全基因合成實驗操作程序

  以前，實驗室通常用PCR和RT - PCR的方法來獲取某個基因片段,但是往往因為標(biāo)本和模板等原因無法釣取該段基因。如今，我們采用化學(xué)合成的方法人工構(gòu)建基因片段，即:全基因合成拼接技術(shù)?？梢詾閺V大的科研朋友服務(wù)。

基因合成是指在體外合成雙鏈DNA分子的一門技術(shù)與寡核苷酸合成有所不同，穿核苷酸是單鏈的，所能合成的長片段僅為100nt左右，而基因合成則為雙鏈DNA分子合成，所能合成的長度范圍50bp-12 kb。可根據(jù)客戶需求，我公司可以提供全基因合成服務(wù)，速度快、周期短、*。合成的基因可以根據(jù)客戶的需求連接到不同的載體上，終提供的產(chǎn)品包括菌株以及凍干的質(zhì)粒和全基因完整的測序報告。

全基因合成的適用范圍:

1.自然界中無法以常規(guī)實驗手段得到的基因。

2.研究人員通過自己的意愿設(shè)計基因序列，以得到自然界中不存在的基因。

3.對已知基因序列進(jìn)行大量密碼子優(yōu)化重排以期達(dá)到對該基因進(jìn)行高效表達(dá)或獲得新的生物特性等研究目的。

服務(wù)優(yōu)勢:

1.合成基因長已達(dá)到10 5KB,已完成基因超過10000條。

2.可以合成重復(fù)序列(重復(fù)次數(shù)無限制).高GC(小于80%).發(fā)夾(參照每200bp小于3個發(fā)夾為限)連續(xù)單-堿基重復(fù)(GC小于15個,AT小于20個)等富含特殊結(jié)構(gòu)的基因注:特殊結(jié)構(gòu)基因合成的相關(guān)數(shù)據(jù)是根據(jù)我公司曾經(jīng)成功合成過的基因序列所做的總結(jié)，以作為您設(shè)計基因序列時判斷是否能順利合成作為參考具體還需以實際基因序列來定。

3、基因可以克隆到客戶提供或的表達(dá)載體上。

4.免費(fèi)提供基因結(jié)構(gòu)設(shè)計基因密碼子優(yōu)化,基因克隆表達(dá)方案設(shè)計等基因合成相關(guān)咨詢服務(wù)。

全基因合成操作程序:

1.我們將對您需要合成的基因全序列進(jìn)行分析,檢查基因內(nèi)部是否含有重復(fù)序列，然后根據(jù)序列的具體情況設(shè)計合成方案。

2.在得到您認(rèn)可后，我們將立即進(jìn)行單鏈Oligo DNA合成，DNA+#片段拼接等工作。然后把全長基因克隆到載體中，再通過DNA測序確認(rèn)合成基因的正確性。

3.測序結(jié)果如果發(fā)現(xiàn)有錯誤位點(diǎn)。我們會采取相應(yīng)的技術(shù)手段進(jìn)行修復(fù)校對，保證整個序列的正確性。

注:因基因結(jié)構(gòu)比較復(fù)雜，并非所有的片段都能順利合成。對于較長的片段或一些復(fù)雜結(jié)構(gòu)如重復(fù)序列、高GC片段等，可能會需要額外的時間調(diào)整合成方案。如果發(fā)生這種情況，技術(shù)人員會及時與您聯(lián)系，告知您合成進(jìn)程。所合成的基因- 般克隆于通用載體中,如需克隆在客戶的載體中，我公司會酌情再收取一定的費(fèi)用，并且交貨時間會適當(dāng)延長。

服務(wù)要求:

1.請您以郵件、書面的形式提供需要合成的基因的序列。

2.請您說明實驗的具體要求:

如:使用何種酶切位點(diǎn)，進(jìn)行克隆，以及需要克隆到何種載體等。

3、本中心將免費(fèi)提供PUC57 - T載體，如果需要裝在其它載體中，請客戶自己提供。

4.簽訂基因臺成技術(shù)保密協(xié)議,支付合成總價的50%作為預(yù)付款，本公司收到款項后開始合成基因注:基因合成開始日期為公司確認(rèn)收到預(yù)付款后的第--個工作日

5、基因合成結(jié)束，通知客戶支付余下50%的合成款項

結(jié)果提供:

1.基因合成報告單一份

2.含目的基因的質(zhì)粒(不少于1ug)-份

3、含目的基因的菌株- -份

4.基因合成的測序圖譜- -份

收費(fèi)標(biāo)準(zhǔn)/服務(wù)周期/提供結(jié)果:

歡迎咨詢詳談，我們會根據(jù)您的方案及需求制定詳細(xì)的服務(wù)協(xié)議。

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