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化工儀器網(wǎng)>產(chǎn)品展廳>試劑標物>行業(yè)專用試劑>生化與分子生物學用試劑> K7M2wt+luc小鼠骨肉瘤成骨細胞

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K7M2wt+luc小鼠骨肉瘤成骨細胞

參考價 3000
訂貨量 ≥1
具體成交價以合同協(xié)議為準

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武漢原生原代生物醫(yī)藥科技有限公司(原生原代,PriCells)于2009年成立。位于湖北省武漢市東湖高新技術(shù)開發(fā)區(qū)東湖國家自主創(chuàng)新示范區(qū)域,總部設(shè)立在武漢國家生物產(chǎn)業(yè)基地(即光谷生物城——光谷智慧健康園。作為中國專業(yè)的、專注的研發(fā)--生產(chǎn)--銷售多種屬組織源性細胞產(chǎn)品和提供細胞檢測技術(shù)服務(wù)的生物醫(yī)藥企業(yè),*獨立起草和制定了“基于多種屬組織源性細胞分離、培養(yǎng)、運輸和檢測的PriCells技術(shù)流程”的行業(yè)專業(yè)標 準,已被學術(shù)機構(gòu)認可,被中國的學術(shù)機構(gòu)和企業(yè)單位廣泛應(yīng)用。研發(fā)和生產(chǎn)的細胞產(chǎn)品主要面向科研院所、生物技術(shù)公司、制藥企業(yè)研發(fā)中心和臨床醫(yī)療機構(gòu)。

 

      原生原代(PriCells)—— 細胞產(chǎn)品潛心研發(fā)已長達13年

      原生原代(PriCells)—— 細胞產(chǎn)品推向市場突破1000余種

      原生原代(PriCells)—— 細胞產(chǎn)品使用客戶單位突破600余家

      原生原代(PriCells)—— 細胞產(chǎn)品學術(shù)文章引用累計數(shù)突破800余篇

 

 

 

 

 

 

 

原代細胞,細胞系,培養(yǎng)基

供貨周期 一周 規(guī)格 1 × 10^6 細胞數(shù)/1ml
應(yīng)用領(lǐng)域 醫(yī)療衛(wèi)生,化工,生物產(chǎn)業(yè) 主要用途 科研

K7M2wt+luc小鼠骨肉瘤成骨細胞

細胞介紹

抗原表達: CD31 陽性 [PubMed:1315100] 產(chǎn)物: 八因子 [PubMed: 11315100]; 整合唾液酸蛋白 (BSP) [PubMed11315100]; biglyan [PubMed: 11315100]; decorrin [PubMed:1315100]; villin 2 (ezrin) [PubMed: 11325848]. 骨唾液酸蛋白, biglyan, decorrin, 和 osteopontin 的表達顯示其骨家族細胞特性。 在本庫通過支原體檢測。該細胞通過慢病毒轉(zhuǎn)染的方式攜帶Luc基因。


細胞特性

1) 來源:BALB/c 器官: 骨 疾病: 骨肉瘤 來源轉(zhuǎn)移灶: 肺 細胞類型: 成骨細胞;

2) 形態(tài):成骨細胞  貼壁生長

3) 含量:>1x10^6  細胞數(shù)

4) 規(guī)格:T25瓶或者1mL凍存管包裝

5)  用途:僅供科研使用。


K7M2wt+luc小鼠骨肉瘤成骨細胞

運輸和保存

干冰運輸及復蘇好存活細胞

(1)1mL凍存管包裝干冰運輸,收到后-80度冰箱保存過夜后轉(zhuǎn)入液氮或直接復蘇,若發(fā)現(xiàn)干冰已揮發(fā)干凈、凍存管瓶蓋脫落、破損及細胞有污染,請立即與我們聯(lián)系。

(2)T25瓶復蘇的存活細胞常溫發(fā)貨,收到后按照細胞接收后的處理方法操作。


細胞接收后的處理

1)收到細胞后,75%酒精消毒瓶壁將T25瓶置于37℃培養(yǎng)箱放置約2-3h,若發(fā)現(xiàn)培養(yǎng)瓶破損、有液溢出及細胞有污染,請拍照后及時聯(lián)系我們。

2)請在4或5X顯微鏡下確認細胞狀態(tài),同時給剛收到的細胞拍照(10×,20×)各2-3張以及培養(yǎng)瓶外觀照片一張留存,作為售后時收到時細胞狀態(tài)的依據(jù)。

3)貼壁細胞:細胞在37℃培養(yǎng)箱中放置2-3h,顯微鏡下觀察細胞的生長和貼壁情況,有些貼壁細胞在快遞運送過程中會因振動脫落和脫落后成團的情況。若鏡下觀察細胞的生長密度若在60%以下,可去除培養(yǎng)瓶中灌液培養(yǎng)基(若有未貼壁的細胞需要離心回收,重懸打入到原培養(yǎng)瓶中),加入新配制的*培養(yǎng)基6-8mL,放到細胞培養(yǎng)箱中繼續(xù)培養(yǎng)。若細胞生長密度達70%-80%以上,可以對細胞進行傳代處理。傳代過程中,若因運輸振動脫落的細胞需要離心回收。

4)備注:運輸用的培養(yǎng)基(灌液培養(yǎng)基)不能再用來培養(yǎng)細胞,請換用按照說明書細胞培養(yǎng)條件新配制的*培養(yǎng)基來培養(yǎng)細胞。  收到細胞后第一次傳代建議T25培養(yǎng)瓶1:2傳代 。        

         

一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準備:

1) 準備DMEM(推薦:0001)培養(yǎng)基;優(yōu)質(zhì)胎牛血清,10%;雙抗,1%。

2) 培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37攝氏度,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。

3) 凍存液:90%血清,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配。


二.細胞處理:

1) 凍存細胞的復蘇:

將含有1mL細胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍,加入到含4-6mL*培養(yǎng)基的離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心3-5min,棄去上清液,*培養(yǎng)基重懸細胞。然后將細胞懸液加入含6-8ml*培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶(或皿)中37℃培養(yǎng)過夜。第二天顯微鏡下觀察細胞生長情況和細胞密度。


2) 細胞傳代:如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養(yǎng)。

對于貼壁細胞傳代可以參考以下方法:

1. 棄去培養(yǎng)上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。

2. 加入0.25%(w / v)胰蛋白酶-0.53 mM EDTA于培養(yǎng)瓶中(T25瓶1-2mL,T75瓶2-3mL),置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘(難消化的細胞可以適當延長消化時間),然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況,若細胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加入3-4ml含10%FBS的培養(yǎng)基來終止消化。 

3.輕輕打勻后吸出,在1000RPM條件下離心3-5min,棄去上清液,補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。將細胞懸液按1:2的比例分到新T25瓶中,添加6-8ml按照說明書要求配置的新的*培養(yǎng)基以保持細胞的生長活力,后續(xù)傳代根據(jù)實際情況按1:2~1:5的比例進行。


3)細胞凍存: 收到細胞后建議在培養(yǎng)前3代時凍存一批細胞種子以備后續(xù)實驗使用。

下面T25瓶為例;

1. 細胞凍存時按照細胞傳代的過程收集消化好的細胞到離心管中,可使用血球計數(shù)板計數(shù),來決定細胞的凍存密度。一般細胞的推薦凍存密度為1×106~1×107個活細胞/ml.

2. 1000rpm離心3-5min,去掉上清。用配制好的細胞凍存液重懸細胞 ,按每1ml凍存液含1×106~1×107個活細胞/ml分配到一個凍存管中將細胞分配到凍存管中,標注好名稱、代數(shù)、日期等信息。

3. 將要凍存的細胞置于程序降溫盒中,-80度冰箱中過夜,之后轉(zhuǎn)入液氮容器中儲存。同時記錄好凍存管在液氮容器中的位置以便后續(xù)查閱和使用。



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