20157ES25 UCF·METM Nuclease(GMP Grade)
- 公司名稱 翌圣生物科技(上海)股份有限公司
- 品牌 Yeasen/翌圣生物
- 型號 20157ES25
- 產(chǎn)地 上海
- 廠商性質(zhì) 生產(chǎn)廠家
- 更新時間 2022/2/10 11:45:13
- 訪問次數(shù) 473
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供貨周期 | 現(xiàn)貨 | 規(guī)格 | 25KU |
---|---|---|---|
貨號 | 20157ES25 | 應(yīng)用領(lǐng)域 | 醫(yī)療衛(wèi)生,化工,生物產(chǎn)業(yè) |
UCF·METM UltraNuclease GMP-grade全能核酸酶
產(chǎn)品信息
產(chǎn)品名稱 | 產(chǎn)品編號 | 規(guī)格 | 儲存 | 價格(元) |
UCF·METM UltraNuclease GMP-grade全能核酸酶 | 20157ES25 | 25 KU | -20℃ | 1125.00 |
20157ES50 | 50 KU | -20℃ | 1965.00 | |
20157ES60 | 100 KU | -20℃ | 3245.00 | |
20157ES80 | 1 MU (1000 KU) | -20℃ | 27585.00 | |
20157ES90 | 5 MU (5000 KU) | -20℃ | 118655.00 |
產(chǎn)品描述
UltraNuclease(全能核酸酶),又稱非限制性核酸內(nèi)切酶、廣譜核酸酶;是一種來源于Serratia Marcescen的非特異性核酸內(nèi)切酶,可在鏈內(nèi)任意核苷酸間進(jìn)行切割,將核酸*消化成2-5個堿基長度的5'-單磷酸寡核苷酸,能夠在非常廣泛的條件下(6 M Urea,0.1 M Guanidine HCl,0.4% Triton X100,0.1% SDS,1 mM EDTA,1 mM PMSF)降解各種形式的(雙鏈,單鏈,線狀,環(huán)狀,天然或變性)DNA和RNA,廣泛用于去除生物制品中的核酸。
本品經(jīng)基因工程改造在Escherichia coli (E. coli)中表達(dá)純化并在GMP環(huán)境下制備,不僅可在科學(xué)研究中降低細(xì)胞上清和細(xì)胞裂解液的粘度,提高蛋白純化效率及功能研究;還可以應(yīng)用在病毒純化、疫苗生產(chǎn)、蛋白和多糖類制藥工業(yè)作為宿主殘留核酸去除試劑,將宿主殘留核酸降至皮克(pg)級別從而提高生物制品功效和安全性;并且可以有效防止細(xì)胞治療和疫苗研究中人外周血單核細(xì)胞(PBMC)的結(jié)團(tuán)。
本品以無菌液體酶的形式提供,儲存于緩沖液(20 mM Tris-HCl pH 8.0,2 mM MgCl2,20 mM NaCl,50%甘油)中,無色透明液體。
產(chǎn)品性質(zhì)
來源 | E. coli |
生產(chǎn)管理標(biāo)準(zhǔn) | ISO9001/GMP |
分子量(Molecular Weight) | 26.5 kDa |
等電點(diǎn) | 6.85 |
純度(Purity) | ≥ 99%(SDS-PAGE) |
酶活(Enzyme Activity) | ≥ 250 U/μL |
比活(Specific Activity) | ≥ 1.5×106 U/mg蛋白 |
最適pH(Optimum pH) | 8.0(工作范圍pH 6-10) |
最適溫度(Optimum Temperature) | 37℃(工作范圍0-42℃) |
輔助因子(Cofactor) | 1-10 mM Mg2+ |
蛋白酶活性(Protease) | Undetected |
無菌檢查(Sterility) | Undetected |
內(nèi)毒素(Endotoxin) | < 0.25EU/1000U |
宿主蛋白殘留(Host protein) | < 10ppm(μg/mL) |
儲存緩沖液(Storage Buffer) | 20 mM Tris-HCl pH8.0,2 mM MgCl2,20 mM NaCl,50%甘油 |
活性單位定義(Unit Definition) | 在37℃,pH 8.0反應(yīng)條件下,2.625 mL反應(yīng)體系中,在30 min內(nèi)使△A260吸收值變化1.0(相當(dāng)于*消化37 μg鮭魚精DNA成為寡核苷酸)所用的酶量定義為一個活性單位(U)。 |
運(yùn)輸和保存方法
冰袋運(yùn)輸。-20℃保存,有效期1年。若是打開包裝后并4℃放置超過一周,建議過濾除菌防止微生物污染。
注意事項
為了您的安全和健康,請穿實(shí)驗服并戴一次性手套操作。
推薦使用條件
條件參數(shù) | 最///佳條件 | 有效條件 |
Mg2+ | 1-2 mM | 1-10 mM |
pH | 8-9 | 6-10 |
溫度 | 37℃ | 0-42℃ |
DTT | 0-100 mM | >0 mM |
巰基乙醇 | 0-100 mM | >0 mM |
單價陽離子 | 0-20 mM | 0-150 mM |
磷酸根離子 | 0-10 mM | 0-100 mM |
推薦使用量及處理時間
UltraNuclease用量(終濃度) | 處理時間 |
0.25 U/mL | > 1 h |
2.5 U/mL | 15 min |
25 U/mL | 2 min |
使用方法
樣本準(zhǔn)備
貼壁細(xì)胞:去除培養(yǎng)基,用PBS清洗細(xì)胞,去除上清。
懸浮細(xì)胞:離心收集細(xì)胞,用PBS清洗細(xì)胞,6,000 rpm 離心10 min,收集沉淀。
大腸桿菌:離心收集菌體,用PBS清洗1次,8,000 rpm 離心5 min,收集沉淀。
2、樣品處理
將收集到的細(xì)胞沉淀按照質(zhì)量(g)與體積(mL)比1:(10~20) 的比例進(jìn)行裂解處理,也可通過在冰上或室溫通過機(jī)械或化學(xué)方法裂解細(xì)胞(1 g細(xì)胞約為109個)。
3、酶的添加
按照250 Units消化1 g細(xì)胞沉淀的比例添加UltraNuclease,也可以跟據(jù)上表中的推薦使用量自行選定添加方案,在一定范圍內(nèi)增加酶量,消化所需時間相應(yīng)減少。
4、上清獲取
以12,000 rpm的轉(zhuǎn)速離心30min獲得細(xì)胞裂解液上清,再進(jìn)行后續(xù)相關(guān)實(shí)驗。
【注】若溶液為高鹽溶液,偏酸性或者偏堿性,含有較高濃度的去垢劑、變性劑,應(yīng)適當(dāng)增加酶的用量或延長孵育時間。
相關(guān)產(chǎn)品
產(chǎn)品名稱 | 貨號 | 規(guī)格 |
UCF·METM UltraNuclease全能核酸酶 | 20156ES25 | 25 KU |
20156ES50 | 50 KU | |
20156ES60 | 100 KU | |
UCF·METM UltraNuclease(Endotoxin-free)全能核酸酶 | 20125ES25 | 25 KU |
20125ES50 | 50 KU | |
20125ES60 | 100 KU |
HB210326