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堿性固綠染色液的使用步驟

閱讀:2376      發(fā)布時(shí)間:2021-8-31
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  不同的氨基酸帶有不同化學(xué)性質(zhì)的側(cè)鏈基團(tuán),有的帶有堿性側(cè)鏈,有的帶有酸性側(cè)鏈,由此組成的蛋白質(zhì)具有不同數(shù)目的堿性基團(tuán)和酸性基團(tuán),這些基團(tuán)會(huì)使蛋白質(zhì)在不同的pH溶液中帶有不同的凈電荷,整個(gè)蛋白質(zhì)分子帶正電荷多,即為堿性蛋白。堿性固綠染色液是利用堿性蛋白質(zhì)與帶有負(fù)電荷的堿性染料固綠結(jié)合進(jìn)行染色,細(xì)胞中含量最為豐富的堿性蛋白為組蛋白,主要存在于細(xì)胞核中,因此染色后細(xì)胞核大部分被染成綠色。

  使用步驟:

  1.取新鮮血液1滴滴于載玻片一端,推片,室溫晾干。

  2.涂片浸入70%乙醇中固定5min,室溫晾干。

  3.涂片浸入酸性分化液中,60℃水浴30min。

  4.流水充分水洗,濾紙吸去殘留水分。

  5.涂片浸入堿性固綠染色液染色15min。

  6.流水沖洗,室溫晾干。

  7.直接鏡檢或滴加1滴中性樹(shù)膠,加蓋蓋玻片進(jìn)行封片觀(guān)察。

  堿性固綠染色液的注意事項(xiàng):

  1、血液涂片或骨髓涂片應(yīng)厚薄均勻,以免影響染色效果。

  2、血細(xì)胞涂片染色要求新鮮全血或EDTA抗凝血。

  3、酸性分化液孵育后,沖洗應(yīng)*,否則會(huì)干擾固綠的染色。

  4、染色過(guò)深可用或酒精適當(dāng)脫色,不復(fù)染。

  5、pH值對(duì)染色有一定影響,載玻片應(yīng)清潔、無(wú)酸堿污染,以免影響染色效果。

  6、固定液應(yīng)定期更換,以免固定不充分導(dǎo)致著色不佳。

  7、染色液應(yīng)定期更換,以免影響染色效果。

  8、為了您的安全和健康,請(qǐng)穿實(shí)驗(yàn)服并戴一次性手套操作。

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