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上海聯(lián)碩生物科技有限公司
中級(jí)會(huì)員 | 第16年

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培養(yǎng)基體系主要成分及功能介紹

時(shí)間:2023/5/16閱讀:636
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1、 葡萄糖:用于細(xì)胞能量代謝。


2、CO?:細(xì)胞需要少量的二氧化碳來(lái)維持生長(zhǎng)。

在培養(yǎng)基中,溶解的CO?與碳酸氫鹽離子處于平衡狀態(tài),許多培養(yǎng)基利用了這種CO?/碳酸氫鹽反應(yīng)來(lái)緩沖培養(yǎng)基的pH值。CO?溶解在培養(yǎng)基中,與水反應(yīng)生成碳酸。隨著細(xì)胞代謝產(chǎn)生更多的CO?,隨著下面的化學(xué)反應(yīng)向右驅(qū)動(dòng),介質(zhì)的pH值下降,通過(guò)向培養(yǎng)基中添加碳酸氫鈉,可使pH值維持在7.2 ~ 7.4的最佳范圍。


3、酚紅:用于監(jiān)測(cè)培養(yǎng)基的pH值。

在細(xì)胞生長(zhǎng)過(guò)程中,由于細(xì)胞釋放的代謝物改變了pH值,培養(yǎng)基的顏色也隨之改變。在較低的pH值下,酚紅會(huì)變成中黃色,而在較高的pH值下,它會(huì)變成中紫色。對(duì)于大多數(shù)培養(yǎng)體系(pH為7.2 ~ 7.4),培養(yǎng)基應(yīng)為鮮紅色。(部分特殊培養(yǎng)基不添加酚紅,例如對(duì)雌激素敏感的乳腺組織細(xì)胞,酚紅會(huì)發(fā)揮跟類固醇相似的功能從而影響細(xì)胞。)


4、L-谷氨酰胺:

幾乎是所有哺乳動(dòng)物和昆蟲(chóng)細(xì)胞所必需的氨基酸,用于合成蛋白質(zhì),參與核酸代謝。它相比其他氨基酸更不穩(wěn)定,容易降解,降解的速率和程度與儲(chǔ)存溫度、時(shí)間和pH值有關(guān)。


5、非必需氨基酸NEAA

所有的培養(yǎng)基配方都含有10種必需氨基酸以及半胱氨酸、谷氨酰胺和酪氨酸。在一些培養(yǎng)基中還需要加入其他非必需氨基酸(丙氨酸、天冬酰胺、天冬氨酸、甘氨酸、谷氨酸、脯氨酸和絲氨酸)可以減少細(xì)胞的代謝負(fù)擔(dān),從而增加細(xì)胞增殖。


6、 丙酮酸鈉:

丙酮酸是糖酵解過(guò)程中的中間有機(jī)酸代謝物,可以輕易地進(jìn)出細(xì)胞,可以為合成代謝過(guò)程提供能量來(lái)源和碳骨架。大多數(shù)培養(yǎng)基中丙酮酸鈉的最終濃度為1mM,但在L-15培養(yǎng)基中增加到5mM,方便在無(wú)CO2環(huán)境中使用。

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