液缸中，原瓶（T25瓶）保留6-8ml*培養(yǎng)液，懸浮細(xì)胞需離心處理，放入37℃、5%CO2孵箱培養(yǎng)；超過80%匯合度時(shí)，根據(jù)情況傳代或者凍存，具體操作見細(xì)胞培養(yǎng)步驟。

HNE1人鼻咽癌細(xì)胞   含STR鑒定

五、細(xì)胞培養(yǎng)步驟
1）復(fù)蘇細(xì)胞：將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍，加入5mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000RPM條件下離心5分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜（或?qū)⒓?xì)胞懸液加入6cm皿中，加入約6ml培養(yǎng)基，培養(yǎng)過夜）。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。
2）細(xì)胞傳代：如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
一，燒瓶培養(yǎng)的處理程序 在培養(yǎng)瓶中接種細(xì)胞并在培養(yǎng)基中*填充培養(yǎng)基以防止運(yùn)輸過程中細(xì)胞的丟失。 1、收到后，目視檢查培養(yǎng)物是否有微生物污染的宏觀證據(jù)。 使用倒置顯微鏡（zui好配備有相位傳感器），仔細(xì)檢查是否有微生物污染的證據(jù)。還檢查以確定大多數(shù)細(xì)胞是否仍然附著在燒瓶底部？在運(yùn)輸過程中，培養(yǎng)物有時(shí)被粗略地處理，并且許多細(xì)胞經(jīng)常分離并懸浮在培養(yǎng)基中（但仍然是可行的）。 2、如果細(xì)胞仍然附著，無菌去除5至10毫升的運(yùn)輸介質(zhì)?？梢怨?jié)省運(yùn)輸媒介以重復(fù)使用。在5%℃的空氣中，在37℃下培養(yǎng)細(xì)胞，直到它們準(zhǔn)備進(jìn)行傳代培養(yǎng)。 3.如果細(xì)胞沒有附著，無菌地移除燒瓶的全部內(nèi)容物，并以1000rpm離心5至10分鐘。取出運(yùn)輸介質(zhì)并保存。在10毫升這種培養(yǎng)基中重新沉淀顆粒細(xì)胞并加入25厘米的燒瓶中。在空氣中5%℃下，在37℃下孵育，直至細(xì)胞準(zhǔn)備進(jìn)行傳代培養(yǎng)。   二、傳代程序 體積為75厘米的燒瓶。增加或減少其他尺寸培養(yǎng)容器所需的分離培養(yǎng)基的量。 1、去除和丟棄培養(yǎng)基。 2.用0.25%(w/v)胰蛋白酶0.53mM EDTA溶液沖洗細(xì)胞層，除去所有含有胰蛋白酶抑制劑的血清痕跡。 3.添加2.0~3.0 ml胰酶-EDTA溶液瓶中，倒置顯微鏡下觀察細(xì)胞到細(xì)胞層分散（取決于胰蛋白酶的批）。 注意：為了避免結(jié)塊，不要在擊打或搖晃瓶子時(shí)攪拌細(xì)胞，等待細(xì)胞分離。難以分離的細(xì)胞可以放置在37°C以促進(jìn)擴(kuò)散。 4、加入6～8毫升的完整生長培養(yǎng)基，輕輕吸液，抽吸細(xì)胞。 5、在新培養(yǎng)容器中加入適當(dāng)?shù)募?xì)胞懸液等分試樣。 6、培養(yǎng)37°C培養(yǎng)基。 推薦栽培比為1:3∶1:4。 介質(zhì)更新：每周2至3次   三、冷凍保存程序 該協(xié)議使用量在75平方厘米的瓶；比例減少或增加的其他尺寸的分離介質(zhì)的培養(yǎng)容器的數(shù)量。 1、去除和丟棄培養(yǎng)基。 2。簡要沖洗細(xì)胞層0.25（w/v）trypsin0.53mm EDTA溶液去除所有痕跡血清含有胰蛋白酶抑制劑。 3。加入2至3毫升的胰蛋白酶-EDTA溶液瓶中，倒置顯微鏡下觀察細(xì)胞到細(xì)胞層是分散的（通常在1到10分鐘）。 注意：為了避免結(jié)塊，不要在擊打或搖晃瓶子時(shí)攪拌細(xì)胞，等待細(xì)胞分離。難以分離的細(xì)胞可以放置在37°C以促進(jìn)擴(kuò)散。 4、加入6～8毫升的完整生長培養(yǎng)基，輕輕吸液，抽吸細(xì)胞。 5。去除胰酶EDTA溶液，將細(xì)胞懸液到離心管和旋轉(zhuǎn)約5 1000rpmfor 10分鐘。 6、低溫保存培養(yǎng)液中的上清液和復(fù)蘇細(xì)胞。 7、將細(xì)胞轉(zhuǎn)移至低溫瓶，1ml／瓶。 8、低溫容器中的細(xì)胞Frozen（NalgENα5100-01）。