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安捷倫XDB-C18液相色譜柱

閱讀:5956        發(fā)布時間:2015/11/30
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安捷倫XDB-C18液相色譜柱

產(chǎn)品介紹

安捷倫 ZORBAX Eclipse XDB色譜柱 C18、C8、苯基和CN是為在寬pH范圍(pH2-9)獲得堿性、酸性和中性化合物良好的峰形而設(shè)計的。這一寬pH范圍實現(xiàn)了使用一個系列的色譜柱進行方法開發(fā)的靈活性。Eclipse XDB色譜柱可以用于低pH(2-3)的初始方法開發(fā),且可提供所有類型化合物的高分離度和出色峰形。同樣的色譜柱還可用于中等pH(6-8)范圍的方法開發(fā)。在中等pH范圍,殘留硅羥基活性更大,造成峰拖尾的相互作用更容易發(fā)生。為了克服這些相互作用,Eclipse XDB采用的工藝進行超密鍵合和雙封端,以覆蓋盡可能多的硅羥基。結(jié)果得到了pH 2-9范圍內(nèi)堿性化合物的出色峰形。Eclipse XDB色譜柱有C18、C8、苯基和CN鍵合相用于大多數(shù)分離的選擇性優(yōu)化,還有StableBond,Bonus-RP和Extend-C18可提供更多的選擇性。

 

 

 

品牌 安捷倫 型號 Agilent XDB-C18 4.6×250mm 5μm

測量范圍 見資料 測量對象 見資料

控溫范圍 25(℃) 尺寸 150(mm)

重量 0.2(kg)

 

 

 

適用PH范圍2-9
對堿性、中性和酸性化合物在中等PH范圍內(nèi)有出色峰形
超密鍵合和雙封端技術(shù)延長了柱子在中性PH條件下的壽命
穩(wěn)定性提高
用3.5μm柱可實現(xiàn)快速分離

 


液質(zhì)聯(lián)用儀使用經(jīng)驗

一、做液質(zhì),加離子誘導(dǎo)劑得是揮發(fā)性的,生物堿用甲酸或乙酸  

二、我認(rèn)為要維護好儀器  首先流速不能過大,液質(zhì)是不能承載過大流速的;  其次電壓不要加到極限,尤其是正負(fù)離子轉(zhuǎn)換時要適當(dāng)調(diào)整; zui后是做完樣一定要及時沖洗和吹掃管路。  

三、LC和MS的條件優(yōu)化是成功的關(guān)鍵。

四、  1、由于液質(zhì)的流速較?。‥SI一般為0.2ml/min),所以配置樣品的溶劑強度不能太大,盡量小于起始比例,否則,會出現(xiàn)保留時間偏移等問題。   2、如果在液相上摸好的條件,注意尤其是流動相的組成要轉(zhuǎn)化成合適LCMS分析的。   3、磷酸鹽及其他不揮發(fā)緩沖鹽在離子源會沉淀并堵塞毛細(xì)管等,要更換成可揮發(fā)的有機緩沖鹽。   4、緩沖鹽會導(dǎo)致離子抑制,因此要控制緩沖液的強度,<10mM。   5、去污劑、表面活性劑會有離子抑制現(xiàn)象發(fā)生, 表面活性劑產(chǎn)生的加合物和離子簇會干擾質(zhì)譜數(shù)據(jù),因此作液質(zhì)聯(lián)用儀時,不要使用洗滌劑清洗玻璃器皿等容器,如果一定要用,建議超聲清洗多次。

五、   要做好質(zhì)譜的維護工作,就得從小處著手。比如分析的樣品必須要干凈,這樣既可以保護色譜柱,也可以防止污染質(zhì)譜;分析了大量的生物樣品后,沖洗系統(tǒng)時,先用高比例的水相沖洗,把源也給洗一下,然后再換用高比例的有機相,這時要把柱后管路從源上拿下來,避免柱中的雜質(zhì)給沖進質(zhì)譜……細(xì)節(jié)很多很多,大家在日常應(yīng)用中盡量注意和避免就可以了。  

六、  做液質(zhì)三年了,島津、waters、ABI和finigan的都摸過,經(jīng)驗談不上,說點自己的注意點吧。   1.前處理:樣品一定要干凈,不管是為了質(zhì)譜還是為了保護柱子,生物樣品提取的好些,如果直接沉淀,一定要注意,盡量高轉(zhuǎn)速12000rpm以上,低溫離心,離2次(保險一點),轉(zhuǎn)移樣品也要仔細(xì),從中間慢慢吸,有時會有漂浮物,島津的質(zhì)譜好像做直接沉淀的源比較容易堵,Waters的好些。   2.樣品濃度:質(zhì)譜是靈敏度很高的儀器,進樣濃度一定不能太高,1-2ug/ml已經(jīng)可以啦,太高的濃度對儀器來說比較容易造成殘留,而且定量也會不準(zhǔn)啦。   3.流動相:流動相中盡量加易揮發(fā)的鹽,盡量不要加表面活性劑之類的,容易離子抑制,如果遇到離子抑制,可以試試把你的樣品峰往后推推或者改變提取方法,也可以試試用APCI源。如果你的液相是低壓混合的,盡量不要跑梯度,那樣很費時間,如果沒辦法,一針又要走很長時間的話,可以考慮切換,只測樣品出峰前后的那段時間,這樣可以保護質(zhì)譜。但是如果你用粗柱子,較高流速的也可以考慮跑梯度,如API4000,但要盡量減小死體積。   4.沖洗:沖柱子自然不用說了,低有機相和高有機相分別沖一定時間(各至少半個小時以上吧),柱子保存在高有機相中。做完試驗,沖源也是很重要的,也是低有機相和高有機相沖,但是時間可以不用那么長,你可以先沖源再沖柱子,或者兩者分開沖,個人覺得分開沖好些,這樣柱子上的臟東西就不會進到源里面去啦。

沖源的時候氣可以關(guān)小些。  

七、  1、樣品必須過0.22um濾膜過濾,不得有顆粒物;  2、上樣的溶劑,必須是色譜純,和你的流動相比例一致; 3、反相體系,不允許用正己烷之類極性弱的溶劑溶解樣品并上樣。 4、水,自然是純凈水了;  5、樣品不允許含有金屬離子、表面活性劑(不要用洗潔精洗瓶子)、磷酸鹽、硼酸鹽等不揮發(fā)鹽; 6、淋洗液緩沖溶劑必須用可揮發(fā)的,如乙酸、乙酸銨、氫氧化四丁基銨等,色譜純級別。 7、樣品pH5~7嚴(yán)禁含有無機或有機強酸強堿。  8、六通閥處變?nèi)?,把沒有信號的區(qū)域,切換到廢液,這樣減少源的污染 9、定期振氣、清洗離子源,換油。

 

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