多重免疫組化檢測(cè)
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- 公司名稱 上海博谷生物科技有限公司
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- 型號(hào)
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- 廠商性質(zhì) 經(jīng)銷商
- 更新時(shí)間 2025/3/6 13:53:28
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多重免疫組化檢測(cè)實(shí)驗(yàn)步驟：
1．包埋好的標(biāo)本用石蠟切片機(jī)切片3um
2．經(jīng)60℃烘片1小時(shí)
3．二甲苯Ⅰ脫蠟10分鐘
4．二甲苯Ⅱ脫蠟10分鐘
5．梯度酒精復(fù)水：100%酒精5分鐘，100%酒精5分鐘，95%酒精5分鐘，80%酒精5分鐘，自來(lái)水沖洗 5分鐘
6．進(jìn)行抗原修復(fù)：將切片置于0.1mol/L且ph=6.0的枸櫞酸液修復(fù)液中，沸水浴20分鐘，停止加熱后自然冷卻20-30分鐘
7. 用PBS 3分鐘3次，組畫筆畫圈，滴加雙氧水，孵育20min
8．用PBS 3分鐘3次，滴加封閉血清封閉1h
9．甩干，滴加適宜濃度的一抗置濕盒中4℃孵育過夜
10．用PBS 3分鐘×5次洗去一抗
11．甩干，滴加二抗室溫置孵育盒中孵育1小時(shí)（注意二抗種屬，夏季30min，冬季1h）
12．用PBS 3分鐘×5次洗去二抗
13．甩干，滴加DAB 顯色，水沖
14．蘇木素染核5min (新配置的蘇木素視情況而定)
15．流水沖洗多余的蘇木素，分化液中分化1秒
16．流水沖洗5min
17．梯度酒精復(fù)水：80%酒精5分鐘，95%酒精5分鐘，100%酒精5分鐘，100%酒精5分鐘，二甲苯Ⅱ透明5min，二甲苯Ⅰ透明5min（如為全透明，可適當(dāng)延長(zhǎng)時(shí)間）
18．用中性樹膠封片
19．鏡檢
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