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Western blotting試劑膜再生液
貨號:SW3020
規(guī)格 :100 ml / 500 ml
保存 :室溫保存,一年有效。
產(chǎn)品簡介 :
使用膜再生液可以對同一張膜進(jìn)行多次 Western Blot 檢測。在室溫條件下,將用過的膜浸泡在膜再生液10-60 分鐘,可在不影響抗原蛋白的情況下清除膜上結(jié)合的抗體。隨后,可以使用不同的抗體進(jìn)行下一輪Western Blot 實驗。適宜從少量樣品多次檢測不同蛋白質(zhì)。即使樣品量并不匱乏,采用這一策略多次檢測同一張膜上的蛋白,能省去給藥處理、蛋白電泳和膜轉(zhuǎn)移等耗費性步驟。而且可以消除重新上樣而帶來的誤差,使可比性更強(qiáng)。
Western Blot 膜再生液特點是:無毒無味無害,室溫下使用,室溫下保存;可對同一張膜進(jìn)行 5 次以上的Western Blot 檢測。
適用:清除硝酸纖維素膜或 PVDF 膜上結(jié)合的抗體,不影響抗原蛋白。
經(jīng)過PAGE分離的蛋白質(zhì)樣品,轉(zhuǎn)移到固相載體(例如硝酸纖維素薄膜)上,固相載體以非共價鍵形式吸附蛋白質(zhì),且能保持電泳分離的多肽類型及其生物學(xué)活性不變。以固相載體上的蛋白質(zhì)或多肽作為抗原,與對應(yīng)的抗體起免疫反應(yīng),再與酶或同位素標(biāo)記的第二抗體起反應(yīng),經(jīng)過底物顯色或放射自顯影以檢測電泳分離的特異性目的基因表達(dá)的蛋白成分。該技術(shù)也廣泛應(yīng)用于檢測蛋白水平的表達(dá)。Western blotting 檢測系統(tǒng)除需要過氧化物酶標(biāo)記的各種二抗外,還需要配套的顯色試劑。索萊寶提供DAB顯色和ECL化學(xué)發(fā)光兩種試劑及相應(yīng)試劑盒。
使用方法 :
1. 將膜充分浸泡于適當(dāng)體積的再生液中,室溫洗脫 10-20 分鐘,時間長短應(yīng)該參考注意事項進(jìn)行優(yōu)化,洗脫某些抗體需較長時間,更有長達(dá) 60 分鐘之久。
2. 取出膜,用洗滌液(如 TBST 等)漂洗兩次。
3. 此時膜上抗體已除去,可重新封閉后再加入另一種抗體進(jìn)行檢測。
注意事項 :
1. 膜再生液實質(zhì)是在不影響膜上結(jié)合的抗原的條件下將抗體洗脫下來, 實際操作中, 膜類型、 抗體類型、濃度及抗原特性都影響洗脫難易度。
2. 適用于 ECL 和類似的化學(xué)發(fā)光試劑進(jìn)行的 Western 檢測。不適用于非化學(xué)發(fā)光試劑進(jìn)行的 Western檢測,例如 DAB,NBT/BCIP。
3. 用 ECL 顯色后,再生液洗脫幾分鐘后,可再次加入 ECL 顯色液顯影,如膠片上顯示條帶,表明抗體未除凈,須進(jìn)一步在再生液中浸泡,膠片上無顯色。
4. 使用脫脂奶粉封閉的膜要比使用 BSA 封閉的膜更容易再生。
5. 盡量避免讓膜干燥。
相關(guān)產(chǎn)品 :
PR1800 Western blotting 蛋白 MARKER
PE0010 ECL Plus 熒光檢測試劑 (ECL 超敏發(fā)光液 )
A1010 30% 丙烯酰胺 (29:1)
P1015 4× 蛋白上樣緩沖液(含 DTT )
T1080 20×TBS
Western blotting試劑膜再生液訂購說明:
1、絕大部分產(chǎn)品備有現(xiàn)貨,一般情況下都能訂貨當(dāng)日發(fā)貨。
2、部分非常用產(chǎn)品,需提前1-2日預(yù)訂,海外期貨則需要提前3-6周預(yù)訂。
3、部分產(chǎn)品價格會因貨期、批次等因素發(fā)生變化,若有變動以訂貨當(dāng)日新價格為準(zhǔn)。
4、每日訂單截止時間為16點整,部分城市可到17點整,因超過截止時間造成當(dāng)日不能發(fā)貨的將于次日安排發(fā)貨。
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運輸說明:
1、極低溫產(chǎn)品:極低溫產(chǎn)品運輸過程中加裝干冰運輸。用干冰把產(chǎn)品包裹起來,再用泡沫盒密封,膠帶層層粘住泡沫盒,放入索萊寶的箱子,然后交付給合作快遞,安全快速高效放心的送客戶的手中,保證產(chǎn)品的性質(zhì)穩(wěn)定如一,為您的實驗保駕護(hù)航。
2、低溫產(chǎn)品:低溫產(chǎn)品運輸過程中加裝索萊寶冰袋運輸。事先用冰袋把產(chǎn)品包裹起來,再使用泡沫盒密封,用膠帶嚴(yán)實密封泡沫盒,再放入索萊寶的箱子(保溫效果少可以持續(xù)一周),然后交付給合作快遞,安全快速高效放心的送客戶的手中,保證產(chǎn)品的性質(zhì)穩(wěn)定如一,為您的實驗保駕護(hù)航。
3、常溫產(chǎn)品:常溫產(chǎn)品運輸過程中無需加冰或者特殊包裝。產(chǎn)品由公司庫房人員快速配貨,準(zhǔn)確快速高效的快遞保證產(chǎn)品快速送達(dá)您的手中。
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