人慢性骨髓性白血病細胞 百歐博偉生物 細胞系

人慢性骨髓性白血病細胞 百歐博偉生物 細胞系

一、細胞簡介

平臺編號：bio-73071

規(guī)格：1×10?cells/T25培養(yǎng)瓶

拉丁屬名：K-562

細胞名稱：K-562（人慢性髓原白血病細胞）

種屬：人

年齡（性別）：女；53歲

組織來源：骨髓；慢性骨髓性白血病(CML)

生長特性：懸浮

細胞形態(tài)：淋巴細胞樣

細胞活力：95％（Viability by Trypan Blue Exclusion）

細胞檢測：細胞不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌

傳代方法：*建議1:2-1:3 兩天換液一次

凍存條件：90%FBS+10%DMSO

背景描述：連續(xù)細胞株K-562是由Lozzio從一位臨終的53歲女性慢性骨髓性白血病患者的胸水中建立。K-562細胞被歸入高度未分化的粒性白細胞類，Erson等對其表面膜性質(zhì)的研究表明，K-562細胞是一株人類紅白血病細胞。K-562細胞在自然殺傷分析中廣泛作為高敏感的體外受體，See Pross等將K-562細胞用于NK細胞的體外詳細檢測，包括NK細胞活性的數(shù)學(xué)量化。K-562母細胞是多能性造血惡性細胞，它能自發(fā)分化成可識別的紅血球祖細胞、粒性白細胞、單核細胞等。K-562細胞是EBNA陰性的。

生長培養(yǎng)基： IMDM(貨號:PM150510)＋10% FBS(貨號:164210-500)＋1% P/S(貨號:PB180120)

培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%；CO2，5% 溫度：37℃

二、細胞常規(guī)培養(yǎng)傳代流程

1、吸出原培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)基，PBS緩沖液潤洗細胞兩次，加２-３ml ０.２５%進行消化細胞(注意把握消化時間，通?？刂圃冢?２min)；

2、鏡下觀察消化情況，在細胞邊緣縮小，貼壁松動時(不建議消化到細胞漂浮)去掉，加６-８ml*培養(yǎng)基，輕輕吹打細胞層，盡量把細胞層吹落，吹散；

3、取部分細胞懸液轉(zhuǎn)移到新的培養(yǎng)皿/瓶中，添加適當(dāng)?shù)?培養(yǎng)基，把細胞懸液打勻，于培養(yǎng)箱中培養(yǎng)；

4、注意培養(yǎng)基PH值變化情況，定期換液(每周２-３次)，待細胞密度達到８０%以后重復(fù)１項操作或者凍存。

三、特別注意：(如使用公共實驗室或者初次接觸細胞培養(yǎng)，建議添加雙抗培養(yǎng))

1、收到細胞后請盡快更換為含１５%血清的新鮮培養(yǎng)基，如因特殊情況需要繼續(xù)使用原瓶，請在原瓶培養(yǎng)基中額外添加１０%的血清，(原瓶培養(yǎng)基的繼續(xù)使用時間長不宜超過７２小時)；

2、貼壁細胞收到當(dāng)天切忌立刻消化，請將細胞換液后放置培養(yǎng)箱孵育到第二天再做消化傳代，請優(yōu)先選擇直徑６cm的培養(yǎng)皿進行傳代培養(yǎng)；

3、如簽收時出現(xiàn)培養(yǎng)瓶壁破裂，漏液等情況請及時做好照片記錄并聯(lián)系實驗室。

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