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?實時熒光定量PCR實驗服務(wù)

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隆科生物(青島)有限公司成立于2021年,位于山東省青島市城陽區(qū),立足于生命科學(xué)領(lǐng)域研發(fā)檢測合作、科研服務(wù)、項目孵化及成果轉(zhuǎn)化,專注于生物醫(yī)學(xué)研究整體課題服務(wù),為醫(yī)院、高校、科研院所藥企等科研工作者提供專業(yè)的整體科研解決方案和一站式醫(yī)學(xué)科研服務(wù)。

公司擁有700㎡專業(yè)實驗室的實驗設(shè)備,建成集實驗動物質(zhì)量檢測、課題設(shè)計產(chǎn)品評價、動物建模等技術(shù)及產(chǎn)品研發(fā)、服務(wù)、產(chǎn)業(yè)化為一體的現(xiàn)代實驗動物公共服務(wù)平臺,開展服務(wù)項目涵蓋動物模型、病理學(xué)、分子生物學(xué)、免疫學(xué)、細胞生物學(xué)等多領(lǐng)域生物科研技術(shù)服務(wù),為生命科學(xué)研究、生物醫(yī)藥、新藥研發(fā)等產(chǎn)業(yè)發(fā)展提供實驗動物公共服務(wù)基礎(chǔ)條件協(xié)助完成科研技術(shù)成果轉(zhuǎn)化及產(chǎn)品研發(fā),為提升醫(yī)學(xué)工作者科研實力提供優(yōu)質(zhì)的技術(shù)服務(wù)。

公司擁有一支以高級科研人員為主的技術(shù)管理團隊,同時擁有一支由海內(nèi)外大學(xué)博士的技術(shù)性人才團隊,科研人員中具有碩士和博士學(xué)位占80%以上。公司已為各類科研工作者提供了近200余項專項實驗外包或整體課題外包項目服務(wù),實驗項目涵蓋生命科學(xué)、醫(yī)學(xué)的各研究領(lǐng)域。同時,公司已與多家高校、科研院所和醫(yī)藥企業(yè)單位建立了戰(zhàn)略合作關(guān)系,并在科研技術(shù)服務(wù)、醫(yī)藥產(chǎn)品研發(fā)等多個領(lǐng)域進行了合作。

公司擁有專業(yè)領(lǐng)域的技術(shù)資源和經(jīng)驗豐富的管理執(zhí)行團隊,以技術(shù)為導(dǎo)向,“專注生物技術(shù),以科研促臨床”,專業(yè)的方案、高效的實驗實施、靈活的合作方式、完善的動物疾病模型庫、具有臨床參考價值的結(jié)果、多元化的檢測手段、豐富的項目經(jīng)驗廣大科研工作者構(gòu)筑醫(yī)學(xué)和生命科學(xué)研究的一座座豐碑!


動物模型構(gòu)建,醫(yī)學(xué)實驗外包,整體課題實驗外包,生物科研實驗服務(wù),生物醫(yī)學(xué)檢測服務(wù),細胞實驗服務(wù),動物實驗技術(shù)服務(wù),課題項目合作服務(wù)

實時熒光定量PCR是一種分子生物學(xué)實驗手段,旨在通過實時監(jiān)測PCR反應(yīng)過程中熒光信號的變化,對特定DNA序列進行定量分析。這種方法能夠準(zhǔn)確判斷患者體內(nèi)的病毒含量或特定基因的表達水平,為疾病的診斷和治療提供重要參考。

實時熒光定量PCR實驗原理

實時熒光定量PCR基于熒光能量傳遞技術(shù),利用熒光基團在PCR反應(yīng)過程中的累積來實時監(jiān)測整個反應(yīng)進程。在PCR擴增的指數(shù)時期,模板的Ct值(即熒光信號達到設(shè)定的閾值時所經(jīng)過的循環(huán)數(shù))和該模板的起始拷貝數(shù)存在線性關(guān)系,因此可以作為定量的依據(jù)。

實時熒光定量PCR實驗方法

1.樣品處理:采集患者體內(nèi)的分泌物或其他生物樣本作為待測樣品,并進行適當(dāng)?shù)奶幚硪蕴崛NA或RNA。

2.制備混合反應(yīng)液:將提取的DNA或RNA與PCR反應(yīng)液(包括引物、熒光基團、酶等)混合,制備成PCR反應(yīng)體系。

3.設(shè)定熒光閾值:在PCR反應(yīng)開始前,設(shè)定一個熒光閾值,用于后續(xù)判斷Ct值。

4.CR擴增與熒光檢測:將混合反應(yīng)液置于PCR儀中進行擴增,同時實時檢測熒光信號的變化。每經(jīng)過一個循環(huán),收集一個熒光強度信號,最終得到一條熒光擴增曲線圖。

5.數(shù)據(jù)分析:根據(jù)熒光擴增曲線圖,確定Ct值,并利用已知起始拷貝數(shù)的標(biāo)準(zhǔn)品繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線。通過標(biāo)準(zhǔn)曲線,可以計算出待測樣品的起始拷貝數(shù)或表達水平。

送檢與交付標(biāo)準(zhǔn)

送檢樣品需滿足一定的質(zhì)量和數(shù)量要求,以確保實驗結(jié)果的準(zhǔn)確性和可靠性。

1.樣品類型:明確送檢的樣品類型,如血液、組織、分泌物等。

2.樣品數(shù)量:提供足夠數(shù)量的樣品,以確保實驗的可重復(fù)性和準(zhǔn)確性。

3.保存條件:按照規(guī)定的保存條件(如溫度、濕度等)保存樣品,避免樣品降解或污染。

4.運輸條件:在運輸過程中保持樣品的穩(wěn)定性和完整性,避免樣品受損或變質(zhì)。

5.交付標(biāo)準(zhǔn)包括實驗報告和原始數(shù)據(jù)等,實驗報告應(yīng)詳細記錄實驗過程、結(jié)果和結(jié)論,原始數(shù)據(jù)則應(yīng)包括熒光擴增曲線圖、Ct值、標(biāo)準(zhǔn)曲線等關(guān)鍵信息。

實時熒光定量PCR實驗應(yīng)用

實時熒光定量PCR已廣泛應(yīng)用于臨床及生命科學(xué)研究的各個領(lǐng)域中,具體包括:

1.臨床疾病診斷:用于檢測病毒感染等疾病的病原體含量,為疾病的診斷和治療提供重要參考。

2.基因表達分析:用于分析細胞、組織或樣品中的基因表達水平,了解基因在特定條件下的表達模式和調(diào)控機制。

3.遺傳學(xué)研究:用于基因突變和多態(tài)性分析,單核苷酸多態(tài)性(SNP)測定及易位基因的檢測等,為遺傳病的診斷和預(yù)防提供重要依據(jù)。

4.農(nóng)業(yè)研究:用于作物培育和遺傳學(xué)研究中,通過檢測植物基因組中的突變和表達量變化,評估作物的生長發(fā)育情況和適應(yīng)性。

注意事項

在進行實時熒光定量PCR實驗時,需要注意以下幾點以確保實驗結(jié)果的準(zhǔn)確性和可靠性:

1.實驗環(huán)境:保持實驗環(huán)境的清潔和無菌,避免實驗污染問題。

2.試劑質(zhì)量:使用高質(zhì)量的PCR試劑和熒光基團,確保實驗的靈敏度和特異性。

3.操作規(guī)范:嚴(yán)格按照實驗步驟進行操作,避免操作失誤導(dǎo)致實驗結(jié)果異常。

4.儀器校準(zhǔn):定期對PCR儀進行校準(zhǔn)和維護,確保儀器的準(zhǔn)確性和穩(wěn)定性。

5.數(shù)據(jù)解讀:正確解讀實驗結(jié)果和數(shù)據(jù),避免誤判或漏判導(dǎo)致誤診或漏診。

【隆科生物合作項目】

1.病理檢測:石蠟包埋、切片、HE染色、masson染色、番紅固綠染色、天狼星紅染色、免疫組化、免疫熒光單標(biāo)/雙標(biāo)/多標(biāo)、全景掃描、激光共聚焦拍照等。

2.分子生物學(xué)實驗:熒光定量PCR檢測、Western blot檢測、血常規(guī)、生化酶活、ELISA檢測等。

3.細胞實驗:耐藥細胞株構(gòu)建、細胞毒性實驗、細胞遷移實驗、細胞侵襲實驗、細胞流式周期檢測、細胞流式凋亡檢測等。

4.動物實驗動物模型構(gòu)建、動物飼養(yǎng)服務(wù)、動物臨床前研究、藥效評價、功能性評價等。

5.微生物學(xué)實驗:抑菌試驗、藥敏試驗、菌種鑒定、微生物多態(tài)性分析等實驗。





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