HE染色，即蘇木精-伊紅染色，是組織學(xué)、病理學(xué)中常用的染色方法之一。HE染色的主要目的是使細(xì)胞組織內(nèi)的不同結(jié)構(gòu)呈現(xiàn)不同的顏色，以便于在顯微鏡下觀察和分析。通過染色，可以清晰地看到細(xì)胞核、細(xì)胞質(zhì)、細(xì)胞外基質(zhì)等結(jié)構(gòu)的形態(tài)和分布，從而幫助病理學(xué)家和組織學(xué)家進(jìn)行疾病的診斷和研究。

HE染色實(shí)驗(yàn)原理

HE染色的原理是利用蘇木精和伊紅兩種染料對(duì)組織中的不同成分進(jìn)行選擇性染色。蘇木精是一種堿性染料，能夠?qū)⒓?xì)胞核內(nèi)染色質(zhì)與胞漿內(nèi)的核酸染成藍(lán)色或紫色;伊紅是一種酸性染料，能夠?qū)⒓?xì)胞質(zhì)、細(xì)胞外基質(zhì)中的蛋白質(zhì)等染成紅色或粉紅色。通過這種染色方法，可以使組織樣本中的細(xì)胞結(jié)構(gòu)和組成清晰可見。

HE染色實(shí)驗(yàn)步驟

1.取材與固定：選擇新鮮的組織樣本，大小適中，放入固定劑(如甲醛、乙醇等)中進(jìn)行固定，使組織細(xì)胞的形態(tài)和結(jié)構(gòu)保持穩(wěn)定。

2.脫水與透明：將固定好的組織樣本依次放入不同濃度的乙醇中進(jìn)行脫水，然后用二甲苯進(jìn)行透明處理，使組織中的乙醇被二甲苯取代。

3.浸蠟與包埋：將透明后的組織樣本放入熔化的石蠟中進(jìn)行浸蠟處理，然后包埋在石蠟塊中，使組織樣本具有一定的硬度和形狀。

4.切片與貼片：將包埋好的石蠟塊固定在切片機(jī)上切成薄片，然后將切好的切片放入溫水中展平并貼在載玻片上。

5.脫蠟與水化：將貼好的切片依次放入二甲苯和不同濃度的乙醇中進(jìn)行脫蠟和水化處理。

6.染色：將水化后的切片先放入蘇木精染液中染色，然后用流水沖洗去除多余的染液;接著放入鹽酸酒精中分化，使細(xì)胞核的染色更加清晰;之后放入弱堿性水中返藍(lán);最后放入伊紅染液中染色。

7.脫水、透明與封片：將染色后的切片依次放入不同濃度的乙醇中進(jìn)行脫水處理，然后用二甲苯進(jìn)行透明處理;最后用中性樹膠進(jìn)行封片處理，使切片長期保存并便于觀察。

HE染色實(shí)驗(yàn)送檢與交付標(biāo)準(zhǔn)

送檢的HE染色樣本通常需要滿足一定的要求，如樣本的種屬、類型(固定液固定組織、蠟塊或切片)、取材要求(橫切或縱切)以及拍照要求等。交付標(biāo)準(zhǔn)通常包括蠟塊、切片、染色圖片以及實(shí)驗(yàn)報(bào)告(包括試劑、儀器、材料等)。

HE染色實(shí)驗(yàn)應(yīng)用

HE染色在病理學(xué)和組織學(xué)領(lǐng)域具有廣泛的應(yīng)用，包括但不限于：

1.疾病診斷：HE染色用于診斷多種疾病，包括癌癥、傳染病和自身免疫性疾病等。染色提供了有關(guān)細(xì)胞和組織結(jié)構(gòu)的基本信息，可用于診斷或排除某些疾病。

2.組織檢查：HE染色通常用于檢查活組織檢查或尸檢標(biāo)本中的組織。染色提供了細(xì)胞和組織結(jié)構(gòu)的清晰視圖，使病理學(xué)家更容易識(shí)別和診斷疾病。

3.科研與教學(xué)：HE染色還用于研究各種疾病中細(xì)胞和組織的結(jié)構(gòu)，并了解這些疾病的潛在機(jī)制。此外，它還用于教學(xué)實(shí)驗(yàn)，向?qū)W生傳授細(xì)胞和組織的結(jié)構(gòu)以及人體中存在的不同類型的細(xì)胞和組織。

HE染色實(shí)驗(yàn)注意事項(xiàng)

1.染色液的新舊會(huì)影響染色效果。新配的蘇木素染液染色時(shí)間可縮短，使用一段時(shí)間的染液則適當(dāng)延長。同樣，新配的伊紅染色快，切片染色不宜過長。

2.切片的數(shù)目也會(huì)影響染色效果。染過一定數(shù)量的切片后，蘇木素染液的著色力會(huì)減弱，可逐步延長染色時(shí)間。

3.在切片分化過程中，要防止分化過度，應(yīng)在鏡下觀察控制切片分化程度。

4.分化后的切片應(yīng)在自來水或稀氨水中充分沖洗至變藍(lán)色，以確保細(xì)胞核的染色清晰。

5.在整個(gè)染色過程中，要注意保持切片的濕潤和避免污染，以確保染色效果的準(zhǔn)確性和可靠性。

【隆科生物合作項(xiàng)目】

1.病理檢測(cè)：石蠟包埋、切片、HE染色、masson染色、番紅固綠染色、天狼星紅染色、免疫組化、免疫熒光單標(biāo)/雙標(biāo)/多標(biāo)、全景掃描、激光共聚焦拍照等。

2.分子生物學(xué)實(shí)驗(yàn)：熒光定量PCR檢測(cè)、Western blot檢測(cè)、血常規(guī)、生化酶活、ELISA檢測(cè)等。

3.細(xì)胞實(shí)驗(yàn)：耐藥細(xì)胞株構(gòu)建、細(xì)胞毒性實(shí)驗(yàn)、細(xì)胞遷移實(shí)驗(yàn)、細(xì)胞侵襲實(shí)驗(yàn)、細(xì)胞流式周期檢測(cè)、細(xì)胞流式凋亡檢測(cè)等。

4.動(dòng)物實(shí)驗(yàn)：動(dòng)物模型構(gòu)建、動(dòng)物飼養(yǎng)服務(wù)、動(dòng)物臨床前研究、藥效評(píng)價(jià)、功能性評(píng)價(jià)等。

5.微生物學(xué)實(shí)驗(yàn)：抑菌試驗(yàn)、藥敏試驗(yàn)、菌種鑒定、微生物多態(tài)性分析等實(shí)驗(yàn)。