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預(yù)制菜、肉制品中糖檢測之前處理方法

檢測樣品:預(yù)制菜 肉制品

檢測項目:

方案概述:本篇將介紹兩個肉制品中糖檢測的方法:方法一:使用巨研FaAEx-AD2糖專用SPE柱凈化,以LC/ELSD法分析;方法二:參考GB/T9695.31-2008方法,使用分光光度法和直接滴定法分析

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更新時間2023年01月10日

上傳企業(yè)綠巨研科貿(mào)易(上海)有限公司

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本篇中的肉制品,如素肉堡、腌漬鮮嫩雞胸肉、原味炸雞、辣味炸雞、基礎(chǔ)風(fēng)味雞肉絲、香料雞排、雞翅蓉、雞肉熱狗、香草雞腿排等,在加工過程中添加復(fù)雜的佐料進行調(diào)味,這給肉制品中糖的定量分析造成很大困難。

肉制品中糖的定量分析有兩個難點:

一、沒有現(xiàn)成的定量分析標準方法可以參考。

二、凈化不全的樣品溶液上機LC/ELSD后,極易毀壞糖專用色譜柱和堵塞ELSD霧化器,消耗很大的維修成本;為了解決這個問題,巨研科技研發(fā)出FaAEx-AD2糖專用SPE凈化柱,摸索出合適的前處理操作步驟和儀器分析條件。

此分析方法通過方法驗證后,邀請業(yè)內(nèi)同行進行實踐驗證,同行反饋FaAEx-AD2糖專用SPE柱的凈化效果良好!

本篇將介紹兩個肉制品中糖檢測的方法:

方法一:使用巨研FaAEx-AD2 糖專用SPE柱凈化,以LC/ELSD法分析;

方法二:參考GB/T 9695.31-2008方法,使用分光光度法和直接滴定法分析。

方法一:使用巨研FaAEx-AD2 糖專用SPE柱凈化

以泰式調(diào)味腿肉片樣品為例,測試果糖(Fructose)、山梨醇(Sorbitol)、半乳糖(Galactose)、葡萄糖(Glucose)、蔗糖(Sucrose)、乳糖(Lactose)和麥芽糖(Maltose),樣品加入10ml的50%乙醇溶液、超聲、震蕩、定容、離心后取上清液。

將上清液通過FaAEx-AD2糖專用柱除雜(只需一步過柱),獲得目標物溶液,過濾后上機到LC/ELSD進行定量分析。

1)前處理步驟:

樣品均質(zhì)

1g樣品于離心管中,加10 ml 50%乙醇溶液

超聲震蕩20min

高速震蕩10min

50%乙醇溶液定容至20 mL(固體樣品:直接加10mL)

6000rpm離心30min

10ml上清液過巨研FaAEx-AD2 糖專用SPE柱,取濾液上機分析

(無須活化平衡,一步通過法獲得目標物)

2)LC-MSMS分析出譜圖如下:

image.png

 

3)小結(jié):

使用FaAEx-AD2 糖專用SPE柱凈化后,再上機分析,有兩個好處:

  1. 果糖(Fructose)、山梨醇(Sorbitol)、半乳糖(Galactose)、葡萄糖(Glucose)、蔗糖(Sucrose)、乳糖(Lactose)和麥芽糖(Maltose)這7種糖的回收率在80-120%之間。

  2. 有效延長糖專用色譜柱的使用壽命,避免堵塞ELSD霧化器,大大降低耗材和配件的損耗成本。

  3. 前處理中已經(jīng)進行萃取、超聲和離心的凈化操作,為什么還要開發(fā)FaAEx-AD2 糖專用柱再次除雜?

    答:因為離心得到的上清液過濾膜后上機分析,進幾針樣品后,糖專用色譜柱被污染、ELSD霧化器也很快被堵塞,基本不能進行日常的品控管理。

    離心得到的上清液經(jīng)過FaAEx-AD2 糖專用柱凈化后,有效地解決了這個問題,需要在日常做肉制品中糖測試的用戶,持續(xù)回購FaAEx-AD2 糖專用柱。

    方法二:參考GB/T 9695.31-2008標準方法

關(guān)于肉制品中總糖的檢測,我們有一個標準方法,即:GB/T 9695.31-2008肉制品 總糖含量測定》,以葡萄糖為對照物。

第一法適用于肉制品中總糖含量的測定,使用分光光度法;

試樣中的總糖含量以葡萄糖計。

image.png

image.png

第二法適用于不含淀粉的肉制品中總糖含量的測定,使用直接滴定法測糖

image.png

image.png

總結(jié):

  1. 肉制品中糖的檢測,若采用GB/T 9695.31-2008標準方法,前處理步驟操作復(fù)雜,耗時長,花費大量人力,分析結(jié)果的靈敏度比LC/ELSD法低,幾乎不能做定量分析。

  2. 采用LC/ELSD法分析肉制品中的糖含量,難點在于怎么充分去除復(fù)雜樣品中的雜質(zhì)。通過在樣品中加入10ml的50%乙醇溶液、超聲、震蕩、定容、離心、過濾這些步驟,回收率尚可,但除雜效果不佳,進樣幾次后,糖專用色譜柱被污染,甚至ELSD霧化器被堵塞,增加耗材和儀器配件的消耗成本。

  3、將離心后的上清液,一步法通過FaAEx-AD2糖專用SPE柱的凈化、過濾后上機分析,可有效去除雜質(zhì),延長糖專用色譜柱和ELSD的使用壽命,且HPLC基線更加平穩(wěn),回收率表現(xiàn)更優(yōu)(80-120%)。

 

 

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