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迷你梯度PCR儀的性能對于研究結(jié)果有著至關(guān)重要的作用

閱讀:737      發(fā)布時(shí)間:2022-9-2
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  迷你梯度PCR儀的性能對于您和您的研究具有至關(guān)重要的作用。溫度、變溫速率和保持時(shí)間是影響PCR反應(yīng)成功的關(guān)鍵參數(shù)。高性能PCR儀必須能夠準(zhǔn)確控制液體(反應(yīng))溫度和保持時(shí)間,不受反應(yīng)體積的影響。PCR儀對溫度和保持時(shí)間的控制在PCR優(yōu)化實(shí)驗(yàn)中具有更重要的作用。PCR儀必須在正常PCR和PCR優(yōu)化運(yùn)行過程中提供相同的性能。梯度溫度控制是幫助用戶進(jìn)行PCR優(yōu)化實(shí)驗(yàn)的特性之一,以便確定PCR實(shí)驗(yàn)方案的溫度和保持時(shí)間,盡量減少實(shí)驗(yàn)次數(shù)。在理論上,真正的梯度應(yīng)在均勻的金屬加熱模塊上顯示線性溫度斜率。
 
  迷你梯度PCR儀實(shí)驗(yàn)操作注意事項(xiàng):
 
  1.戴一次性手套,若不小心濺上反應(yīng)液,立即更換手套;
 
  2.使用一次性吸頭,嚴(yán)禁與PCR產(chǎn)物分析室的吸頭混用,吸頭不要長時(shí)間暴露于空氣中,避免氣溶膠的污染;
 
  3.避免反應(yīng)液飛濺,打開反應(yīng)管時(shí)為避免此種情況,開蓋前稍離心收集液體于管底。若不小心濺到手套或桌面上,應(yīng)立刻更換手套并用稀酸擦拭桌面;
 
  4.操作多份樣品時(shí),制備反應(yīng)混合液,先將dNTP、緩沖液、引物和酶混合好,然后分裝,這樣即可以減少操作,避免污染,又可以增加反應(yīng)的準(zhǔn)確度;
 
  5.加入反應(yīng)模板,加入后蓋緊反應(yīng)管;
 
  6.操作時(shí)設(shè)立陰陽性對照和空白對照,即可驗(yàn)證PCR反應(yīng)的可靠性,又可以協(xié)助判斷擴(kuò)增系統(tǒng)的可信性;
 
  7.盡可能用可替換或可高壓處理的加樣器,由于加樣器容易受產(chǎn)物氣溶膠或標(biāo)本DNA的污染,建議使用可替換或高壓處理的加樣器。如沒有這種特殊的加樣器,至少PCR操作過程中加樣器應(yīng)該專用,不能交叉使用,尤其是PCR產(chǎn)物分析所用加樣器不能拿到其它兩個(gè)區(qū);
 
  8.重復(fù)實(shí)驗(yàn),驗(yàn)證結(jié)果,慎下結(jié)論。

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