諾博萊德 West Pico ECL超敏發(fā)光液，West Pico ECL Substrate

West Pico ECL超敏發(fā)光液  顯色與信號(hào)檢測

產(chǎn)品貨號(hào)：PE8808

產(chǎn)品名稱：West Pico ECL超敏發(fā)光液

產(chǎn)品規(guī)格：2*12.5ml/ 2*50ml

產(chǎn)品簡介：

英文名稱：West Pico ECL Substrate

中文名稱：West Pico ECL超敏發(fā)光液

規(guī)格：2*12.5ml/ 2*50ml

純度：＞99%

儲(chǔ)存條件：2-8℃，1 year

具體產(chǎn)品的參數(shù)以收到產(chǎn)品說明書的參數(shù)為準(zhǔn)

產(chǎn)品介紹：

NobleRyder PE8808 West Pico ECL超敏發(fā)光液，West Pico ECL Substrate用于檢測直接或間接標(biāo)記辣根過氧化物酶HRP的抗體及其關(guān)聯(lián)的抗原。由于采用了du特的發(fā)光底物系統(tǒng)，West Pico ECl超敏發(fā)光液是目前zui靈敏的商業(yè)化熒光ECL檢測試劑：
(1) 可在日光燈下進(jìn)行發(fā)光操作;

產(chǎn)品說明：

West Pico 超敏發(fā)光液用于檢測直接或間接標(biāo)記辣根過氧化物酶HRP的抗體及其關(guān)聯(lián)的抗原。用于HRP標(biāo)記抗體的Western Blot和HRP標(biāo)記探針的核酸雜交。由于采用了du特的發(fā)光底物系統(tǒng)，West Pico超敏發(fā)光液是目前zui靈敏的商業(yè)化熒光ECL檢測試劑：

具有ji高靈敏度和高信噪比；可在日光燈下進(jìn)行發(fā)光操作；發(fā)光迅速，熒光可使X光膠片感光達(dá)12小時(shí)以上，特別適用于痕量蛋白或核酸檢測；可使用更高的抗體稀釋倍數(shù)(1:2000～1:10000)，極其節(jié)省抗體。

使用方法:

1. 執(zhí)行常規(guī)SDS-PAGE、轉(zhuǎn)膜和Western Blot步驟。注意用HRP標(biāo)記lgG或用一抗-鏈親和素-生wu素-HRP夾法。

2. Western Blot最后一次洗膜的同時(shí)新鮮配制發(fā)光工作液：分別取等體積的溶液A和B，放入干凈容器中混合。建議立即使用工作液，室溫放置數(shù)小時(shí)后仍可使用但靈敏度略有降低。

3. 用鑷子取出膜，搭在濾紙上瀝干洗液但勿使膜wan全干燥。將膜wan全浸入發(fā)光工作液(0.125mL發(fā)光工作液/cm2膜)中，與發(fā)光工作液充分接觸。室溫孵育3分鐘，準(zhǔn)備立即壓片曝光。孵育時(shí)間過長不會(huì)增加靈敏度，有時(shí)還會(huì)導(dǎo)致曝光條帶異常。發(fā)光過程的本質(zhì)是酶促反應(yīng)，使用過少的發(fā)光工作液不利反應(yīng)進(jìn)行，也會(huì)導(dǎo)致膜上條帶曝光不均和明顯降低靈敏度。為達(dá)節(jié)約目的可將膜剪小但勿降低發(fā)光液用量。

4. 用鑷子夾起膜，搭在濾紙上瀝干發(fā)光工作液。但勿洗去發(fā)光液。

5. 打開X光膠片暗盒，在暗盒內(nèi)表面鋪一張面積大于膜的保鮮膜。將Western Blot膜貼在保鮮膜上，將保鮮膜折起來wan全包裹Western Blot膜，去除氣泡和皺褶，可剪去邊緣部多余的保鮮膜。用濾紙吸去多余的發(fā)光工作液。用膠帶將覆蓋Western Blot膜的保鮮膜固定在暗盒內(nèi)，蛋白帶面向上。

6. 暗房內(nèi)壓X光膠片，分別曝光不同的時(shí)間如數(shù)秒到數(shù)分鐘。顯影沖洗。

注意事項(xiàng)：

1. 步驟1～5可在日光燈下操作;但發(fā)光液曝露于強(qiáng)光下時(shí)間過久靈敏度可能略有降低，移到暗房操作可避免之。戴手套可以避免在膜上留下手印。

2. 長時(shí)間曝光或蛋白過量，將加深背景并使條帶強(qiáng)弱變化失去線性關(guān)系。曝光不足則條帶模糊。

3. 發(fā)光工作液孵育約3分鐘后膜上的條帶發(fā)光。強(qiáng)條帶發(fā)光在暗房中肉眼可見，低豐度蛋白條帶發(fā)光較弱甚至肉眼不可見但可使X光膠片曝光。不能簡單以肉眼觀察判斷條帶發(fā)光時(shí)間。肉眼不可見的熒光實(shí)際上可持續(xù)數(shù)小時(shí)并使X光膠片感光，因而弱帶可曝光1-10小時(shí)。如果曝光后條帶不佳，可用洗膜緩沖液洗膜，重新孵育二抗，然后重新用ECL發(fā)光和曝光。

4. 由于超敏發(fā)光液極其靈敏，強(qiáng)烈推薦大多數(shù)進(jìn)口抗體起始濃度為一抗1:1000～1:4000，二抗1:2000～1:5000?？贵w濃度過高將造成高背景或沒有條帶，導(dǎo)致失敗。

5. 某些保鮮膜包裹印跡膜時(shí)可能會(huì)淬滅熒光，應(yīng)選擇高質(zhì)量保鮮膜。

6. 使用肉眼可見的預(yù)染色蛋白Marker和熒光-放射自顯影曝光標(biāo)簽可精確確定膠片上條帶的位置和大小。

7. NaN3能抑制HRP活性，回收第二抗體應(yīng)避免使用NaN3，如必需使用勿超過0.01%。

 備注：產(chǎn)品信息可能會(huì)有優(yōu)化升級(jí)。請以實(shí)際標(biāo)簽信息為準(zhǔn)。    

West Pico ECL超敏發(fā)光液  顯色與信號(hào)檢測

產(chǎn)品訂購信息：

NobleRyder PE8808 West Pico ECL超敏發(fā)光液，West Pico ECL Substrate  2*12.5ml/ 2*50ml