171831 特異性糖苷水解酶ENDO-CC內(nèi)切酶
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- 公司名稱(chēng) 上海優(yōu)柏生物科技有限公司
- 品牌 FUSHIMI
- 型號(hào) 171831
- 產(chǎn)地 日本
- 廠(chǎng)商性質(zhì) 代理商
- 更新時(shí)間 2023/10/13 14:32:00
- 訪(fǎng)問(wèn)次數(shù) 2610
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| 供貨周期 | 一個(gè)月 | 貨號(hào) | 171831 |
|---|---|---|---|
| 應(yīng)用領(lǐng)域 | 生物產(chǎn)業(yè),制藥,綜合 | 主要用途 | 標(biāo)準(zhǔn)品,糖苷合成，抗體修飾、ADC藥物制作 |
特異性糖苷水解酶ENDO-CC內(nèi)切酶， ENGase 廣泛應(yīng)用于需要糖肽、糖蛋白和糖復(fù)合物的均質(zhì)糖苷的合成應(yīng)用中。 治療性單克隆抗體的聚糖重構(gòu)尤其重要，因?yàn)榫厶墙Y(jié)構(gòu)影響抗體效應(yīng)器功能、穩(wěn)定性和藥代動(dòng)力學(xué)/藥效學(xué)。
為了控制Fc-N-聚糖，我們進(jìn)行了Fc-N-聚糖從異構(gòu)N-糖基化模式重排為用化學(xué)酶法與兩種類(lèi)型的內(nèi)-β-乙酰基合成同質(zhì)N-聚糖氨基葡糖苷酶(ENG’ases)，一種作為水解酶切割所有異構(gòu)體的酶N-聚糖，另一種用作糖苷合成酶以產(chǎn)生均勻的N-聚糖。
作為起始材料，我們使用了轉(zhuǎn)基因家蠶中產(chǎn)生的抗Her2抗體
繭，由非巖藻糖基少甘露糖型(Man2-3GlcNAc2)、高甘露糖組成
型(Man4-9GlcNAc2)和復(fù)合型(Man3GlcNAc3-4)N-聚糖。因此
幾種ENG’ase(endoS、endoM、endoD、endoH和endoLL)的裂解
抗體上的聚糖通過(guò)endoS、endoD和endoLL的組合。接下來(lái)，所需的N-聚糖(M3；Man3-
GlcNAc1、G0；GlcNAc2Man3GlcNAc1、G2；Gal2GlcNAc2Man3GlcNAc1，A2；NeuAc2Gal2GlcNAc2Man3GlcNAc1)
從相應(yīng)的惡唑啉轉(zhuǎn)移到具有ENG’ase突變體(endo-S-D233Q)的完整抗Her2抗體上的GlcNAc殘基，并且
獲得了糖工程化的抗Her2抗體?？笻er2抗體的結(jié)合測(cè)定具有FcγRIIIa-V158的同質(zhì)N-聚糖表明γRIIIa-V158的親和力。此外，糖工程抗Her2的ADCC測(cè)定使用SKBR-3和BT474進(jìn)行抗體(mAb-M3、mAb-G0、mAb-G2和mAb-A2)并揭示了糖型影響ADCC活性。
特異性糖苷水解酶ENDO-CC內(nèi)切酶
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