欧美……一区二区三区,欧美日韩亚洲另类视频,亚洲国产欧美日韩中字,日本一区二区三区dvd视频在线

上海聯(lián)碩生物科技有限公司
中級(jí)會(huì)員 | 第16年

13917838824

牛血清白蛋白在實(shí)驗(yàn)中的作用

時(shí)間:2024/2/18閱讀:388
分享:

牛血清白蛋白(BSA)在生化實(shí)驗(yàn)中有廣泛的應(yīng)用, 接下來為大家介紹其中兩種作用。
牛血清白蛋白測(cè)定蛋白濃度:
按50:1配置BCA工作液。10ulC液(蛋白標(biāo)準(zhǔn))+90ulPBS液稀釋成0.5mg/ml的蛋白標(biāo)準(zhǔn)液。
再分別以0、1、2、4、8、12、16、20ul將蛋白標(biāo)準(zhǔn)液加入96孔板的第1~8標(biāo)準(zhǔn)孔中,在其他樣品孔中加入10ul待測(cè)樣品。分別加PBS定容至20ul。各孔中加入200ulBCA工作液,室溫放置2小時(shí)。用酶標(biāo)儀測(cè)定蛋白濃度:測(cè)定A562,依標(biāo)準(zhǔn)曲線算出蛋白濃度。
牛血清白蛋白SDS-PAGE電泳
1、制膠:按比例配制分離膠,緩緩地?fù)u動(dòng)溶液,使激活劑混合均勻,將凝膠溶液平緩地注入兩層玻璃J中,再在液面上小心注入一層水,以阻止氧氣進(jìn)入凝膠溶液中,靜置40min。
同前按比例配制濃縮膠,但混勻溶液時(shí)不要過于劇烈以免引入過多地氧氣。
吸去不連續(xù)系統(tǒng)中下層分離膠上的水分,連續(xù)平穩(wěn)的注入凝膠溶液,然后小心插入梳子并注意不得在齒尖留有氣泡,靜制60min以上以保證聚合。
2、預(yù)電泳:將聚合好的凝膠安置于電泳槽中,小心拔去梳子,加入電泳緩沖液后低電壓10-20V的預(yù)電泳20-30min。
3、樣品準(zhǔn)備:首先計(jì)算上樣體積,然后按樣品上樣buffer=4:1的比例加入上樣bufer混勻,沸水10分鐘,冰上5分鐘。
4、加樣:預(yù)電泳后依次加入標(biāo)準(zhǔn)品(Marker)和待分析樣品。(加樣時(shí)間要盡量短,以免樣品擴(kuò)散,可在未加樣的孔中加入等量的樣品緩沖液避免邊緣效應(yīng)。)每個(gè)泳道加5ul 。
5、電泳:加樣完畢,選擇80V恒壓進(jìn)行電泳,電泳直至溴酚藍(lán)染料前沿到達(dá)兩膠交界處(約20分鐘),更換至100V恒壓電泳,電泳直至溴酚藍(lán)染料前沿下至凝膠末端處,即停止電泳(約1小時(shí)20分鐘)。

會(huì)員登錄

×

請(qǐng)輸入賬號(hào)

請(qǐng)輸入密碼

=

請(qǐng)輸驗(yàn)證碼

收藏該商鋪

X
該信息已收藏!
標(biāo)簽:
保存成功

(空格分隔,最多3個(gè),單個(gè)標(biāo)簽最多10個(gè)字符)

常用:

提示

X
您的留言已提交成功!我們將在第一時(shí)間回復(fù)您~
撥打電話
在線留言
岳普湖县| 滁州市| 汉寿县| 石台县| 宣武区| 政和县| 乌拉特中旗| 恩施市| 安远县| 陆河县| 青川县| 烟台市| 蒲城县| 怀化市| 林州市| 甘肃省| 临城县| 兰坪| 咸丰县| 富平县| 长春市| 宁都县| 神农架林区| 昭苏县| 疏勒县| 黄山市| 凤城市| 天长市| 建平县| 平昌县| 门源| 剑河县| 新源县| 怀安县| 惠州市| 轮台县| 英吉沙县| 都昌县| 武城县| 宁晋县| 当涂县|