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固相萃取常見問題總結(jié)

2018-8-23　閱讀(2342)

根據(jù)多年的實驗應(yīng)用經(jīng)驗，現(xiàn)將使用過程中常見問題及解決辦法整理在一起，方便大家輕松應(yīng)對固相萃取常見問題。以下是固相萃取操作中常見的問題：一、回收率低；二、萃取重現(xiàn)性差；三、凈化效果不理想；四、SPE柱流速過低。一、回收率低在一次完整的SPE操作中，目標(biāo)化合物可能會存在于樣品溶液流出液、淋洗液、洗脫液或吸附劑中，當(dāng)“目標(biāo)物沒有回收或回收率低" 現(xiàn)象發(fā)生時，可向樣品溶液加入標(biāo)液，然后進(jìn)行完整的SPE操作并將樣品流出液、淋洗液和洗脫液分別收集并分析，首先確定目標(biāo)化合物存在于哪一部分，進(jìn)而確定問題來自下列哪一環(huán)節(jié)：1、目標(biāo)化合物在吸附劑上保留不足；2、目標(biāo)化合物未被*洗脫；3、其他環(huán)節(jié)。1、目標(biāo)化合物在吸附劑上保留不足當(dāng)超過5%的目標(biāo)化合物出現(xiàn)在樣品流出液或淋洗液時即可斷定“目標(biāo)化合物在吸附劑上的保留不足"。2、目標(biāo)化合物未被*洗脫當(dāng)目標(biāo)化合物在樣品溶液流出液和淋洗液中未出現(xiàn)而洗脫液中僅有少量或未出現(xiàn)時，可判斷“目標(biāo)物未被*洗脫"。3、其他環(huán)節(jié)如果目標(biāo)化合物在洗脫液中正常出現(xiàn)，那么回收率不足的問題應(yīng)該來自樣品前處理的其他環(huán)節(jié)。二、萃取重現(xiàn)性差在使用固相萃取小柱進(jìn)行樣品前處理時，若出現(xiàn)萃取效果重現(xiàn)性差，可能的原因及改進(jìn)辦法如下：三、凈化效果不理想1、凈化模式的改進(jìn)通常而言采用保留目標(biāo)化合物的模式比保留雜質(zhì)的模式凈化效果好，如果正在分析的項目為某一種或某一類化合物分析，是采用保留目標(biāo)化合物的凈化模式；舉一個簡單的例子，同樣是分析蔬菜中的多菌靈和噻菌靈(一類堿性農(nóng)藥)，使用陽離子交換柱可以專一性地保留這些農(nóng)藥，使它們基本與干擾物*分離，而使用正相吸附劑或石墨化炭黑進(jìn)行保留干擾物的操作僅能把主要的干擾物除去，仍有較多干擾物存留。另外，如果不止一種SPE柱可用于目標(biāo)化合物的凈化時，應(yīng)挑選選擇性好的吸附劑；選擇性方面，離子交換＞正相＞反相。2、淋洗液和洗脫液的優(yōu)化對于反相模式和正相模式，應(yīng)在不影響回收率的前提下，增大淋洗液洗脫的強(qiáng)度并降低洗脫液的洗脫強(qiáng)度。對于反相模式，可將目標(biāo)化合物的水溶液上樣，然后依次用5%、10%、20%、30%、40%、50%、60%、70%、80%、90%、100%的甲醇水溶液洗脫，分別收集洗脫液分析，建立淋洗曲線，找出目標(biāo)化合物被洗脫時的溶劑體系，淋洗液中甲醇的含量應(yīng)稍低于目標(biāo)化合物恰好被洗脫時的溶劑體系，而洗脫液中甲醇的含量應(yīng)稍高于目標(biāo)化合物恰好被*洗脫時的溶劑體系；當(dāng)純甲醇不能洗脫目標(biāo)化合物時，應(yīng)試驗甲醇-甲基叔丁基醚混合溶液的洗脫曲線；對于某些既不溶于水也不溶于甲醇的離子型化合物，可以在溶劑體系中加入酸或堿。對于正相體系，可將目標(biāo)化合物的正己烷溶液上樣，然后依次用5%、10%、20%、30%、40%、50%、60%、70%、80%、90%、100%的正己烷甲基叔丁基醚溶液洗脫，分別收集洗脫液分析，建立淋洗曲線，找出目標(biāo)化合物被洗脫時的溶劑體系，淋洗液中甲基叔丁基醚的含量應(yīng)稍低于目標(biāo)化合物恰好被洗脫時的溶劑體系，而洗脫液中甲基叔丁基醚的含量應(yīng)稍高于目標(biāo)化合物恰好被*洗脫時的溶劑體系。3、對SPE柱進(jìn)行合理的處理SPE柱中的吸附劑可能存在少量干擾物，有效地活化可以避免這些干擾物進(jìn)入洗脫液，活化溶液應(yīng)選擇整個操作中洗脫強(qiáng)度的溶劑體系；在反相模式中，從樣品溶液到洗脫液主要涉及0%-100%甲醇水溶液，所以活化溶液應(yīng)選純甲醇，當(dāng)目標(biāo)化合物需要用甲醇-甲基叔丁基醚混合液洗脫時，活化溶液應(yīng)選甲基叔丁基醚；在正相模式中，從樣品溶液到洗脫液主要涉及0%-100%正己烷-甲基叔丁基醚溶液，所以活化溶液應(yīng)選純甲基叔丁基醚。四、SPE柱流速過低使用固相萃取小柱過程中，若出現(xiàn)SPE柱流速過低的情況，可能的原因及改進(jìn)辦法如下：

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