蛋白芯片定制檢測(cè)服務(wù)實(shí)驗(yàn)操作流程

實(shí)驗(yàn)技術(shù)簡(jiǎn)介:

蛋白芯片是一種高通量監(jiān)測(cè)系統(tǒng)，通過(guò)靶分子和捕捉分子相互作用來(lái)監(jiān)測(cè)蛋白分子之間的相互作用。捕獲分子--般都預(yù)固定在芯片表面，由于抗體的高度特異性和與抗原強(qiáng)結(jié)合特性所以被廣泛的用做捕獲分子。對(duì)于研究蛋白芯片的研究在芯片表面有效固定抗體是非常關(guān)鍵的，特別是在固定抗體-致性方面非常關(guān)鍵對(duì)于增強(qiáng)蛋白芯片的靈敏度。G蛋白是一種抗體結(jié)合蛋白, 他特意結(jié)合抗體FC片段,因此已被廣泛的用于固定不同類(lèi)型的抗體。

實(shí)驗(yàn)技術(shù)原理:

蛋白芯片技術(shù)的基本原理是將各種蛋白質(zhì)有序地固定于濾膜、載玻片等各種載體上成為檢測(cè)用的芯片。然后，用標(biāo)記了特定熒光素的抗體或其他成分與芯片反應(yīng)，經(jīng)清洗將未能與芯片上的蛋白質(zhì)互補(bǔ)結(jié)臺(tái)的成分洗去，再利用熒光掃描儀或激光共聚焦掃描技術(shù)，測(cè)定芯片上各點(diǎn)的熒光強(qiáng)度，通過(guò)熒光強(qiáng)度分析芯片上成分與待檢溶液中成分之間相互作用的關(guān)系，由此達(dá)到測(cè)定目的。

實(shí)驗(yàn)操作流程: .

1、客戶(hù)提供生物樣品(抗原或者抗體),驗(yàn)收。

2、配制點(diǎn)樣液，使用Smartarrayer點(diǎn)樣儀進(jìn)行點(diǎn)樣。

3、芯片固定，若無(wú)后續(xù)實(shí)驗(yàn)，芯片交付客戶(hù)。

4、芯片反應(yīng)實(shí)驗(yàn)。

5、芯片掃描及數(shù)據(jù)分析。芯片清洗后，用LuxScan 10K-A Cy3通道掃描，并提取數(shù)據(jù)進(jìn)行分析。

6、提供結(jié)果報(bào)告(包括雜交圖片、數(shù)據(jù)結(jié)果及相應(yīng)聚類(lèi)和差異分析等結(jié)果)。

客戶(hù)提供:

1、實(shí)驗(yàn)對(duì)象為組織樣品，取適量(50-100mg) 新鮮組織樣品或正確保存的組織樣品，使用

BioPulverizerTM冰凍粉碎組織，加1m的RNA抽提試劑TRIzol (Invitrogen) ,使用Mini-Bead-Beater-16勻漿后抽提RNA。

2、實(shí)驗(yàn)對(duì)象為細(xì)胞樣品，每份樣品取1x106~ 1x107細(xì)胞，加1m的RNA抽提試劑TRIzol (樣品為貼壁細(xì)胞，每10cm2培養(yǎng)皿TRIz0I使用量為1ml)，裂解后抽提RNA。

交付標(biāo)準(zhǔn):

1、芯片檢測(cè)數(shù)據(jù)

2、完整的實(shí)驗(yàn)操作規(guī)程、實(shí)驗(yàn)報(bào)告(含軟件分析結(jié)果)以及實(shí)驗(yàn)材料

實(shí)驗(yàn)代做服務(wù)：