10187ES50 植物組織PCR試劑盒Plant Tissue pcr Kit
- 公司名稱 翌圣生物科技（上海）股份有限公司
- 品牌 Yeasen/翌圣生物
- 型號(hào) 10187ES50
- 產(chǎn)地
- 廠商性質(zhì) 生產(chǎn)廠家
- 更新時(shí)間 2024/9/4 17:32:09
- 訪問(wèn)次數(shù) 773
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企業(yè)簡(jiǎn)介
翌圣生物科技（上海）股份有限公司【Yeasen Biotechnology (Shanghai) Co., Ltd.】是一家以蛋白質(zhì)改造和酶進(jìn)化技術(shù)為驅(qū)動(dòng)，聚焦生命科學(xué)產(chǎn)業(yè)鏈上游核心原料，從事分子、蛋白和細(xì)胞三大品類生物試劑的研發(fā)、生產(chǎn)與銷售的高新技術(shù)企業(yè)，通過(guò)打通分子酶、蛋白、抗體、核酸、細(xì)胞的技術(shù)開發(fā)路徑，成為國(guó)內(nèi)少數(shù)同時(shí)覆蓋三大品類生物試劑、兼?zhèn)浜诵募夹g(shù)自主研發(fā)能力和規(guī)模化生產(chǎn)能力的高新技術(shù)企業(yè)，產(chǎn)品廣泛應(yīng)用于生命科學(xué)研究領(lǐng)域、診斷與檢測(cè)領(lǐng)域和生物醫(yī)藥領(lǐng)域。
主營(yíng)業(yè)務(wù)
公司憑借在蛋白質(zhì)改造和酶進(jìn)化領(lǐng)域的技術(shù)優(yōu)勢(shì)和深耕生物試劑行業(yè)多年積累的豐富經(jīng)驗(yàn)，構(gòu)建了品質(zhì)優(yōu)良、類型齊全、種類豐富的產(chǎn)品管線。自公司成立以來(lái)，公司研發(fā)、生產(chǎn)和銷售的生物試劑超過(guò)3000種，涵蓋分子、蛋白、細(xì)胞三大品類的生物試劑，能夠滿足客戶多種類型生物試劑的一體化采購(gòu)需求。公司核心產(chǎn)品覆蓋qPCR系列、NGS系列、逆轉(zhuǎn)錄系列、核酸提取與純化系列、PCR系列、分子克隆系列、體外轉(zhuǎn)錄系列、抗體、蛋白純化系列、蛋白分析系列、重組蛋白、細(xì)胞分析系列、細(xì)胞培養(yǎng)系列、細(xì)胞轉(zhuǎn)染系列、報(bào)告基因檢測(cè)系列等多個(gè)品類的生物試劑，廣泛應(yīng)用于生命科學(xué)研究、診斷檢測(cè)和生物醫(yī)藥等領(lǐng)域。
發(fā)展歷程
榮譽(yù)資質(zhì)
翌圣生物通過(guò)申請(qǐng)商標(biāo)和軟件著作權(quán)的方式保障核心技術(shù)和市場(chǎng)競(jìng)爭(zhēng)力，不斷加強(qiáng)公司品牌建設(shè)。截至2022年3月31日，公司已經(jīng)獲得授權(quán)18項(xiàng)（其中發(fā)明14項(xiàng)、實(shí)用新型1項(xiàng)、外觀設(shè)計(jì)3項(xiàng)）和45項(xiàng)與生物試劑相關(guān)的軟件著作權(quán)，擁有經(jīng)國(guó)家知識(shí)產(chǎn)權(quán)局商標(biāo)局核準(zhǔn)的注冊(cè)商標(biāo)權(quán)37項(xiàng)以及4項(xiàng)境外注冊(cè)商標(biāo)，是國(guó)家高新技術(shù)企業(yè)和上海市專精特新企業(yè)。
創(chuàng)新平臺(tái)
經(jīng)過(guò)多年的產(chǎn)品研發(fā)技術(shù)經(jīng)驗(yàn)的沉淀以及持續(xù)的研發(fā)創(chuàng)新，翌圣生物積極開展“產(chǎn)學(xué)研”合作，與擁有生物催化與酶領(lǐng)域國(guó)家重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室的湖北大學(xué)、擁有教育部工業(yè)生物領(lǐng)域重點(diǎn)研究基地的江南大學(xué)展開合作，優(yōu)化生物試劑關(guān)鍵原料的生產(chǎn)和表達(dá)工藝。翌圣生物以基因工程技術(shù)、生物信息技術(shù)、細(xì)胞生物學(xué)技術(shù)、免疫學(xué)技術(shù)、生化分析技術(shù)等生命科學(xué)領(lǐng)域的共性生物技術(shù)為基礎(chǔ)，建立了六大核心技術(shù)平臺(tái)——雙向分子酶理性設(shè)計(jì)與定向進(jìn)化平臺(tái)、密度發(fā)酵與超潔凈純化平臺(tái)、分子診斷試劑關(guān)鍵原料研發(fā)平臺(tái)、高通量測(cè)序建庫(kù)試劑創(chuàng)新研發(fā)平臺(tái)、高性能單克隆抗體研發(fā)平臺(tái)和mRNA醫(yī)藥應(yīng)用研發(fā)平臺(tái)，目前已經(jīng)自主研發(fā)出20項(xiàng)核心技術(shù)，打通分子酶、蛋白、抗體、核酸、細(xì)胞的技術(shù)開發(fā)路徑，覆蓋技術(shù)研發(fā)、產(chǎn)品升級(jí)、規(guī)模生產(chǎn)和質(zhì)量控制等生物試劑研發(fā)和生產(chǎn)的各關(guān)鍵環(huán)節(jié)。
工業(yè)化生產(chǎn)
翌圣生物擁有按照準(zhǔn)GMP 標(biāo)準(zhǔn)建設(shè)運(yùn)營(yíng)的工業(yè)化生產(chǎn)基地，配有噸級(jí)發(fā)酵線、工業(yè)級(jí) AKTA 純化線和全自動(dòng)包裝線。同時(shí)，公司通過(guò)了ISO 13485:2016質(zhì)量管理體系認(rèn)證，從原料控制、生產(chǎn)管理、質(zhì)檢管控、倉(cāng)儲(chǔ)運(yùn)輸?shù)葘?duì)生產(chǎn)線進(jìn)行360度管理監(jiān)督，保證產(chǎn)品過(guò)程的可控制性及可追溯性，竭盡全力為您提供可靠的產(chǎn)品。
客戶服務(wù)
翌圣生物憑借優(yōu)質(zhì)穩(wěn)定的產(chǎn)品質(zhì)量、高效及時(shí)的響應(yīng)能力、快速穩(wěn)定的交付能力和周到完備的售后服務(wù)獲得了眾多科研用戶和工業(yè)用戶的認(rèn)可，為檢測(cè)公司、治療公司、工具類公司和科學(xué)研究實(shí)驗(yàn)室提供應(yīng)用于科學(xué)研究、體外診斷、基因測(cè)序、生物醫(yī)藥等的生物試劑。與中國(guó)科學(xué)院、清華大學(xué)、北京大學(xué)、復(fù)旦大學(xué)、上海交通大學(xué)、浙江大學(xué)等頂尖科研院所和華大基因、恒瑞醫(yī)藥、藥明康德、之江生物、圣湘生物、斯微生物、金斯瑞、思路迪等工業(yè)客戶建立了穩(wěn)定、緊密的合作關(guān)系，公司產(chǎn)品被多次使用在Nature、Science、Cell等國(guó)際頂級(jí)期刊論文發(fā)表中。
公司企業(yè)文化
幫助客戶創(chuàng)造價(jià)值，讓世界更健康更快樂
◎ 成為生命科學(xué)工具領(lǐng)域全球Top⑩
◎ 具備驅(qū)動(dòng)產(chǎn)業(yè)變革的技術(shù)創(chuàng)新能力
◎ 擁有一支持續(xù)學(xué)習(xí)型的翌圣鐵軍
翌圣生物始終秉承“幫助客戶創(chuàng)造價(jià)值，讓世界更健康更快樂”的使命，專注于技術(shù)創(chuàng)新和產(chǎn)品升級(jí)，不斷拓展核心技術(shù)的應(yīng)用領(lǐng)域，為客戶提供更為的產(chǎn)品與服務(wù)，助力我國(guó)打造自主可控的生物試劑產(chǎn)業(yè)鏈。同時(shí)，翌圣生物將進(jìn)一步推進(jìn)國(guó)際化戰(zhàn)略，繼續(xù)布局和拓展海外市場(chǎng)，為全球生物試劑產(chǎn)業(yè)發(fā)展貢獻(xiàn)力量。
分子生物學(xué)試劑，細(xì)胞生物學(xué)試劑，免疫學(xué)試劑，蛋白組學(xué)試劑等
| 供貨周期 | 現(xiàn)貨 | 貨號(hào) | 10187ES50 |
|---|---|---|---|
| 應(yīng)用領(lǐng)域 | 醫(yī)療衛(wèi)生,生物產(chǎn)業(yè) |
植物組織PCR試劑盒Plant Tissue pcr Kit(With Dye)
產(chǎn)品信息
產(chǎn)品名稱 | 產(chǎn)品編號(hào) | 規(guī)格 | 價(jià)格（元） |
Plant Tissue Direct PCR Kit (With Dye) | 10187ES50 | 50 T | 393.00 |
Plant Tissue Direct PCR Kit (With Dye) | 10187ES70 | 200 T | 1353.00 |
產(chǎn)品描述
植物組織PCR試劑盒Plant Tissue pcr Kit是一款可直接對(duì)不同類型植物葉片和種子進(jìn)行PCR擴(kuò)增的試劑盒，適應(yīng)性廣、穩(wěn)定性強(qiáng)。試劑盒采用*的裂解緩沖液體系，可以快速的裂解多種植物樣品并釋放出基因組DNA，不需要除去蛋白、RNA或次生代謝產(chǎn)物等，即可將釋放出的基因組DNA作為模板直接用于PCR反應(yīng)。此外，樣品使用量少，低至1 mm植物葉片或種子即可進(jìn)行實(shí)驗(yàn)。
本試劑盒中提供的2× Plant Master Mix具有很強(qiáng)的擴(kuò)增兼容性，能直接以待測(cè)樣品裂解液為模板，進(jìn)行高效特異性擴(kuò)增。該試劑為2倍濃縮PCR反應(yīng)混合液，包含了用于PCR擴(kuò)增除模板和引物外的所有組分，大大簡(jiǎn)化操作過(guò)程，降低污染幾率。
該試劑盒可用于轉(zhuǎn)基因植株鑒定、植物基因分型等。
產(chǎn)品組分
類別 | 編號(hào) | 組分 | 產(chǎn)品編號(hào)/規(guī)格 | 儲(chǔ)存 | |
10187ES50（50 T） | 10187ES70（200 T） | ||||
Part I | 10187-A | Buffer P1 | 1.25 mL × 2 | 5 mL × 2 | 4℃ |
10187-B | Buffer P2 | 500 μL | 1 mL × 2 | 4℃ | |
Part II | 10187-C | 2× Plant Master Mixa | 500 μL | 1 mL × 2 | -20℃ |
a）2× Plant Master Mix：包含熱啟動(dòng)Taq DNA聚合酶、dNTP混合物、MgCl2、反應(yīng)緩沖液、PCR反應(yīng)增強(qiáng)劑、優(yōu)化劑以及穩(wěn)定劑等，同時(shí)包含電泳Loading Buffer, PCR完成之后可直接電泳。
運(yùn)輸方法
冰袋運(yùn)輸。
保存方法
1. 試劑10187-A【Buffer P1】，置于4℃保存。
2. 試劑10187-B【Buffer P2】，中和裂解產(chǎn)物，利于更長(zhǎng)時(shí)間保存樣本，置于4℃保存。
3. 試劑10187-C【2 × Plant Master Mix】，-20℃保存，避免反復(fù)凍融。
操作方法
植物葉片
研磨裂解法：
①研磨儀破碎：將直徑5 mm左右的葉片置于50 μL Buffer P1中，用研磨儀加鋼珠（鋼珠直徑3mm左右，共2個(gè)）破碎葉片（45 Hz，1 min），葉片破碎后溶液呈現(xiàn)綠色，瞬時(shí)離心，上清液請(qǐng)放在4℃?zhèn)溆?，?/span>1 μL用于PCR擴(kuò)增。
②槍頭搗碎：推薦使用幼嫩葉片。將直徑5 mm左右的葉片置于50 μL Buffer P1中，用槍頭將葉片搗碎，搗碎后溶液呈現(xiàn)綠色，瞬時(shí)離心，上清液請(qǐng)放在4℃?zhèn)溆?，?/span>1 μL用于PCR擴(kuò)增。
加熱裂解法：推薦使用幼嫩葉片。將直徑5 mm左右的葉片置于50 μL Buffer P1中，95℃加熱5-10 min（確保裂解液*浸沒葉片），較難裂解的葉片（老葉片）可適當(dāng)延長(zhǎng)時(shí)間（10-20 min），加熱裂解后溶液呈現(xiàn)綠色，震蕩混勻，瞬時(shí)離心，上清液請(qǐng)放在4℃?zhèn)溆?，?/span>1 μL用于PCR擴(kuò)增。
直接法：推薦使用幼嫩葉片。使用打孔器或者刀，將直徑1 mm左右的葉片直接加入到PCR反應(yīng)體系中；復(fù)雜樣本或者是長(zhǎng)片段的擴(kuò)增，推薦使用直徑<1 mm的葉片。
植物種子
加熱裂解法：用刀或者堅(jiān)硬的物體取直徑約1 mm左右的種子，將其置于50 μL Buffer P1 中95℃加熱5-10 min，較難裂解的種子可適當(dāng)延長(zhǎng)時(shí)間（10-20 min），加熱后震蕩混勻，瞬時(shí)離心，底部呈現(xiàn)透明的糊狀，上清液請(qǐng)放在4℃?zhèn)溆茫?/span>1 μL上清液用于PCR擴(kuò)增。
直接法：用刀或者堅(jiān)硬的物體取直徑約1 mm左右的種子，將其置于50 μL Buffer P1（Buffer P1需要提前室溫下平衡20 min）中，用槍頭或者其他的方式搗碎種子，種子搗碎后溶液呈現(xiàn)乳白色，室溫靜置15 min，震蕩混勻，瞬時(shí)離心，上清液請(qǐng)放在4℃?zhèn)溆茫? μL上清液用于PCR擴(kuò)增。
PCR反應(yīng)體系
組分 | 體積（μL） | 體積（μL） | 終濃度 |
2× Plant Master Mix | 10 | 25 | 1× |
Forward Primer (10 μM) | 0.5 | 1 | 0.2-0.25 μM |
Reverse Primer (10 μM) | 0.5 | 1 | 0.2-0.25 μM |
裂解產(chǎn)物（DNA模板） | 1 | 2 | - |
ddH2O | To 20 | To 50 | - |
【注】：各組分使用前應(yīng)充分混勻。
a）模板加入量：小于PCR反應(yīng)體系的5%，過(guò)多會(huì)嚴(yán)重抑制PCR反應(yīng)，強(qiáng)烈推薦加入1 μL模板。葉片直擴(kuò)優(yōu)先推薦研磨儀裂解法，種子直擴(kuò)優(yōu)先推薦加熱法。
b）引物終濃度：0.2-0.25 μM可以得到較好結(jié)果。反應(yīng)性能較差時(shí)，可在0.1-0.5 μM范圍內(nèi)調(diào)整引物濃度。
c）反應(yīng)體系：推薦使用20 μL或50 μL，以保證目的基因擴(kuò)增的有效性和重復(fù)性。
d）體系配制：配制好PCR反應(yīng)體系，置于渦旋儀上渦旋混勻，瞬時(shí)離心將反應(yīng)液集于管底。
e）對(duì)照反應(yīng)：建議進(jìn)行PCR時(shí)，設(shè)置陽(yáng)性和陰性PCR對(duì)照反應(yīng)以便于排除假陽(yáng)性或假陰性的干擾。
f）為了更穩(wěn)定的保存裂解后的模板，將轉(zhuǎn)移出來(lái)的上清液，按照裂解產(chǎn)物（DNA模板）：Buffer P2 = 5:1的比例混合，混勻后-20℃保存，穩(wěn)定保存隨時(shí)間和樣本狀態(tài)不同而有所不同。如果處理后的植物葉片或種子上清液一周內(nèi)用于PCR擴(kuò)增，不用加Buffer P2，上清液請(qǐng)保存在-20℃。
PCR反應(yīng)條件
循環(huán)步驟 | 溫度 | 時(shí)間 | 循環(huán)數(shù) |
預(yù)變性 | 94℃ | 5 min | 1 |
變性 | 94℃ | 10 sec | 35 |
退火 | 50-65℃ | 20 sec | |
延伸 | 72℃ | 1 min | |
終延伸 | 72℃ | 5 min | 1 |
【注】：a）退火溫度：請(qǐng)參考引物的理論 Tm 值，退火溫度可設(shè)置低于引物理論值 2-5℃。
b）延伸時(shí)間：需要根據(jù)片段的長(zhǎng)度來(lái)確定，對(duì)于1 kb以內(nèi)的DNA///片段，建議延長(zhǎng)時(shí)間為1 min。
注意事項(xiàng)
1. 做葉片實(shí)驗(yàn)時(shí)，建議使用新鮮采取的葉片組織，若為長(zhǎng)期冷凍組織，需-80℃保存，應(yīng)盡量避免反復(fù)凍融，以免造成模板降解，影響PCR效率。葉片組織以幼嫩為宜，若為成熟的葉片，避免使用葉片主脈部位組織；做種子實(shí)驗(yàn)時(shí)，不要用發(fā)霉的種子，發(fā)霉的種子很可能導(dǎo)致試驗(yàn)失敗。
2. 建議擴(kuò)增片段長(zhǎng)度1 kb以內(nèi)，以便擴(kuò)增效率///佳。
3. 取樣時(shí)使用打孔器或者刀取適宜大小的樣本，樣本不同時(shí)，打孔器或者刀每次處理樣本前需清洗干凈。
4. 對(duì)于葉片組織，建議取1-10 mm的葉片，過(guò)小會(huì)使PCR擴(kuò)增產(chǎn)量低，過(guò)多會(huì)抑制PCR反應(yīng)，采用加熱裂解法、槍頭搗碎、研磨儀破碎的方式處理植物葉片，處理后需震蕩離心，務(wù)必取上清液試驗(yàn)，沉淀會(huì)嚴(yán)重抑制PCR反應(yīng)；對(duì)于種子組織，取1-3 mm的種子，過(guò)小會(huì)使PCR擴(kuò)增產(chǎn)量低，過(guò)多會(huì)嚴(yán)重抑制PCR反應(yīng)，采用加熱裂解法裂解種子，處理后震蕩離心，務(wù)必取上清液試驗(yàn)，沉淀會(huì)嚴(yán)重抑制PCR反應(yīng)。
5.為了您的安全和健康，請(qǐng)穿實(shí)驗(yàn)服并佩戴一次性手套操作。
常見問(wèn)題與解決方法
常見問(wèn)題 | 可能原因 | 解決方法 |
陽(yáng)性對(duì)照、待測(cè)樣本均無(wú)條帶。 | PCR反應(yīng)體系或反應(yīng)條件不合適。 | 使用梯度PCR摸索PCR///佳反應(yīng)條件。 |
PCR試劑保存不當(dāng)失去活性。 | 2× PCR Mix應(yīng)保存于-20℃，使用時(shí)避免反復(fù)凍融。若使用頻繁，可在4℃短時(shí)間存放。 | |
引物設(shè)計(jì)問(wèn)題。 | 嘗試重新設(shè)計(jì)引物進(jìn)行檢查。 | |
陽(yáng)性對(duì)照有目的條帶，待測(cè)樣本無(wú)條帶或條帶弱。 | 裂解液、中和液加入比例不當(dāng)，裂解混合液影響PCR體系的pH值。 | 正常條件下，中和后的裂解混合液的 pH 應(yīng)該在7-8左右(裂解產(chǎn)物和Buffer P2嚴(yán)格按照5:1的量進(jìn)行中和)。 |
樣本裂解混合液保存不當(dāng)或保存時(shí)間過(guò)久，DNA基因組已經(jīng)降解。 | 裂解混合液液可在4℃保存5天，盡量使用新制備的裂解液混合液進(jìn)行PCR。 | |
模板加入量不適合。 | 在反應(yīng)體系<5%范圍內(nèi)優(yōu)化模板加入量。 | |
PCR循環(huán)數(shù)不足。 | 適當(dāng)增加PCR的循環(huán)數(shù)，推薦35-40循環(huán)為佳。因模板復(fù)雜，一般PCR反應(yīng)要比用純化的DNA模板多5-10個(gè)循環(huán)為佳。 | |
非特異性擴(kuò)增 | PCR退火溫度太低，循環(huán)數(shù)、引物濃度或模板濃度太高。 | 增加PCR退火溫度，降低PCR循環(huán)數(shù)、引物濃度或模板濃度。 |
PCR引物錯(cuò)配。 | 重新設(shè)計(jì)PCR引物。 | |
配制PCR反應(yīng)體系時(shí)溫度太高或配制完成后放置時(shí)間太久。 | PCR反應(yīng)體系的配制在低溫下進(jìn)行，配制完成后盡快進(jìn)行PCR擴(kuò)增反應(yīng)。 | |
陰性對(duì)照出現(xiàn)目的條帶 | 操作工具或試劑污染。 | 實(shí)驗(yàn)所有試劑或器材均應(yīng)高壓滅菌。操作時(shí)應(yīng)小心輕柔，防止將靶序列吸入加樣槍內(nèi)或?yàn)R出離心管外。 |
樣本間交叉污染。 | 每個(gè)取樣器只對(duì)一個(gè)樣本使用；或取完一個(gè)樣本后，將取樣器刃口浸入2%的次氯酸鈉溶液中，反復(fù)涮洗，然后用干凈的紙巾擦干殘液。 |
相關(guān)產(chǎn)品
產(chǎn)品名稱 | 貨號(hào) | 規(guī)格 | 價(jià)格（元） |
Animal Tissue Direct PCR Kit 動(dòng)物組織直接PCR試劑盒 | 10180ES50/70 | 50/200 T | 383/1353 |
Mouse Tissue Direct PCR Kit 小鼠組織直接PCR試劑盒HOT | 10181ES50/70 | 50/200 T | 293/883 |
Animal Blood Direct PCR Kit 全血直接PCR試劑盒 | 10182ES50/70 | 50/200 T | 292/883 |
Plant Tissue PCR Kit 植物組織直接PCR試劑盒HOT | 10183ES50/70 | 50/200 T | 353/1213 |
Animal Tissue Direct PCR Kit (With Dye) 動(dòng)物組織直接PCR試劑盒 | 10184ES50/70 | 50/200 T | 433/1453 |
Mouse Tissue Direct PCR Kit (With Dye) 小鼠組織直接PCR試劑盒 | 10185ES50/70 | 50/200 T | 323/983 |
Animal Blood Direct PCR Kit (With Dye) 全血直接PCR試劑盒 | 10186ES50/70 | 50/200 T | 323/983 |
HB200811
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