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為解決操作酶標(biāo)儀時(shí)遇到的一些困惑解析

閱讀:2761      發(fā)布時(shí)間:2022-7-20
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作為微孔板比色計(jì)的酶標(biāo)儀,其基本功能不外乎一個(gè)比色測(cè)定,所不同的是在測(cè)定波長(zhǎng)范圍、吸光度范圍、檢測(cè)速度、震板功能、溫育功能、定性和定量測(cè)定軟件功能等方面的差異。
 
1.測(cè)定波長(zhǎng)范圍
酶標(biāo)儀有單波長(zhǎng)和雙波長(zhǎng)檢測(cè)功能有時(shí)使用者不知在什么情況下使用單或雙波長(zhǎng)檢測(cè)。所謂的“單波長(zhǎng)”就是使用一種對(duì)顯色具最大吸收的波長(zhǎng)即450 nm或492 nm進(jìn)行比色測(cè)定;而“雙波長(zhǎng)”則除了用對(duì)顯色具最大吸收的波長(zhǎng)即450 nm或492 nm進(jìn)行比色測(cè)定外,同時(shí)用對(duì)特異顯色不敏感的波長(zhǎng)如630 nm進(jìn)行測(cè)定,酶標(biāo)儀最后打印出來(lái)的吸光度則為二者之差。630 nm波長(zhǎng)下得到的吸光度是非特異的,來(lái)自于板孔上諸如指紋、灰塵、臟物等所致的吸收。因此,在ELISA比色測(cè)定中,最好使用雙波長(zhǎng),且不必設(shè)空白孔。
 
2.吸光度范圍
對(duì)于酶標(biāo)儀的吸光度范圍不僅要追求大的吸光度范圍,更重要要看在一定的吸光度范圍內(nèi)的線性和精密度如何。
 
3.檢測(cè)速度
酶標(biāo)儀的檢測(cè)速度是指其完成比色測(cè)定所需要的時(shí)間。檢測(cè)速度快,有利于提高檢測(cè)的精密度,即避免由于測(cè)定過(guò)程中,因測(cè)定時(shí)間不同所致的各微孔間吸光度間的差異。
 
4.震板功能
酶標(biāo)儀的震板功能是指酶標(biāo)儀在對(duì)ELISA板孔進(jìn)行比色測(cè)定前對(duì)其進(jìn)行振蕩混勻,使板孔內(nèi)顏色均一。目前市場(chǎng)上常見(jiàn)的酶標(biāo)儀均有震板功能,一般均為固定的震板方式。使用有震板功能的酶標(biāo)儀,在進(jìn)行ELISA測(cè)定顯色反應(yīng)完成加入終止劑后,可不必振蕩混勻,直接放人酶標(biāo)儀上測(cè)定即可。
 
5.溫育功能
溫育功能是指酶標(biāo)儀本身能按要求自動(dòng)精確地控制儀器內(nèi)部的溫度,使得ELISA測(cè)定中微孔板條的溫育過(guò)程可在儀器內(nèi)部完成,而無(wú)需再外配溫箱。溫育功能只是酶標(biāo)儀的一個(gè)附加功能,是否具有并不能說(shuō)明酶標(biāo)儀檔次的高低及儀器的優(yōu)劣。作為實(shí)驗(yàn)室是否選擇,則可根據(jù)自己實(shí)驗(yàn)室的條件及需要來(lái)決定。
 
6.軟件功能
軟件功能是指酶標(biāo)儀所具有的對(duì)ELISA定性和定量測(cè)定及其他測(cè)定方式如酶標(biāo)動(dòng)力學(xué)、紫外和凝集等數(shù)據(jù)的統(tǒng)計(jì)分析并報(bào)告結(jié)果的功能。軟件功能是中高檔酶標(biāo)儀的一個(gè)非常重要的功能。如果硬件方面區(qū)別不大,則軟件就成為判定酶標(biāo)儀優(yōu)劣的惟一指標(biāo)。對(duì)于用戶來(lái)說(shuō),好的軟件功能,對(duì)實(shí)際工作會(huì)有較大的幫助。

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