大腸桿菌蛋白表達系統(tǒng)是目前應用廣泛，也是經濟實惠的蛋白表達系統(tǒng)。E. coli具有遺傳背景清楚、細胞增殖快、表達量高、穩(wěn)定性好和抗污染能力強等特點，適用于多種屬蛋白的表達，尤其對小分子蛋白的生產具有極大的優(yōu)勢，但也存在一些問題，如易形成包涵體和含有內毒素等。義翹神州提供從密碼子優(yōu)化到重組蛋白表達/純化的一站式服務以及內毒素去除等附加服務，以滿足不同的定制需求。我們擁有豐富的E. coli 可溶性蛋白表達/純化及蛋白復性經驗，擁有多種E. coli細胞株和表達載體，可為客戶提供優(yōu)質的原核蛋白表達服務。

E. coli 蛋白表達服務內容

• 附加服務
為滿足客戶的特定需求，義翹神州還提供更加廣泛的服務，包括：內毒素去除服務、標簽去除服務、蛋白標記服務。

原核蛋白表達服務流程

大腸桿菌蛋白表達服務案例

案例 #1: 在大腸桿菌（E. coli）中表達可溶性無標簽蛋白

三步法進行蛋白純化（基于蛋白質的等電點、疏水性和分子量）

1st step:                     Protein Purification by SP-FF	2nd step:                     Protein Purification by HIC-FF	3rd Step:                     Protein Purification by SEC

• 案例 #2: 在大腸桿菌（E. coli）中表達目的蛋白

義翹神州按照客戶要求，采用原核表達系統(tǒng)進行目的蛋白的表達和純化，成功交付了純化蛋白和質量檢驗報告 (CoA)。相關的SEC-HPLC、SDS-PAGE和細胞活性分析結果如下所示。

SEC-HPLC>98.5%	Reducing SDS-PAGE>95%	Cell bioactivity: EC50=17pg/mL

原核蛋白表達的常見問題解答

• 什么情況下建議選擇大腸桿菌表達系統(tǒng)？
  大腸桿菌表達系統(tǒng)是常用的蛋白表達系統(tǒng)，優(yōu)勢包括遺傳背景清晰、成本低、表達量高、易于放大和時間短等，缺點是容易形成包涵體和無法進行翻譯后修飾。該系統(tǒng)適用于表達原核來源的蛋白或不需要翻譯后修飾的真核來源蛋白，特別是小分子蛋白。如果您感興趣的蛋白符合這種情況，建議選擇原核表達系統(tǒng)。

• 在大腸桿菌蛋白表達系統(tǒng)中，義翹神州能解折疊不溶蛋白嗎？
  是的。我們的科學家在蛋白質解折疊方面擁有豐富的經驗。選擇哪種蛋白解折疊策略需要根據蛋白質的序列和結構特性來確定。

• 義翹神州提供標簽去除服務嗎？
  是的。我們構建載體時可以在標簽蛋白和目的蛋白之間加上蛋白酶的酶切位點，這樣純化后就可以利用蛋白酶去除標簽，得到完整的目的蛋白。蛋白酶的切割效率受目的蛋白的影響，具體由實驗結果而定。

• 密碼子優(yōu)化可以提高蛋白表達水平嗎？
  一般來說，經過密碼子優(yōu)化后，蛋白的表達水平會變高。 因此，我們也提供密碼子優(yōu)化服務。