美國(guó)伯樂(lè)T100 PCR維修電話

      BIO-RAD 公司具有20多年專業(yè)的PCR儀生產(chǎn)經(jīng)驗(yàn)，業(yè)界半導(dǎo)體PCR儀的潮流，滿足廣大客戶的不同需求。T100 PCR儀傳承伯樂(lè)性能穩(wěn)定、技術(shù)創(chuàng)新的理念，是科研人員的明智之選。流線型簡(jiǎn)潔設(shè)計(jì)的T100包括諸多優(yōu)點(diǎn)，如智能化觸屏操作，具有8道編程梯度溫度以及快速、穩(wěn)定的控溫性能，讓您的PCR實(shí)驗(yàn)如此簡(jiǎn)單。

節(jié)省編程時(shí)間：直觀的觸屏操作，使編程更為便捷 
快速優(yōu)化實(shí)驗(yàn)流程：溫度梯度功能確保在一次實(shí)驗(yàn)中優(yōu)化PCR條件，快速獲得**結(jié)果 
節(jié)省實(shí)驗(yàn)室空間：機(jī)身小巧緊湊，更堅(jiān)固，便于安防
**的文件管理模式：個(gè)性化文件夾及USB閃存，易于保存和備份程序
數(shù)據(jù)的高度一致性：性能穩(wěn)定，升降溫速快，重復(fù)性高，結(jié)果可靠
 

美國(guó)伯樂(lè)T100 PCR維修電話

* 主屏幕：超大5.7” 彩色 VGA觸摸屏 
* 用戶界面：直觀的圖形顯示，易于編程 
* 數(shù)據(jù)端口：USB 
* 樣品體積：1-100ul 
* 樣品容量：96x0.2ml 
* 升降溫速率：**4℃/秒，平均3℃/秒 
* 溫度范圍：4-100℃ 
* 溫度均一性：±0.5℃ 
* 溫度**性：±0.5℃ 
* 梯度溫差范圍：1-25℃ 
* 梯度溫控范圍：30-100℃ 
* 存儲(chǔ)程序：500個(gè)，通過(guò)USB擴(kuò)展可無(wú)限

 故障一 ：假陽(yáng)性
出現(xiàn)的PCR擴(kuò)增條帶與目的靶序列條帶一致，有時(shí)其條帶更整齊，亮度更高。
引物設(shè)計(jì)不合適：選擇的擴(kuò)增序列與非目的擴(kuò)增序列有同源性，因而在進(jìn)行PCR擴(kuò)增 時(shí)，擴(kuò)增出的PCR產(chǎn)物為非目的性的序列。靶序列太短或引物太短，容易出現(xiàn)假陽(yáng) 性。需重新設(shè)計(jì)引物。
靶序列或擴(kuò)增產(chǎn)物的交叉污染：這種污染有兩種原因：一是整個(gè)基因組或大片段的交 叉污染，導(dǎo)致假陽(yáng)性。這種假陽(yáng)性可用以下方法解決：操作時(shí)應(yīng)小心輕柔，防止 將靶序列吸入加樣*內(nèi)或?yàn)R出離心管外。除酶及不能耐高溫的物質(zhì)外，所有試劑或 器材均應(yīng)高壓消毒。所用離心管及樣進(jìn)*頭等均應(yīng)一次性使用。必要時(shí)，在加標(biāo)本 前，反應(yīng)管和試劑用紫外線照射，以破壞存在的核酸。二是空氣中的小片段核酸污 染，這些小片段比靶序列短，但有一定的同源性?？苫ハ嗥唇?，與引物互補(bǔ)后，可擴(kuò) 增出PCR產(chǎn)物，而導(dǎo)致假陽(yáng)性的產(chǎn)生，可用巢式PCR方法來(lái)減輕或消除。
 故障二 ： 出現(xiàn)非特異性擴(kuò)增帶
　　PCR擴(kuò)增后出現(xiàn)的條帶與預(yù)計(jì)的大小不一致，或大或小，或者同時(shí)出現(xiàn)特異性擴(kuò)增帶 與非特異性擴(kuò)增帶。非特異性條帶的出現(xiàn)，其原因：一是引物與靶序列不*互補(bǔ)、 或引物聚合形成二聚體。二是Mg2+離子濃度過(guò)高、退火溫度過(guò)低，及PCR循環(huán)次數(shù) 過(guò)多有關(guān)。其次是酶的質(zhì)和量，往往一些來(lái)源的酶易出現(xiàn)非特異條帶而另一來(lái)源的酶 則不出現(xiàn)，酶量過(guò)多有時(shí)也會(huì)出現(xiàn)非特異性擴(kuò)增。其對(duì)策有：必要時(shí)重新設(shè)計(jì)引 物。減低酶量或調(diào)換另一來(lái)源的酶。降低引物量，適當(dāng)增加模板量，減少循環(huán)次 數(shù)。適當(dāng)提高退火溫度或采用二溫度點(diǎn)法(93變性，65左右退火與延伸)。
 故障三： 出現(xiàn)片狀拖帶或涂抹帶
　　PCR擴(kuò)增有時(shí)出現(xiàn)涂抹帶或片狀帶或地毯樣帶。其原因往往由于酶量過(guò)多或酶的質(zhì)量 差，dNTP濃度過(guò)高，Mg2+濃度過(guò)高，退火溫度過(guò)低，循環(huán)次數(shù)過(guò)多引起。其對(duì)策有：減少酶量，或調(diào)換另一來(lái)源的酶。減少dNTP的濃度。適當(dāng)降低Mg2+濃 度。增加模板量，減少循環(huán)次數(shù)。
 故障四：母鏈結(jié)合
當(dāng)PCR反應(yīng)加熱至90-95左右時(shí)，會(huì)使模板DNA產(chǎn)生變形，解開(kāi)為單鏈，當(dāng)退火冷卻至55-60左右時(shí)，因?yàn)橐锓肿恿枯^小，運(yùn)動(dòng)速度較快，和母鏈碰撞的機(jī)會(huì)很多，所以退火時(shí)引物優(yōu)先會(huì)與母鏈相互結(jié)合。引物如果太大，會(huì)導(dǎo)致退火時(shí)無(wú)法激發(fā)模板，即引物無(wú)法優(yōu)先與模板鏈相互結(jié)合，而是與較多的互補(bǔ)模板鏈相互結(jié)合。所以引物不能太大，一般不可以超過(guò)30個(gè)脫氧核苷酸的長(zhǎng)度。
 故障五：緩沖液
PCR緩沖液不僅對(duì) pH 的變化 有緩 沖作用 ，而 且有利 于模板 退火 和引物 的 K離子 ，以及含有能夠激活 DNA 聚合酶的 MgZ+離子 ，還有 DNA聚合酶 的穩(wěn)定劑 等。所以緩 沖液 中通 常會(huì) 含 有MgClz、Tris·HC1(pH 8．4，室溫 )、KCI、明 膠 等。Mg 離子對(duì) Taq酶的活性以及專一性都具有一定 的影 響，Mg2+離子濃度過(guò)高 時(shí)，Taq酶專一性降低 而活性會(huì)加強(qiáng) ，所 以當(dāng) Mg2+離子 的濃度過(guò)高 ，會(huì)導(dǎo)致非 特異性擴(kuò)增產(chǎn)物積累，而當(dāng) Mg 離子 的濃度過(guò) 低 ，會(huì) 導(dǎo)至擴(kuò)增 量降低 。MgCIz** 濃度一 般為1．5mmol／mL左右 。