透析是一個簡單的擴散過程,溶質(zhì)中小分子物質(zhì)從高濃度溶液通過半透性膜擴散到低濃度溶液中,直至滲透壓達到平衡。由于多孔膜的選擇性,使得溶質(zhì)中小分子物質(zhì)可以通過,而較大物質(zhì)則被截留,從而分離出不同大小分子量的物質(zhì),依據(jù)分子量大小截留,可用于分離工藝,改變或控制透析的條件,可在多種透析應用中得到預期效果,通過截留分子量(MWCO)可使目標分子得到分離。所以透析袋分子量的選擇就決定了實驗的成敗。這篇文章就詳細介紹了如何選擇合適的透析袋。
透析膜的材質(zhì)
透析膜可用動物膜和玻璃紙等,但用的多的還是用纖維素制成的透析膜,主要有再生纖維素(RC)、纖維素酯(CE)、聚偏二氟乙烯(PVDF)。但隨著生物技術(shù)發(fā)展,對透析袋處理樣品更多更嚴格的要求,根據(jù)生產(chǎn)工藝有可以分為標準膜和生物技術(shù)級膜。
生物技術(shù)纖維素酯(CE)膜
生物學惰性和超純的生物技術(shù)CE膜,用于帶電荷分子的分離及大分子純化。生物技術(shù)CE膜對條件及溶劑要求較高。一般而言,CE膜能夠抗弱的或稀的酸堿溶液和輕微乙醇,MWCO只有輕微改變。**直接與有機溶劑接觸會破壞CE膜。生物技術(shù)CE膜能在pH2-9與4-37℃下使用。即用透析裝置中也可使用CE膜。
生物技術(shù)再生纖維素(RC)膜
生物技術(shù)RC膜通過再生過程制得,物理抗性與化學相容性得到改良,具有與生物技術(shù)CE膜一樣高純度與均一的MWCO。RC膜能夠與高濃度的弱酸堿、低濃度的強酸堿、大多數(shù)醇類及一些溫和的或低濃度有機溶劑共用,**直接與強極性或有機溶劑接觸會破壞RC膜。生物技術(shù)RC膜能在pH2-12與4-60℃條件下使用。
生物技術(shù)聚偏二氟乙烯(PVDF)膜
疏水、惰性及無電抗性,生物技術(shù)PVDF膜是實驗室透析的革命性進步,能夠耐高溫(130℃)及溶劑條件。只有生物技術(shù)PVDF膜能夠經(jīng)受與大多數(shù)的酸堿(包括硝酸)和大多數(shù)的有機溶劑(包括DMF)直接接觸,PVDF膜還具有*的高溫高壓蒸汽滅菌的能力,可熱封進行樣品分裝。
透析膜的選擇
1. 選擇合適的分子截留量(MWCO):由于透析膜由海綿狀橫向耦合的聚合物材料構(gòu)成,截留性能間接的由孔徑等級即截留分子量(MWCO)表示,截留率90%的溶質(zhì)分子大小可更的表示膜的MWCO。然而,溶質(zhì)的滲透性亦取決于分子形狀、水合度、離子電荷與極性,推薦選擇膜的MWCO為欲截留物質(zhì)分子量的一半,兩倍于透過物質(zhì)的分子大小。
2. 選擇合適的形狀:根據(jù)需要,大限度的方便操作及樣品回收。
3. 選擇合適的膜:成功進行透析分離的關鍵是在適當?shù)臈l件下選用合適的膜。選擇時可參照下列:
根據(jù)目的選擇等級(生物技術(shù)或標準);
根據(jù)溶液的化學特性選擇膜材質(zhì)(CE、RC或PVDF);
根據(jù)使用方法選擇產(chǎn)品類型(管狀、一次性或片狀);
根據(jù)溶質(zhì)分子量在不同種MWCO中選擇;
根據(jù)目的選擇膜預處理方式;
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