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產(chǎn)品說明

 隨機(jī)突變是闡述蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)和功能之間的關(guān)系、改進(jìn)蛋白質(zhì)性能的重要工具。隨機(jī)突變試劑盒基于易錯 PCR（error-prone PCR）技術(shù)，利用 Taq DNA polymerase 不具有 3′→5′校對功能的特性，在特定的反應(yīng)緩沖體系中，向擴(kuò)增的目的基因中引入隨機(jī)突變密碼子。帶有隨機(jī)突變的擴(kuò)增產(chǎn)物通過雙酶切，連接到表達(dá)載體中構(gòu)建文庫，然后轉(zhuǎn)化入表達(dá)宿主中，進(jìn)行蛋白活性篩選。如果經(jīng)一次突變反應(yīng)不能獲得滿意的結(jié)果，可采用連續(xù)易錯 PCR（sequential error-prone PCR）策略，即將一次PCR 擴(kuò)增得到的有用突變基因作為下一次 PCR 擴(kuò)增的模板，連續(xù)反復(fù)地進(jìn)行隨機(jī)誘變，使每一次獲得的突變累積而產(chǎn)生更有意義的突變。 本試劑盒包含有優(yōu)化的 2 x Mut Random System、MutEnhancer 和 ddH2O 三種組分，使用時只需加入適量的 DNA 板和合成的兩條擴(kuò)增引物，并用水補(bǔ)足體積，即可進(jìn)行擴(kuò)增反應(yīng)，操作簡便快速，大大減少了多次加樣可能造成的出錯和污染機(jī)會。2 x MutRandom System 含有優(yōu)化濃度的 Taq DNA polymerase、dNTPs、反應(yīng)緩沖液和穩(wěn)定劑，可最大限度地克服常規(guī)易錯 PCR 技術(shù)中，由于 Taq DNA polymerase 本身的偏愛性造成的以 GC 突變?yōu)橹鞯娜秉c(diǎn)，獲得相對均衡的突變譜。堿基突變率可通過適量添加 Mut Enhancer、調(diào)整模板 DNA 量和改變PCR 擴(kuò)增循環(huán)數(shù)進(jìn)行控制。