CloneJET PCR克隆試劑盒
具體成交價以合同協(xié)議為準(zhǔn)
- 公司名稱 賽默飛世爾科技（中國）有限公司
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- 型號
- 產(chǎn)地
- 廠商性質(zhì) 生產(chǎn)廠家
- 更新時間 2024/11/20 21:23:34
- 訪問次數(shù) 40
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賽默飛世爾科技賽默飛世爾科技（紐約證交所代碼：TMO）是科學(xué)服務(wù)領(lǐng)域的世界領(lǐng)導(dǎo)者。公司年銷售額超過250億美元。在全球擁有約70,000名員工。我們的使命是攜手客戶，讓世界更健康、更清潔、更安全。我們幫助客戶加速生命科學(xué)領(lǐng)域的研究、解決在分析領(lǐng)域所遇到的復(fù)雜問題與挑戰(zhàn)，促進(jìn)醫(yī)療診斷發(fā)展、加速藥物上市進(jìn)程、提高實(shí)驗(yàn)室生產(chǎn)力。我們?nèi)虺^75,000名賽默飛員工將借助于一系列行業(yè)領(lǐng)先的品牌Thermo Scientific、Applied Biosystems、Invitrogen、Fisher Scientific、Unity Lab Services和Patheon，為客戶提供另想的創(chuàng)新技術(shù)、便捷采購方案和全方位服務(wù)。
欲了解更多信息，請瀏覽公司網(wǎng)站：www.thermofisher.com 賽默飛世爾科技中國簡介賽默飛世爾科技進(jìn)入中國發(fā)展已超過35年，在中國的總部設(shè)于上海，并在北京、廣州、香港、成都、沈陽、西安、南京、武漢、昆明等地設(shè)立了分公司，員工人數(shù)約為5000名。我們的產(chǎn)品主要包括分析儀器、實(shí)驗(yàn)室設(shè)備、試劑、耗材和軟件等，提供實(shí)驗(yàn)室綜合解決方案，為各行各業(yè)的客戶服務(wù)。為了滿足中國市場的需求，現(xiàn)有7家工廠分別在上海、北京、蘇州和廣州等地運(yùn)營。我們在全國還設(shè)立了8個應(yīng)用開發(fā)中心以及示范實(shí)驗(yàn)室，將世界級的前沿技術(shù)和產(chǎn)品帶給中國客戶，并提供應(yīng)用開發(fā)與培訓(xùn)等多項(xiàng)服務(wù)；擁位于上海的中國創(chuàng)新中心，擁有有100多位專業(yè)研究人員和工程師及70多項(xiàng)專利。創(chuàng)新中心專注于針對垂直市場的產(chǎn)品研究和開發(fā)，結(jié)合中國市場的需求和國外先進(jìn)技術(shù)，研發(fā)適合中國的技術(shù)和產(chǎn)品；我們擁有遍布全國的維修服務(wù)網(wǎng)點(diǎn)和特別成立的中國技術(shù)培訓(xùn)團(tuán)隊(duì)，在全國有超過2600名專業(yè)人員直接為客戶提供服務(wù)。我們致力于幫助客戶使世界更健康、更清潔、更安全。
欲了解更多信息，請登錄網(wǎng)站：www.thermofisher.com 全國服務(wù)熱線：021-61621892公司電子郵箱：sales.china@thermofisher.com
欲了解更多信息，請瀏覽公司網(wǎng)站：www.thermofisher.com 賽默飛世爾科技中國簡介賽默飛世爾科技進(jìn)入中國發(fā)展已超過35年，在中國的總部設(shè)于上海，并在北京、廣州、香港、成都、沈陽、西安、南京、武漢、昆明等地設(shè)立了分公司，員工人數(shù)約為5000名。我們的產(chǎn)品主要包括分析儀器、實(shí)驗(yàn)室設(shè)備、試劑、耗材和軟件等，提供實(shí)驗(yàn)室綜合解決方案，為各行各業(yè)的客戶服務(wù)。為了滿足中國市場的需求，現(xiàn)有7家工廠分別在上海、北京、蘇州和廣州等地運(yùn)營。我們在全國還設(shè)立了8個應(yīng)用開發(fā)中心以及示范實(shí)驗(yàn)室，將世界級的前沿技術(shù)和產(chǎn)品帶給中國客戶，并提供應(yīng)用開發(fā)與培訓(xùn)等多項(xiàng)服務(wù)；擁位于上海的中國創(chuàng)新中心，擁有有100多位專業(yè)研究人員和工程師及70多項(xiàng)專利。創(chuàng)新中心專注于針對垂直市場的產(chǎn)品研究和開發(fā)，結(jié)合中國市場的需求和國外先進(jìn)技術(shù)，研發(fā)適合中國的技術(shù)和產(chǎn)品；我們擁有遍布全國的維修服務(wù)網(wǎng)點(diǎn)和特別成立的中國技術(shù)培訓(xùn)團(tuán)隊(duì)，在全國有超過2600名專業(yè)人員直接為客戶提供服務(wù)。我們致力于幫助客戶使世界更健康、更清潔、更安全。
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科學(xué)儀器
- Thermo Scientific™ CloneJET™ PCR Cloning Kit是一個的陽性選擇克隆系統(tǒng)，可以高效克隆各種PCR產(chǎn)物和任何具有平末端或粘性末端的DNA片段。該試劑盒對磷酸化或非磷酸化的DNA片段都有效。陽性選擇載體和插入片段連接僅需5分鐘即可獲得超過99%的陽性重組克隆。PCR產(chǎn)物無需純化。由具有校正活性的聚合酶(如：Pfu polymerase)擴(kuò)增的平末端PCR產(chǎn)物可直接連入克隆載體。由無校正活性的聚合酶(如：Taq polymerase)或聚合酶混合物擴(kuò)增的PCR產(chǎn)物在連接前需用試劑盒提供的熱穩(wěn)定DNA平端化酶削平突出末端(5分鐘即可)。連接產(chǎn)物可直接轉(zhuǎn)化常用的大腸桿菌菌株。
試劑盒提供一個新穎的即用型陽性選擇克隆載體pJET2.1/blunt。該載體含有致死的限制酶基因(內(nèi)含多克隆位點(diǎn))。多克隆位點(diǎn)插入外源片段會引起酶基因失活。因此只有轉(zhuǎn)化了重組質(zhì)粒的細(xì)菌才能存活形成克隆菌落。而自身環(huán)化的pJET1.2/blunt載體表達(dá)致死的限制酶(無外源片段插入)，轉(zhuǎn)化后殺死大腸桿菌細(xì)胞。這種陽性篩選策略極大地加速了克隆篩選進(jìn)程，節(jié)省了藍(lán)白斑篩選的額外費(fèi)用。
為方便酶切作圖和插入片段基因操作，pJET1.2/blunt克隆載體的多克隆位點(diǎn)兩側(cè)各包含一個BglII識別序列。此外，該載體含有T7啟動子，可用于體內(nèi)或體外轉(zhuǎn)錄、插入片段測序等研究。
特點(diǎn)- 快速 一 PCR克隆只需5分鐘。
- 高效 一 >99%陽性克隆。
- 無克隆背景 一 陽性篩選載體。
- 通用一適合平末端和粘性末端克隆。
- 經(jīng)濟(jì) 一 無需昂貴的藍(lán)白篩選。
應(yīng)用- 適用平末端和帶有3'-dA尾的PCR產(chǎn)物克隆。
- 限制酶切割產(chǎn)物克隆。
- 測序克隆的DNA。
- 克隆插入片段體內(nèi)和體外轉(zhuǎn)錄(T7啟動子介導(dǎo)轉(zhuǎn)錄)。
質(zhì)量控制功能測試：含有3’-dA尾的對照PCR產(chǎn)物克隆證明重組子比率>99%。載體自連實(shí)驗(yàn)表明無克隆背景。pJET1.2 primers適合特異性高效測序。組分- pJET1.2/blunt Cloning Vector (pJET1.2 DNA sequence in txt format)
- T4 DNA Ligase
- 2X Reaction Buffer
- Blunting Enzyme
- pJET1.2 Forward Sequencing Primer
- pJET1.2 Reverse Sequencing Primer
- Control PCR Product (sequence of control PCR product in txt format)
- Water, nuclease-free
- 詳細(xì)的操作手冊
備注
電轉(zhuǎn)化前，需用氯仿抽提使連接產(chǎn)物中的T4 DNA連接酶失活。
表1.CloneJET™ 克隆步驟。
圖1.pJET1.2/blunt 載體圖譜。
pJET1.2/blunt 載體圖譜 (pdf, 188??B). pJET1.2 DNA 序列 (*.txt file).
圖2.平末端PCR產(chǎn)物克?。憾喾N平末端PCR產(chǎn)物克隆系統(tǒng)(陽性選擇)的效率比較。
Pfu DNA Polymerase擴(kuò)增976 bp的PCR產(chǎn)物(平末端)直接連入不同的陽性篩選克隆載體(所有操作均嚴(yán)格按照生產(chǎn)商的操作說明)。連接產(chǎn)物(2 μl)轉(zhuǎn)化E.coli DH10B感受態(tài)細(xì)胞。感受態(tài)細(xì)胞的轉(zhuǎn)化效率為1x107重組子/μg 超螺旋DNA。
圖3.含有3’-dA尾的PCR產(chǎn)物克?。翰煌琍CR克隆策略的效率比較。
Taq DNA Polymerase擴(kuò)增976 bp的PCR產(chǎn)物(含3'-dA尾)連入pJET1.2/blunt載體和其它TA克隆載體(所有操作均嚴(yán)格按照生產(chǎn)商的操作說明)。連接產(chǎn)物(2 μl)轉(zhuǎn)化E.coli DH10B感受態(tài)細(xì)胞。感受態(tài)細(xì)胞的轉(zhuǎn)化效率為1x107重組子/μg超螺旋DNA。
訂購信息貨號 產(chǎn)品名稱 規(guī)格 K1231 CloneJET PCR Cloning Kit 20 rxns K1232 CloneJET PCR Cloning Kit 40 rxns
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