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產品名稱：兔肺大靜脈內皮細胞

組織來源：肺靜脈組織

產品規(guī)格：5×105cells/T25細胞培養(yǎng)瓶

培養(yǎng)信息：

包被條件 PLL（0.1mg/ml），明膠（0.1%）

培養(yǎng)基 含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等

換液頻率 每2-3天換液一次

生長特性 貼壁

細胞形態(tài) 內皮細胞樣

傳代特性 可傳1-3代

消化液 0.25%

培養(yǎng)條件 氣相：空氣，95%；CO2，5%

細胞簡介：

兔肺大靜脈內皮分離自肺大靜脈組織；肺大靜脈在用肺呼吸的脊椎動物中，把動脈血由肺送回心臟的靜脈，是一個靜脈里流動脈血的血管。左右1對，共4條，兩條連接右肺，兩條連接左肺。肺靜脈異位引流是指肺靜脈未能直接與左心房連接，而與右心房或體靜脈系統(tǒng)連接的先天性心血管異位。肺靜脈淤血性肺動脈高壓，是由于肺靜脈內血液淤滯而引起的肺動脈高壓。正常情況下，肺循環(huán)具有血壓低、阻力小和順應性大的特點，肺動脈壓力高低取決于單位時間內肺動脈血流量和肺血管的阻力，要維持肺循環(huán)的低壓、低阻的狀態(tài)，必須保證整個肺循環(huán)系統(tǒng)的暢通無阻，血液順利地由肺動脈經(jīng)毛細血管進入肺靜脈，再入左心室，經(jīng)過左心室收縮進入體循環(huán)，才能避免肺動脈內壓力升高。細胞呈多邊形鵝卵石狀排列；該細胞在維持血管內外的動態(tài)平衡、合成和分泌細胞因子和介質、維持凝血和纖溶的動態(tài)平衡中起重要作用。

方法簡介：

公司實驗室分離的兔肺大靜脈內皮采用-膠原酶聯(lián)合消化法結合差速貼壁法、并通過內皮細胞專用培養(yǎng)基培養(yǎng)篩選制備而來，細胞總量約為5×10?cells/瓶。

質量檢測：

公司實驗室分離的兔肺大靜脈內皮經(jīng)CD31免疫熒光鑒定，純度可達90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。

培養(yǎng)步驟：

一、復蘇細胞：將含有1mL細胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍，加入5mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000RPM條件下離心5分鐘，棄去上清液，補加4-6mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜（或將細胞懸液加入6cm皿中），培養(yǎng)過夜。第二天換液并檢查細胞密度。

二、細胞傳代：如果細胞密度達80%-90%，即可進行傳代培養(yǎng)。

a）、對于貼壁細胞，傳代可參考以下方法：

1. 棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。

2. 加1-2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養(yǎng)瓶中，置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2min，然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況，若細胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加5ml以上含10%血清的培養(yǎng)基終止消化。

3.輕輕吹打細胞，脫落后吸出，在1000RPM條件下離心8-10分鐘，棄去上清液，補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。

4. 按5-6ml/瓶補加培養(yǎng)液，將細胞懸液按1：2的比例分到新的含5-6 ml培養(yǎng)液的新皿中或者瓶中。

b）、對于懸浮細胞，傳代可參考以下方法：

方法一：收集細胞，1000RPM條件下離心8-10分鐘，棄上清液，補加1-2ml培養(yǎng)液后吹勻，將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或瓶中。

方法二：可選擇半數(shù)換液方式，棄半數(shù)培養(yǎng)基后，將剩余細胞懸起，將細胞懸液按1:2到1:3的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基新皿中或者瓶中。
公司正在出售的產品：

小鼠巨噬細胞性蛋白3α(MIP-3α/CCL20)ELISAKit   ELISA.   96T/48T

小鼠基質金屬蛋白酶2/明膠酶A(MMP-2/GelatinaseA)ELISAKit   ELISA.   96T/48T

小鼠腺嘌呤二核苷酸0酸(NADPH)ELISAKit   ELISA.   96T/48T

瓜酸   ELISA.   96T/48T

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Rat collagenase II (Collagenase II) ELISA Kit 大鼠膠原酶II(Collagenase II)試劑盒

HumanPerforin/Pore-formingprotein,PF/PFPELISAKit 人穿孔素/成孔蛋白(PF/PFP)試劑盒 96T/48T 進口分裝

HumanActivatedLeukocyteCellAdhesionMolecule,ALCAM試劑盒人白細胞活化黏附因子(ALCAM)試劑盒規(guī)格：96T/48T

脂質過氧化物4-羥基壬烯酸(4-HNE)ELISA定量測定試劑盒48/96次

Mouseangiotensinogen,aGTELISAKit小鼠血管緊張素原(aGT)試劑盒規(guī)格：96T/48T

G蛋白偶聯(lián)受體109A抗體

環(huán)指蛋白89

ST6GALNAC2重組小鼠 STHM / ST6GALNAC2 蛋白 Protein

胞外5'-核苷酸酶(NT5E)重組蛋白 Recombinant 5'-Nucleotidase, Ecto (NT5E)

EBAG9重組人 RCAS1 / EBAG9 蛋白 Protein

CXCL1 Protein Human 重組人 CXCL1 / MGSA / NAP-3 蛋白 (His & SUMO 標簽)

CD53 Protein Cynomolgus 重組食蟹猴 CD53 蛋白 (aa 107-181, Fc 標簽)

Alpha-AF/ Alpha-Afa(alpha-L-arabinofuranosidase 0.5mgAlpha-AF/ Alpha-Afa(alpha-L-arabinofuranosidase) α-L-阿拉伯呋喃糖苷酶抗原

CXCL1 Protein Human 重組人 CXCL1 / MGSA / NAP-3 蛋白 (His & SUMO 標簽)

SLAMF8重組小鼠 SLAMF8 / BLAME 蛋白 Protein

BST1 Protein Rat 重組大鼠 CD157 / BST1 蛋白

AGER重組人 AGER / RAGE 蛋白 Protein

兔肺大靜脈內皮細胞大鼠內皮素受體A(EA)試劑盒 ，英文名： EA ELISA Kit

Mouse platelet factor 3 (PF-3) ELISA Kit 小鼠血小板因子3(PF-3)試劑盒

RatGlycogenphosphorylaseBB,GP-BBELISAKit 大鼠糖原0酸化酶同工酶BB(GP-BB)試劑盒 96T/48T 進口分裝

CLIAKitforGIP(MouseGlucose-dependeinsulin-releasingpolypeptide)ELISAKit小鼠葡萄糖依賴性胰島素釋放多肽

細胞脯肽酶(prolidase;PLD)克林納(Chinard)比色法定量試劑盒20次

RatsolubleToll-likereceptor2,sTLR-2ELISAKit大鼠可溶性Toll樣受體2(sTLR2)試劑盒規(guī)格：96T/48T

收到細胞如何處理？

1、首先，觀察細胞培養(yǎng)瓶是否完好，培養(yǎng)液是否有漏液、渾濁等現(xiàn)象。若有，請拍照，并及時與技術支持聯(lián)系（所拍照片將作為后續(xù)服務依據(jù)）。

2、用75%酒精擦拭細胞培養(yǎng)瓶表面，顯微鏡下觀察細胞狀態(tài)。因運輸問題，部分貼壁細胞會有少量從瓶壁脫落；先不要打開培養(yǎng)瓶蓋，將細胞置于細胞培養(yǎng)箱內靜置培養(yǎng)2-4小時，以便穩(wěn)定細胞狀態(tài)。

3、仔細閱讀細胞說明書，了解細胞相關信息，如貼壁特性（貼壁/懸?。?、細胞形態(tài)、所用基礎培養(yǎng)基、血清比例、所需細胞因子、傳代比例、換液頻率等。

4、靜置完成后，取出細胞培養(yǎng)瓶，鏡檢、拍照，記錄細胞狀態(tài)（所拍照片將作為后續(xù)服務依據(jù)）；建議細胞傳代培養(yǎng)后，定期拍照、記錄細胞生長狀態(tài)。

5、貼壁細胞：若細胞生長密度超過80%，可正常傳代；若未超過80%，移除細胞培養(yǎng)瓶內培養(yǎng)基，預留5ml左右繼續(xù)培養(yǎng)，直至細胞密度達80%左右再進行傳代操作，瓶蓋可稍微擰松。

6、懸浮細胞：將細胞培養(yǎng)瓶內液體全部轉移至50ml無菌離心管內，1200rpm離心5min，離心后上清培養(yǎng)基可收集備用，管底細胞沉淀加入5ml培養(yǎng)基吹打、重懸。鏡檢時，若細胞密度超過80%，可將細胞懸液分至2個細胞培養(yǎng)瓶內培養(yǎng)，補加培養(yǎng)基至5ml；若細胞密度未超過80%，將細胞懸液移至原瓶繼續(xù)培養(yǎng)，直至細胞密度達80%左右時再進行傳代操作