Pine-神經電化學

使用快速掃描循環(huán)伏安法(FSCV)的研究人員經常使用經典的電生理學/神經科學方法結合電化學研究。其中一種方法是電流刺激。通過插入一個刺激電極并傳遞一系列確定的電流脈沖，研究人員可以使突觸中的囊泡釋放其內容物。FSCV 研究的常見神經化學物質包括單胺類多巴胺、5-羥色胺。通過 FSCV 測量這些神經分子濃度的變化，同時進行電刺激是業(yè)內一種常見做法。本文介紹了現(xiàn)有的選項耦合電流刺激與 FSCV，使用pine WaveNeuro神經系列電化學工作站.

當前電刺激實施步驟：

使用由HDCV軟件控制的WaveNeuro系統(tǒng)，用戶將電流刺激添加到FSCV測量序列中有兩種選擇。用戶可以:

1.將刺激電流引導至Pine Research“headstage cable connector ”  

2.直接使用隔離器的電流刺激盒，發(fā)出刺激電流

采用Pine Research的WaveNeuro FSCV恒電位器以及HDCV軟件。 在HDCV軟件中，導航到“Set up Experiment”下的STIM選項卡(參見圖1)。

在這個屏幕上，用戶每幀中的模擬刺激脈沖。在圖1中右側，FSCV 波形與模擬刺激脈沖疊加。第三條曲線稱為“錯誤”，用于指示脈沖序列和 FSCV 波形之間是否有任何重疊，這將在使用過程中引起問題。通過修改循環(huán)伏安（CV） RAMP 參數(shù)的 STIM 參數(shù)(或兩者都修改)來解決任何紅色曲線重疊區(qū)域。

 在 Wave Neuro FSCV 電化學工作站上，找到頂部面板上標記為 STIMULUS 的區(qū)域(參見圖2)。在那里，你會發(fā)現(xiàn)兩個 BNC 連接器，一個用于輸出信號(STIM OUT（AO3）作為電壓的刺激序列)和一個 PASSTHRU BNC，它被動地接受輸入并將其路由到headstage cable刺激連接器的終端。

刺激方法一：Passthrough 刺激

Pine headstage cable

PINE headstage cable的優(yōu)勢之一是 它具備兩個連接終端。一個連接終端用于連接headstage、飛線、工作電極和參考電極。另一個連接器是一個常見的雙管刺激連接器(305/CP，來自 Plastics1/Invvo1/P Technologies)。

另一個優(yōu)勢是將連接器物理層面接近工作電極和參考電極可用的位置可最大限度地減少將多個導線連接到已經十分擁擠的空間中

目前PASSTHRU刺激是通過以下幾個綜合方面實現(xiàn)的:

1.用戶必須在 HDCV 中設置一個刺激脈沖序列，該序列與在電化學測量期間應用的 FSCV 斜率一致(即不重疊) 。

2.HDCV 中定義的脈沖序列作為電壓輸出，并映射到前面板上的 STIMULUS STIM OUT (AO3) BNC。這個電壓必須傳送到一個隔離的電流刺激盒，然后轉換成電流。

3. 電流刺激盒的電流輸出通過通過 Wave Neuro (電流輸入前面板上的 PASSTHRU (headstage) BNC)的信號在headstage終端連接器處可用。

PASSTHRU方法產品配置：

進行此設置所需的組件/附件如下所示(參見圖3和表1)。 但是下面的列表和圖是將電流刺激通過頭臺電纜終端適配器headstage的基本設置。

刺激方法二：直接刺激方法

另一種選擇是將刺激電流直接從當前的刺激隔離器輸送到動物體內。初始設置與上面的passthrough選項相同，但是電流不是通過WAveNeuro傳輸?shù)?/span>headstage的末端，而是直接傳輸?shù)絼游锷砩稀?/span>

直接刺激是通過以下幾個綜合方面實現(xiàn)的:

1.用戶必須在 HDCV 中設置一個刺激脈沖序列，該序列與在電化學測量期間應用的 FSCV 斜率一致(即不重疊)

2.HDCV 中定義的脈沖序列作為電壓輸出，并映射到前面板上的 STIMULUS STIM OUT (AO3) BNC。這個電壓必須傳送到一個隔離的電流刺激盒，然后轉換成電流。

3.然后，通過連接適當?shù)碾娎|和刺激電極，電流刺激箱的電流輸出可以直接輸送到動物體內。進行此設置所需的組件/附件如下所示。下面的圖是電流刺激通過haadstage電纜終端適配器的基本設置。

直接刺激方法產品配置