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當前位置:上海聯(lián)碩生物科技有限公司>>技術(shù)文章>>緩沖液配制操作流程
定義:
緩沖溶液指的是由弱酸及其鹽、弱堿及其鹽組成的混合溶液,能在一定程度上抵消、減輕外加強酸或強堿對溶液酸堿度的影響,從而保持溶液的pH值相對穩(wěn)定。
以常用的PBS磷酸緩沖溶液(不含鈣、鎂離子)為例,簡述配制流程
實驗材料:
NaCl Na2HPO4
KCl KH2PO4
Mili-Q水 HCl
電子天平 高溫高壓蒸汽滅菌鍋
巴氏吸管
方形試劑瓶
試劑配方:
NaCl 8.00g + Na2HPO4 1.15g + KH2PO4 0.20g + KCl 0.20g + 1L Mili-Q水
= 1 × PBS
實驗流程:
根據(jù)配制需求計算需要使用的試劑量,用電子天平分別稱取對應重量的試劑,在燒杯中混合,加入800 mL Mili-Q水,用玻璃棒或磁力攪拌器充分溶解。
待溶液澄澈透明無雜質(zhì),再加入200 mL Mili-Q水定容至1 L,用巴氏吸管吸取HCl調(diào)節(jié)緩沖液PH值在標準范圍內(nèi)。
將配制完成的PBS緩沖溶液移入高溫高壓蒸汽滅菌鍋內(nèi),121℃滅菌30min。
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