HE染色，即蘇木精-伊紅染色，是組織學(xué)、病理學(xué)中常用的染色方法之一。HE染色的主要目的是使細(xì)胞組織內(nèi)的不同結(jié)構(gòu)呈現(xiàn)不同的顏色，以便于在顯微鏡下觀察和分析。通過染色，可以清晰地看到細(xì)胞核、細(xì)胞質(zhì)、細(xì)胞外基質(zhì)等結(jié)構(gòu)的形態(tài)和分布，從而幫助病理學(xué)家和組織學(xué)家進行疾病的診斷和研究。

HE染色實驗原理

HE染色的原理是利用蘇木精和伊紅兩種染料對組織中的不同成分進行選擇性染色。蘇木精是一種堿性染料，能夠?qū)⒓?xì)胞核內(nèi)染色質(zhì)與胞漿內(nèi)的核酸染成藍色或紫色;伊紅是一種酸性染料，能夠?qū)⒓?xì)胞質(zhì)、細(xì)胞外基質(zhì)中的蛋白質(zhì)等染成紅色或粉紅色。通過這種染色方法，可以使組織樣本中的細(xì)胞結(jié)構(gòu)和組成清晰可見。

HE染色實驗步驟

1.取材與固定：選擇新鮮的組織樣本，大小適中，放入固定劑(如甲醛、乙醇等)中進行固定，使組織細(xì)胞的形態(tài)和結(jié)構(gòu)保持穩(wěn)定。

2.脫水與透明：將固定好的組織樣本依次放入不同濃度的乙醇中進行脫水，然后用二甲苯進行透明處理，使組織中的乙醇被二甲苯取代。

3.浸蠟與包埋：將透明后的組織樣本放入熔化的石蠟中進行浸蠟處理，然后包埋在石蠟塊中，使組織樣本具有一定的硬度和形狀。

4.切片與貼片：將包埋好的石蠟塊固定在切片機上切成薄片，然后將切好的切片放入溫水中展平并貼在載玻片上。

5.脫蠟與水化：將貼好的切片依次放入二甲苯和不同濃度的乙醇中進行脫蠟和水化處理。

6.染色：將水化后的切片先放入蘇木精染液中染色，然后用流水沖洗去除多余的染液;接著放入鹽酸酒精中分化，使細(xì)胞核的染色更加清晰;之后放入弱堿性水中返藍;最后放入伊紅染液中染色。

7.脫水、透明與封片：將染色后的切片依次放入不同濃度的乙醇中進行脫水處理，然后用二甲苯進行透明處理;最后用中性樹膠進行封片處理，使切片長期保存并便于觀察。

HE染色實驗送檢與交付標(biāo)準(zhǔn)

送檢的HE染色樣本通常需要滿足一定的要求，如樣本的種屬、類型(固定液固定組織、蠟塊或切片)、取材要求(橫切或縱切)以及拍照要求等。交付標(biāo)準(zhǔn)通常包括蠟塊、切片、染色圖片以及實驗報告(包括試劑、儀器、材料等)。

HE染色實驗應(yīng)用

HE染色在病理學(xué)和組織學(xué)領(lǐng)域具有廣泛的應(yīng)用，包括但不限于：

1.疾病診斷：HE染色用于診斷多種疾病，包括癌癥、傳染病和自身免疫性疾病等。染色提供了有關(guān)細(xì)胞和組織結(jié)構(gòu)的基本信息，可用于診斷或排除某些疾病。

2.組織檢查：HE染色通常用于檢查活組織檢查或尸檢標(biāo)本中的組織。染色提供了細(xì)胞和組織結(jié)構(gòu)的清晰視圖，使病理學(xué)家更容易識別和診斷疾病。

3.科研與教學(xué)：HE染色還用于研究各種疾病中細(xì)胞和組織的結(jié)構(gòu)，并了解這些疾病的潛在機制。此外，它還用于教學(xué)實驗，向?qū)W生傳授細(xì)胞和組織的結(jié)構(gòu)以及人體中存在的不同類型的細(xì)胞和組織。

HE染色實驗注意事項

1.染色液的新舊會影響染色效果。新配的蘇木素染液染色時間可縮短，使用一段時間的染液則適當(dāng)延長。同樣，新配的伊紅染色快，切片染色不宜過長。

2.切片的數(shù)目也會影響染色效果。染過一定數(shù)量的切片后，蘇木素染液的著色力會減弱，可逐步延長染色時間。

3.在切片分化過程中，要防止分化過度，應(yīng)在鏡下觀察控制切片分化程度。

4.分化后的切片應(yīng)在自來水或稀氨水中充分沖洗至變藍色，以確保細(xì)胞核的染色清晰。

5.在整個染色過程中，要注意保持切片的濕潤和避免污染，以確保染色效果的準(zhǔn)確性和可靠性。

【隆科生物合作項目】

1.病理檢測：石蠟包埋、切片、HE染色、masson染色、番紅固綠染色、天狼星紅染色、免疫組化、免疫熒光單標(biāo)/雙標(biāo)/多標(biāo)、全景掃描、激光共聚焦拍照等。

2.分子生物學(xué)實驗：熒光定量PCR檢測、Western blot檢測、血常規(guī)、生化酶活、ELISA檢測等。

3.細(xì)胞實驗：耐藥細(xì)胞株構(gòu)建、細(xì)胞毒性實驗、細(xì)胞遷移實驗、細(xì)胞侵襲實驗、細(xì)胞流式周期檢測、細(xì)胞流式凋亡檢測等。

4.動物實驗：動物模型構(gòu)建、動物飼養(yǎng)服務(wù)、動物臨床前研究、藥效評價、功能性評價等。

5.微生物學(xué)實驗：抑菌試驗、藥敏試驗、菌種鑒定、微生物多態(tài)性分析等實驗。