目錄:上海索寶生物科技有限公司>>生化試劑>>實驗室自產(chǎn)產(chǎn)品>> SM0020-50T線粒體提取試劑盒
供貨周期 | 現(xiàn)貨 | 應(yīng)用領(lǐng)域 | 環(huán)保,化工,生物產(chǎn)業(yè),農(nóng)業(yè),綜合 |
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產(chǎn)品簡介
英文名稱 | mitochondrial extraction kit |
儲存條件 | 四周內(nèi)使用可4℃儲存,長期保存請置于-20℃。冰袋運輸 |
規(guī)格 | 50T 100T |
單位 | 盒 |
產(chǎn)品簡介:
線粒體提取試劑盒用于從動物細(xì)胞或組織中分離出完整而純化的線粒體。適合于動物軟組織(肝或腦組織)和硬組織(肌肉)以及培養(yǎng)細(xì)胞的線粒體的制備。其制備物產(chǎn)量高,可以被用于細(xì)胞凋亡、信號傳遞、代謝和蛋白組學(xué)等的研究。
操作步驟:
1. 樣本處理 a. 組織勻漿:稱取100~200 mg新鮮組織如肝臟、腦、心肌等,PBS或生理鹽水沖洗,洗凈血水,濾紙吸干,用剪刀剪為碎塊放入小容量玻璃勻漿器內(nèi)。加入1.0 mL冰預(yù)冷的Lysis Buffer,0℃冰浴上下研磨組織20次; b. 培養(yǎng)細(xì)胞勻漿:消化細(xì)胞,PBS洗滌,800g離心5~10 min收集細(xì)胞,計數(shù)。每次提取需要5×107個細(xì)胞,加入1.0 mL冰預(yù)冷的Lysis Buffer重懸細(xì)胞,將細(xì)胞懸液轉(zhuǎn)移到小容量玻璃勻漿器內(nèi),0℃冰浴研磨30~40次。
2. 將組織或細(xì)胞勻漿物轉(zhuǎn)移到離心管,4℃,1000g 離心5 min。
3. 取上清,轉(zhuǎn)移至新的離心管中,4℃,1000g再次離心5 min。
4. 取上清,轉(zhuǎn)移至新的離心管中,4℃, 12,000 g 離心10 min。離心后的上清含胞漿成分,可從中提取胞漿蛋白。將上清轉(zhuǎn)移到新離心管,線粒體沉淀在管底。
5. 往線粒體沉淀中加入0.5 mL Wash Buffer重懸線粒體沉淀,4℃,1000 g 離心5 min。
6. 取上清,轉(zhuǎn)移至新的離心管中,4℃, 12,000 g 離心10 min。棄上清,高純度的線粒體沉淀在管底。
7. 用50 -100μL Store Buffer 或合適的反應(yīng)緩沖液重懸線粒體沉淀,立即使用或-70℃保存。
注意事項:
1. 為保證獲得完整的線粒體,務(wù)必做到:第一,全程低溫操作;第二,快速;第三,在不破壞亞細(xì)胞器的情況下破碎細(xì)胞,這是制備線粒體的最關(guān)鍵環(huán)節(jié)。與組織塊相比,培養(yǎng)細(xì)胞特別是貼壁培養(yǎng)細(xì)胞在用玻璃勻漿器勻漿時較難破壁,因而要選用小容量玻璃勻漿器、間隙嚴(yán)密的研杵上下研磨培養(yǎng)細(xì)胞。
2. 以離心力g計算正確的離心速度,不同的離心機可據(jù)此精確計算離心速度。3. 進(jìn)行Western Blot和2D-膠電泳,可直接加入上樣緩沖液裂解線粒體。 轉(zhuǎn)速與離心力換算: G=1.11×(10-5)×R×[rpm]2 G為離心力,一般以g(重力加速度)的倍數(shù)來表示; [rpm]2即:轉(zhuǎn)速的平方; R為半徑,單位為厘米。
備注:以上數(shù)據(jù)均來自公開文獻(xiàn), Solarbio暫未進(jìn)行獨立驗證, 僅供參考。These protocols are for reference only. Solarbio does not independently validate these methods.
公司簡介
上海索萊寶生物科技有限公司是一家集銷售生化試劑、實驗耗材、自產(chǎn)分子生物學(xué)產(chǎn)品為一體,并能提供的專業(yè)性生物科技公司。公司秉承“以客戶為中心,以產(chǎn)品為保障、以誠信為基礎(chǔ)、以創(chuàng)新為宗旨"的發(fā)展理念,在依靠客戶的大力支持和員工的不懈努力下獲得了快速的成長。公司織結(jié)構(gòu)清晰,內(nèi)部管理科學(xué),擁有一支既分工細(xì)致又高度合作的年輕化隊伍,保持了各個部門之間的高效合作運轉(zhuǎn),充分保障了公司在充滿競爭的市場中處于地位。公司注重與*合作,目前已與 Amersham、Amresco、Axygen、BD、Corning、Dragon、Eppendorf等企業(yè)結(jié)成緊密的合作伙伴關(guān)系,代理其世界的*產(chǎn)品,并在全國各地設(shè)有分銷機構(gòu)。我們將以高度的責(zé)任感和出色的產(chǎn)品質(zhì)量為客戶提供高品質(zhì)的產(chǎn)品和實驗技術(shù)解決方案。豐富的經(jīng)驗、優(yōu)良的品質(zhì)、充足的庫存、準(zhǔn)確的交貨時間、競爭力的價格,所有這些都保證了我們向您提供的是專業(yè)的服務(wù)!立足北京,上海,*,隨著產(chǎn)品營銷戰(zhàn)略的不斷延伸,我們將逐步發(fā)展成為*的專業(yè)性生物科技公司。我們希望能夠和尊敬的客戶一起,利用各自的資源優(yōu)勢和勇于進(jìn)取的敬業(yè)精神,為中國生命科學(xué)研究的發(fā)展作出更多的貢獻(xiàn)。為了更好、更全面的發(fā)展,現(xiàn)公司正在誠招各地代商和招聘若干銷售、研發(fā)人員,歡迎垂詢并期待您的加入!
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