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目錄:北京索萊寶科技有限公司>>生化檢測試劑盒-微量法>>微量法生化試劑盒>> BC5875-100T/96S葡萄糖含量檢測試劑盒 微量法

葡萄糖含量檢測試劑盒 微量法
  • 葡萄糖含量檢測試劑盒 微量法
參考價 面議
具體成交價以合同協(xié)議為準(zhǔn)
參考價 面議
具體成交價以合同協(xié)議為準(zhǔn)
  • 品牌 SOLARBIO/索萊寶
  • 型號 BC5875-100T/96S
  • 廠商性質(zhì) 生產(chǎn)商
  • 產(chǎn)品資料 查看pdf文檔
  • 所在地 北京市
屬性

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更新時間:2024-04-23 17:04:59瀏覽次數(shù):1688評價

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CAS 詳詢 純度 詳詢
分子量 詳詢 分子式 詳詢
供貨周期 現(xiàn)貨 規(guī)格 100T/96S
貨號 BC5875 應(yīng)用領(lǐng)域 環(huán)保,化工,生物產(chǎn)業(yè),農(nóng)業(yè),綜合
主要用途 葡萄糖含量檢測
有效期
6個月
儲存條件
2-8℃
中文名稱
葡萄糖含量檢測試劑盒 微量法
單位

英文名稱
Glucose Content Assay kit (o-Toluidine Colorimetry)
檢測方法
微量法
規(guī)格
100T/96S

葡萄糖含量檢測試劑盒(鄰甲苯胺顯色法)說明書

微量法

貨號:BC5875

規(guī)格:100T/96S

產(chǎn)品組成:使用前請認(rèn)真核對試劑體積與瓶內(nèi)體積是否一致,有疑問請及時聯(lián)系索萊寶工作人員。

試劑名稱

規(guī)格

保存條件

提取液

液體110 mL×1

2-8℃保存

試劑一

液體2.4 mL×1

2-8℃保存

試劑二

液體5 mL×1

2-8℃保存

標(biāo)準(zhǔn)品

粉劑×1

2-8℃保存

溶液的配制:

1、 試劑一:取3.6mL試劑二、18mL冰乙酸加入試劑一混合,最后工作液為均一澄清液體。溶解好的試劑-20℃分裝避光可以保存8周。(注:若先將試劑一、試劑二混合,則溶液為無機相和水相的液體混合物,加入冰乙酸混勻后溶液會變均一澄清)

2、 標(biāo)準(zhǔn)品:臨用前加入1 mL 蒸餾水充分溶解,制備 10 mg/mL 葡萄糖標(biāo)準(zhǔn)溶液待用;用不完的試劑2-8℃保存4周。臨用前取30μL10mg/mL葡萄糖標(biāo)準(zhǔn)溶液,加入930μL蒸餾水,配制成0.3125mg/mL葡萄糖標(biāo)準(zhǔn)溶液。

產(chǎn)品說明:

葡萄糖不僅是細(xì)胞能量代謝的主要底物,而且其代謝中間產(chǎn)物是生物合成的重要底物。植物可通過光合作用產(chǎn)生葡萄糖。就哺乳動物而言,葡萄糖不僅是大腦神經(jīng)系統(tǒng)、肌肉、脂肪組織等的唯*能源,而且與還原性輔酶、乳糖和乳脂的合成密切相關(guān)。

葡萄糖與鄰甲苯胺在強酸溶液中加熱,葡萄糖的醛基與鄰甲苯胺縮合成葡萄糖基胺,后者脫水生成席夫(Schiff)堿,呈現(xiàn)藍(lán)綠色,在630nm處有吸收峰。該試劑盒適合測定動物組織、血清(漿)及細(xì)胞(細(xì)菌)樣本。


注意:實驗之前建議選擇2-3個預(yù)期差異大的樣本做預(yù)實驗。如果樣本吸光值不在測量范圍內(nèi)建議稀釋或者增加樣本量進行檢測。

需自備的儀器和用品:

可見分光光度計/酶標(biāo)儀、低溫離心機、分析天平、微量玻璃比色皿/96孔板、研缽/勻漿器/細(xì)胞超聲破碎儀、可調(diào)式移液槍、冰乙酸(98% AR)、5%三氯*酸(根據(jù)注意事項確定是否需要自備)、異丙醇(根據(jù)注意事項確定是否需要自備)、冰和蒸餾水。

操作步驟:

一、樣本處理(可適當(dāng)調(diào)整待測樣本量,具體比例可以參考文獻(xiàn))

1. 血清(漿)等液體樣本:直接測定。若液體有渾濁則離心取上清測定。

2. 動物組織:按照組織質(zhì)量(g):提取液體積(mL)15~10的比例(建議稱取約0.1g組織,加入1mL提取液),進行冰浴勻漿。10000g 4℃離心10min,取上清,置冰上待測。

 

3. 細(xì)胞/細(xì)菌:先收集細(xì)菌或細(xì)胞到離心管內(nèi),離心后棄上清;按照細(xì)胞數(shù)量(104個):提取液體積(mL)為500~10001的比例(建議500萬細(xì)胞加入1mL提取液),超聲波破碎細(xì)胞(冰浴,功率200W,超聲3s,間隔10s,重復(fù)30次);10000g 4℃離心10min,取上清,置冰上待測。

二、測定步驟

1.可見分光光度計/酶標(biāo)儀預(yù)熱30min以上,調(diào)節(jié)波長至630nm,可見分光光度計蒸餾水調(diào)零。

2.操作表:(在1.5mL EP管中加入下列試劑)

試劑名稱(μL

測定管

標(biāo)準(zhǔn)管

空白管

樣本

50

-

-

標(biāo)準(zhǔn)品

-

50

-

蒸餾水

-

-

50

試劑一

200

200

200

渦旋混勻,100℃煮沸15min(蓋緊,以防止水分散失),冷卻至室溫后,取200μL 96孔板中測定630nm處測吸光值,分別記為A測定、A標(biāo)準(zhǔn)、A空白。計算ΔA測定=A測定-A空白,ΔA標(biāo)準(zhǔn)=A標(biāo)準(zhǔn)-A 空白。標(biāo)準(zhǔn)管和空白管只需測 1-2 次。

三、葡萄糖含量計算

1. 按樣本質(zhì)量計算

葡萄糖含量(mg/mL= ΔA測定×C標(biāo)÷ΔA標(biāo)準(zhǔn))×V÷W = 0.3125×ΔA測定÷ΔA標(biāo)準(zhǔn)÷W

2. 按樣本蛋白濃度計算

葡萄糖含量(mg/mg prot= ΔA測定×C標(biāo)÷ΔA標(biāo)準(zhǔn))×V÷(V×Cpr) =0.3125×ΔA測定÷ΔA標(biāo)準(zhǔn)÷Cpr

3. 按液體體積計算

葡萄糖含量(mg/mL= ΔA測定×C標(biāo)÷ΔA標(biāo)準(zhǔn))×V÷V= 0.3125×ΔA測定÷ΔA標(biāo)準(zhǔn)

4. 按細(xì)胞數(shù)量計算

葡萄糖含量(mg/104 cell= ΔA測定×C標(biāo)÷ΔA標(biāo)準(zhǔn))×V÷N= 0.3125×ΔA測定÷ΔA標(biāo)準(zhǔn)÷N

C標(biāo):標(biāo)準(zhǔn)管濃度,0.3125mg/mL;V提:前處理提取液體積,1mL;V樣:加入樣本體積,0.05mL; Cpr:樣本蛋白質(zhì)濃度,mg/mL;N:細(xì)胞數(shù)量,以萬計。

注意事項:

1、 試劑一具有腐蝕性,請佩戴好手套口罩,小心操作。

2、 高血脂樣本若最終反應(yīng)液出現(xiàn)渾濁,在反應(yīng)液中加入550μL的異丙醇,充分混合,可以溶解脂質(zhì),消除渾濁,測定其吸光值。計算時將所測得吸光度乘以1.5。

3、 嚴(yán)重黃疸、溶血等血清樣本,需要先制備無蛋白血濾液(建議100μL樣本加300μL 5%三氯*酸溶液,充分混合,相當(dāng)于將樣本稀釋四倍,3000rpm 4℃離心10min,取上清待測),再進行計算。注意同步修改計算公式。

實驗實例:

1. 50μL人血清樣本,用蒸餾水稀釋5倍,按照測定步驟操作,用96孔板測得計算:ΔA測定=A測定-A空白=0.450-0.057=0.393,ΔA標(biāo)準(zhǔn)=A標(biāo)準(zhǔn)-A空白=0.708-0.057=0.651,按液體體積計算得:

葡萄糖含量(mg/mL=0.3125×ΔA測定÷ΔA標(biāo)準(zhǔn)×5 =0.943mg/mL。

2. 0.1g小鼠肌肉組織,按前處理和測定步驟操作,用96孔板測得計算:ΔA測定=A測定-A空白=0.168-0.057= 0.111,ΔA標(biāo)準(zhǔn)=A標(biāo)準(zhǔn)-A空白=0.708-0.057=0.651,按液體體積計算得:

葡萄糖含量(mg/mL=0.3125×ΔA測定÷ΔA標(biāo)準(zhǔn)÷W =0.533mg/mL

參考文獻(xiàn):

[1] Yee H Y, Goodwin J F. Evaluation of some factors influencing the o-toluidine reaction with glucose[J]. Analytical Chemistry, 2002, 45(13).DOI:10.1021/ac60335a030.

[2] Dubowski K M. An o-Toluidine Method for Body-Fluid Glucose Determination[J]. Clinical Chemistry, 1962(6) :6.DOI:10.1093/clinchem/8.6.592.

相關(guān)系列產(chǎn)品:

BC0330/BC0335 海藻糖含量檢測試劑盒

BC0340/BC0345 糖原含量檢測試劑盒

BC2490/BC2495 血糖含量檢測試劑盒

BC2500/BC2505 葡萄糖含量檢測試劑盒

BC2540/BC2545 纖維素酶(CL)活性檢測試劑盒

葡萄糖含量檢測試劑盒 微量法 葡萄糖含量檢測試劑盒 微量法

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