EG15508S LightNing® AscI內(nèi)切酶
- 公司名稱 蘇州阿爾法生物實(shí)驗(yàn)器材有限公司
- 品牌 其他品牌
- 型號 EG15508S
- 產(chǎn)地
- 廠商性質(zhì) 經(jīng)銷商
- 更新時(shí)間 2025/4/11 11:39:50
- 訪問次數(shù) 50
快速限制性內(nèi)切酶?DNA修復(fù)與重組?基因克隆與載體構(gòu)建PCR產(chǎn)物酶切驗(yàn)證
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蘇州阿爾法生物實(shí)驗(yàn)器材有限公司成立于2008年，位于蘇州園區(qū)生物納米園（Biobay）A5幢301室。公司管理團(tuán)隊(duì)專注于科學(xué)儀器行業(yè)十三年，擁有專業(yè)的技術(shù)團(tuán)隊(duì)與完善的售后服務(wù)體系，目前已為300余家實(shí)驗(yàn)室提供優(yōu)質(zhì)產(chǎn)品和服務(wù)，涵蓋各大高校、醫(yī)療機(jī)構(gòu)、檢測中心、科研機(jī)構(gòu)、制藥企業(yè)等13個(gè)群體。代理的實(shí)驗(yàn)室儀器主要包括振蕩培養(yǎng)箱，PCR儀，移液器，生物反應(yīng)器，發(fā)酵罐，移液器，超低溫冰箱，醫(yī)用冰箱，液氮罐，高壓滅菌器，超純水機(jī)，天平，離心機(jī)等。廠商企業(yè)授權(quán)包括知楚儀器、朗基、中科美菱，梅特勒，樂楓，搏旅、NEST、天根、奧盛在內(nèi)等多家等。在提供產(chǎn)品的同時(shí)也為您提供生物實(shí)驗(yàn)室常用的耗材試劑，以及實(shí)驗(yàn)室整體搬遷、第三方檢測、計(jì)量與校準(zhǔn)，二手儀器調(diào)劑等服務(wù)。完整的實(shí)驗(yàn)室一站式體驗(yàn)使您的選擇更加方便、快捷、靈活。
阿爾法性價(jià)比：一級代理；一手貨源；進(jìn)口品質(zhì)，國產(chǎn)價(jià)格；
阿爾法交貨期：自有倉庫，標(biāo)準(zhǔn)品有庫存，常規(guī)試劑耗材備有現(xiàn)貨；
阿爾法服務(wù)項(xiàng)目：實(shí)驗(yàn)室現(xiàn)場規(guī)劃，提供選型建議，合理化配置；
阿爾法售后服務(wù)：及時(shí)響應(yīng)，2小時(shí)給出解決方案，12小時(shí)內(nèi)響應(yīng)服務(wù)。品牌物流廠商直供，門對門服務(wù)。
阿爾法增值服務(wù)：免費(fèi)供樣機(jī)體驗(yàn)，免費(fèi)提供樣品試用，免費(fèi)安裝指導(dǎo)，免費(fèi)技術(shù)指導(dǎo)
阿爾法質(zhì)保期：終身質(zhì)保，免費(fèi)更換配件
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實(shí)驗(yàn)室設(shè)備,儀器,生物反應(yīng)器,發(fā)酵罐,不銹鋼生物反應(yīng)器,實(shí)驗(yàn)耗材,純水機(jī),離心機(jī),顯微鏡,電子天平
| 產(chǎn)地類別 | 國產(chǎn) | 應(yīng)用領(lǐng)域 | 生物產(chǎn)業(yè),制藥/生物制藥 |
|---|
LightNing® AscI內(nèi)切酶組成
組分 | 規(guī)格 |
LightNing® AscI | 50 μl |
10× CutOne® Buffer | 1 ml |
10× CutOne® Color Buffer | 1 ml |
特性和用法
LightNing® AscI內(nèi)切酶，可在5~15 min內(nèi)完成反應(yīng)
u建議反應(yīng)條件
1× CutOne®緩沖液；
37℃溫育；
參照“DNA 快速酶切流程”配制反應(yīng)體系。
u失活條件
80℃溫育20 min。
u甲基化敏感性
對于被 CpG 甲基化的 DNA，剪切可能受阻。
u存儲條件
-20℃
相關(guān)問答
Q:為什么在CutOne® Buffer中加入HSA？
A:一些酶在反應(yīng)過程中需要HSA的參與，我們在CutOne® Buffer中添加了HSA，避免反應(yīng)中額外添加組分，使得酶切反應(yīng)更加便捷。
Q:HSA的添加對于雷霆系列限制性內(nèi)切酶的功能會(huì)產(chǎn)生什么樣的影響？
A:在我們的測試中未曾發(fā)現(xiàn)HSA對于雷霆系列限制性內(nèi)切酶的功能有任何影響。在有些情況下，對于部分的酶切反應(yīng)有促進(jìn)作用。
Q:我需要嚴(yán)格遵守5~15 min的酶切時(shí)間嗎？能夠延長反應(yīng)時(shí)間嗎？
A:雷霆系列限制性內(nèi)切酶經(jīng)過改造可以將酶切時(shí)間縮短至5~15 min。同樣也消除了限制性內(nèi)切酶的星活性（長時(shí)間反應(yīng)造成的非特異性消化），在說明書中告知的星活性出現(xiàn)的時(shí)間范圍內(nèi)可以適當(dāng)延長反應(yīng)時(shí)間。
Q:我什么時(shí)候應(yīng)當(dāng)考慮星活性對于酶切反應(yīng)的影響？
A:如果額外的酶切條帶對于實(shí)驗(yàn)結(jié)果會(huì)產(chǎn)生影響時(shí)我們應(yīng)當(dāng)考慮星活性對于酶切反應(yīng)的影響。例如：進(jìn)行基因型、突變型分析或克隆時(shí)我們應(yīng)當(dāng)避免星活性的產(chǎn)生。避免星活性的有效方法：適當(dāng)擴(kuò)大反應(yīng)體積（較小的反應(yīng)體積容易造成甘油體積達(dá)到或超過總反應(yīng)體積的5%）；不進(jìn)行超長時(shí)間孵育（過夜消化極易產(chǎn)生星活性）。
Q:有哪些關(guān)鍵因素會(huì)導(dǎo)致星活性？
A:長時(shí)間孵育、過量的酶、高甘油含量（通常高于5%）、較小的反應(yīng)體系等因素都會(huì)導(dǎo)致星活性的產(chǎn)生。
Q:未經(jīng)純化的PCR產(chǎn)物直接酶切要怎樣設(shè)定體系？
A:反應(yīng)體系推薦由這些內(nèi)容組成：10 μl PCR產(chǎn)物、2 μl 10×CutOneTM Buffer、1~2 μl相應(yīng)的限制性內(nèi)切酶、ddH2O補(bǔ)齊到30 μl。酶的用量根據(jù)PCR產(chǎn)物的濃度而定，只加入2 μl反應(yīng)緩沖液的原因是PCR反應(yīng)中存在對應(yīng)的鹽離子和金屬離子，適當(dāng)減少反應(yīng)緩沖液的用量以保證最終反應(yīng)體系中的環(huán)境適宜限制性內(nèi)切酶發(fā)揮功能。
Q:限制性內(nèi)切酶簡并性識別位點(diǎn)一定是回文的嗎？
A:大多數(shù)二型限制性內(nèi)切酶的識別序列是回文的，而且是特定的堿基序列。然而有些限制性內(nèi)切酶具有簡并性識別位點(diǎn)，也就是說識別位點(diǎn)中有一個(gè)或以上的堿基對是非特異的（例如：BsrfI識別5’RCCGGY, R=A/G, Y=C/T）。對于這樣的具有簡并性識別位點(diǎn)的限制性內(nèi)切酶，只要是符合要求的序列皆能被識別并且被正確地切割（例如5’ ACCGGC, 5’ ACCGGT, 5’ GCCGGC, 和5’ GCCGGT，其中兩個(gè)并不是回文的，仍然能被BsrFI識別并且切割）。
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