異硫氰酸胍/苯酚法
異硫氰酸胍/苯酚法是一種傳統(tǒng)的RNA提取方法,適用于大部分動
植物材料,但對于次生代謝產(chǎn)物較多的植物材料提取RNA效果較
差。異硫氰酸胍能使核蛋白復(fù)合體解離,并將RNA釋放到溶液中,
采用酸性酚/氯仿混合液抽提,低pH值的酚將使RNA進入水相,而
蛋白質(zhì)和DNA仍留在有機相,從而可以完成RNA的提取工作。
Solarbio公司的Trizol和總RNA提取試劑盒就是基于異硫氰酸胍/苯酚
法開發(fā)的一種總RNA提取試劑和試劑盒。Trizol法應(yīng)用非常廣泛,
適用于包括動物組織、微生物材料、培養(yǎng)細胞等在內(nèi)的各類動物性
材料,同時還適用于次生代謝物較少的植物性材料,如幼苗、幼葉
等。而總RNA提取試劑盒法主要應(yīng)用在動物組織和培養(yǎng)細胞的RNA
提取中,這種方法采用吸附性材料來純化RNA,因此與Trizol法相
比,總RNA提取試劑盒提取RNA具有純度更高的特點。
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