硝酸纖維素膜又稱為NC膜,在膠體金試紙中用做C/T線的承載體,同時也是免疫反應的發(fā)生處。所以NC膜成為該試驗中最重要的耗材。
我們大致了解后,回到最關心的問題,如何選擇膜?經(jīng)常會遇到的問題是,我是做某某項目的,我該選擇那類膜?
這里涉及到一個膜的分類標準問題,一個供應商可能提供這個膜是8um,但另一個供應商告訴你膜是135s的.這之間的區(qū)別與聯(lián)系是什么?
um指的是膜孔徑,而從上面膜的生產(chǎn)過程,我們可以看出,膜的孔徑實際上是沒有辦法界定的.由于干燥成型等過程的非絕對均一,膜的孔徑也是非均一的。
膜孔徑的說法實際上是沿用了一直以來的一個形象稱呼.而以秒為單位的定義為,每4cm膜,水的層析時間是s.該單位已經(jīng)越來越被各大廠商所接受,成為了一個通用的比較標準.以下我們將采用s單位來進行交流。
換算情況大致為:8um=135s;6um=180s.
不同秒數(shù)的膜對反應有什么影響呢?
首先,我們分析一下液體在膜上的運動過程.一張長度為4cm的膜,每隔1cm做一個標記,當液體運動過標記處時記錄時間點.那么你將會發(fā)現(xiàn)液體在膜上的運動是呈減速前行的。
而兩張不同秒數(shù)的膜(例如135s,180s)在同一時間標記點處的運動速度不同.這個試驗用清水做不好觀察,可以考慮用色素水溶液,非常明顯.
那么從這個試驗可以看出,在通過同一T線噴點位置時,金溶液通過的速度是快速膜>慢速膜.那么通過速度越快和包被在T線的物質反應時間也就越短,讀數(shù)快,那么靈敏度也就越低。
反之,反應時間長,讀數(shù)慢,也就靈敏度高.同時還有一個問題是,反應時間越長,發(fā)生非特異性結合的可能性就越大,所以過長時間的反應不一定就能夠真正的提升靈敏度.所以這里就有一個讀數(shù)時間/反應靈敏度/非特異性結合的均衡。
其實我們并沒有那么多選擇.經(jīng)過使用實踐,各供應商一般都只提供兩個型號,就是135s和180s.雖然看到有些廠家的產(chǎn)品目錄上型號種類繁多,但這兩個型號的定貨量就占了95%以上,其他型號供貨上也就遠不如這兩個型號來得順利。
135s一般用在雙抗體夾心法,180s一般用在競爭法。你所要做的是,先選擇其中的一個型號,然后比較不同供應商同一個型號的差異,由于前面說的添加配方與你的試驗條件配合的不同,這個差異可能大也可能小。具體要根據(jù)試驗結果來確定最后的選擇。
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