天辰回收  島津/安捷倫1260液相色譜儀

高效液相色譜法（HPLC）具有高壓、高效、高速、高靈敏度、高選擇性等特點(diǎn)，廣泛應(yīng)用于醫(yī)藥、環(huán)保、石化、食品、化工等行業(yè)，是現(xiàn)在分離分析的重要方法，本文著重介紹HPLC的工作原理、基本組成及高效液相色譜名詞術(shù)語，使新學(xué)者快速了解高效液相色譜知識(shí)，在日常操作中理論與實(shí)踐結(jié)合，確保HPLC的高效運(yùn)行、快速分析。

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HPLC工作原理

100多年前植物學(xué)家Tswett(茨維特) 他將植物色素的石油醚提取液倒入裝有碳酸鈣的直立玻璃管，再加入石油醚使其自由流下,結(jié)果色素中各組份互相分離形成各種不同顏色的譜帶，Tswett用希臘語chroma(色)和graphos(譜)描述他的

實(shí)驗(yàn)方法，即現(xiàn)在的Chromatography(色譜法)。

色譜法是通過是利用混合物中各組份在不同的兩相中溶解、分配、吸附等化學(xué)作用性能的差異，當(dāng)兩相作相對(duì)運(yùn)動(dòng)時(shí)，使各組分在兩相中反復(fù)多次受到上述各作用力而達(dá)到相互分離，色譜法的本質(zhì)是分離分析方法

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液相色譜儀是一種用液體作為流動(dòng)相的色譜分離分析的方法，是基于金典色譜的理論，使用高壓泵、化學(xué)柱和固定相分離柱以及高靈敏度的檢測(cè)器，液相色譜儀和氣相色譜儀之間有什么區(qū)別呢？這里小編就來給大家介紹一下，僅供參考，希望對(duì)大家有所幫助！

液相色譜儀和氣相色譜儀之間的區(qū)別是：1、分析對(duì)象之間的區(qū)別

GC:適用于氣化程度高，熱穩(wěn)定性好，沸點(diǎn)低的樣品;但對(duì)于沸點(diǎn)高，揮發(fā)性差，熱穩(wěn)定性差，離子和高聚物的樣品，特別是對(duì)于大多數(shù)生化樣品而言，檢測(cè)不到20％的有機(jī)物質(zhì)。 HPLC：適用于溶解后可制成溶液的樣品（包括有機(jī)介質(zhì)溶液）,它不受樣品的揮發(fā)性和熱穩(wěn)定性的限制,它是一種分子量大，氣化困難，熱穩(wěn)定性差的生化樣品，聚合物和離子。類型樣品可用于廣泛的應(yīng)用，占有機(jī)物的80％。

2、流動(dòng)相位差異的差異GC：流動(dòng)相是惰性的，氣體組分與流動(dòng)相無親和力，僅與固定相相互作用。HPLC：流動(dòng)相為液體，流動(dòng)相和組分具有協(xié)同作用力，可提高色譜柱的選擇性，提高分離度，對(duì)分離起積極作用。此外，流動(dòng)相有很多種，房間的選擇范圍很廣。改變流動(dòng)相的極性和pH也可以調(diào)節(jié)分離。當(dāng)選擇具有不同比例的兩種或更多種液體作為流動(dòng)相時(shí)，可以提高分離選擇性。

3.運(yùn)行條件的差異GC：變暖操作。HPLC：室溫，高壓。

使用液相色譜儀時(shí)應(yīng)注意什么？更換流動(dòng)相時(shí)，必須按照規(guī)定的程序進(jìn)行，否則可能會(huì)出現(xiàn)問題，改變流動(dòng)相有三種情況：互溶性的流動(dòng)相的更換、無互溶性的流動(dòng)相的更換和緩沖溶液的更換，在種情況下，使用準(zhǔn)備更換的流動(dòng)相*清潔吸濾器，然后打開儀器的排水閥并按下清洗按鈕清潔泵中的流動(dòng)相。

將吸濾器放入新的流镲中并減慢流量。清潔幾分鐘后，關(guān)閉排水閥。接下來清潔色譜柱和檢測(cè)器池，直到基線穩(wěn)定。對(duì)于第二種情況，首先使用與新舊流動(dòng)相兼容的中間清潔溶液進(jìn)行清潔，然后使用新的流動(dòng)相進(jìn)行清潔，與種情況相同。對(duì)于第三種情況，應(yīng)使用蒸餾水作為中間清潔溶液，然后使用新的流動(dòng)相清洗。

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