目錄:北京索萊寶科技有限公司>>生化檢測(cè)試劑盒-常量法>>氮代謝系列>> BC1530-50T/24S尿*氮檢測(cè)試劑盒 氮代謝系列
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更新時(shí)間:2024-04-08 08:54:46瀏覽次數(shù):1446評(píng)價(jià)
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CAS | 詳詢 | 純度 | 詳詢 |
---|---|---|---|
分子量 | 詳詢 | 分子式 | 詳詢 |
供貨周期 | 現(xiàn)貨 | 規(guī)格 | 50管/24樣 |
貨號(hào) | BC1530 | 應(yīng)用領(lǐng)域 | 環(huán)保,化工,生物產(chǎn)業(yè),農(nóng)業(yè),綜合 |
主要用途 | 尿素氮檢測(cè) |
尿素氮(BUN)含量檢測(cè)試劑盒說明書
可見分光光度法
貨號(hào):BC1530
規(guī)格:50T/24S
產(chǎn)品組成:使用前請(qǐng)認(rèn)真核對(duì)試劑體積與瓶?jī)?nèi)體積是否一致,有疑問請(qǐng)及時(shí)聯(lián)系索萊寶工作人員。
試劑名稱 | 規(guī)格 | 保存條件 |
試劑一 | 粉劑×2瓶 | 2-8℃保存 |
試劑二 | 液體15 mL×1瓶 | 2-8℃保存 |
試劑三A液 | 液體3 mL×1瓶 | 2-8℃保存 |
試劑三B液 | 2-8℃保存 | |
試劑四 | 液體15 mL×1瓶 | |
標(biāo)準(zhǔn)品 | 粉劑×1支 | 2-8℃保存 |
溶液的配制:
1、 試劑一:臨用前加5 mL蒸餾水充分溶解,現(xiàn)用現(xiàn)配,4℃可保存一周。
2、 試劑三:臨用前將A液倒入B液中混合,或者根據(jù)比例(A:B=1:4)現(xiàn)用現(xiàn)配。
3、 標(biāo)準(zhǔn)品:10 mg尿素。臨用前加入4.66 mL蒸餾水配制成1 mg/mL尿素氮標(biāo)準(zhǔn)液。
產(chǎn)品說明:
尿素(BUN)是人體蛋白質(zhì)代謝的主要終末產(chǎn)物,BUN構(gòu)成了血液中絕大部分的非蛋白質(zhì)氮,血液尿素氮是腎功能的主要指標(biāo)之一。用靛酚藍(lán)比色法測(cè)定脲酶水解尿素產(chǎn)生的NH3-N,生成的藍(lán)色靛酚和尿素氮的濃度成正比。
技術(shù)指標(biāo):
最檢出限:0.000086 μg/mL
線性范圍:0.390625-50 μg/mL
注意:實(shí)驗(yàn)之前建議選擇2-3個(gè)預(yù)期差異大的樣本做預(yù)實(shí)驗(yàn)。如果樣本吸光值不在測(cè)量范圍內(nèi)建議稀釋或者增加樣本量進(jìn)行檢測(cè)。
需自備的儀器和用品:
可見分光光度計(jì)、天平、研缽/勻漿器、低溫離心機(jī)、1mL玻璃比色皿、恒溫水浴鍋。
操作步驟:
一、樣本處理(可適當(dāng)調(diào)整待測(cè)樣本量,具體比例可以參考文獻(xiàn))
組織:按照質(zhì)量(g):蒸餾水體積(mL)為 1:5-10的比例(建議稱取約0.1g,加入1mL蒸餾水),冰上勻漿后于4℃,12000g離心15min,取上清待測(cè)。
細(xì)菌或細(xì)胞:按照細(xì)胞數(shù)量(104個(gè)):蒸餾水體積(mL)為500-1000:1的比例(建議500萬個(gè)細(xì)胞加入1mL蒸餾水),冰浴超聲波破碎細(xì)胞(功率300w,超聲3s,間隔7s,總時(shí)間3min);然后4℃,12000g離心15min,取上清置于冰上待測(cè)。
血清(漿)或其它液體:直接檢測(cè)。
二、測(cè)定步驟
1. 分光光度計(jì)預(yù)熱30min,波長(zhǎng)調(diào)至630nm,蒸餾水調(diào)零。
2. 將1mg/mL尿素氮標(biāo)準(zhǔn)液用蒸餾水稀釋至25μg/mL備用。
3. 加樣表:
試劑名稱(μL) | 空白管 | 標(biāo)準(zhǔn)管 | 測(cè)定管 | 對(duì)照管 |
樣本 | - | - | 60 | 60 |
標(biāo)準(zhǔn)品 | - | 60 | - | -- |
蒸餾水 | 60 | - | - | 120 |
試劑一 | 120 | 120 | 120 | - |
試劑二 | 220 | 220 | 220 | 220 |
充分混勻,于37℃反應(yīng)10min | ||||
試劑三 | 80 | 80 | 80 | 80 |
試劑四 | 60 | 60 | 60 | 60 |
混勻,37℃靜置30min | ||||
蒸餾水 | 460 | 460 | 460 | 460 |
充分混勻后測(cè)定630nm處吸光值,記為A空白管、A標(biāo)準(zhǔn)管、A測(cè)定管和A對(duì)照管。計(jì)算ΔA標(biāo)準(zhǔn)=A標(biāo)準(zhǔn)管-A空白管,ΔA測(cè)定=A測(cè)定管-A對(duì)照管。 |
三、計(jì)算公式
1. 按樣本質(zhì)量計(jì)算:
尿素氮含量(μg/g 質(zhì)量)=ΔA測(cè)定÷ΔA標(biāo)準(zhǔn)×C標(biāo)準(zhǔn)品×V提取÷W=25×ΔA測(cè)定÷ΔA標(biāo)準(zhǔn)÷W
2. 按蛋白濃度計(jì)算:
尿素氮含量(μg/mg prot)=ΔA測(cè)定÷ΔA標(biāo)準(zhǔn)×C標(biāo)準(zhǔn)品×V提取÷(Cpr×V提取)=25×ΔA測(cè)定÷ΔA標(biāo)準(zhǔn)÷Cpr
3. 按細(xì)胞數(shù)計(jì)算:
尿素氮含量(μg/104 cell)=ΔA測(cè)定÷ΔA標(biāo)準(zhǔn)×C標(biāo)準(zhǔn)品×V提取÷細(xì)胞數(shù)量=25×ΔA測(cè)定÷ΔA標(biāo)準(zhǔn)÷細(xì)胞數(shù)量
4. 按液體體積計(jì)算:
尿素氮含量(μg/mL)=ΔA測(cè)定÷ΔA標(biāo)準(zhǔn)×C標(biāo)準(zhǔn)品=25×ΔA測(cè)定÷ΔA標(biāo)準(zhǔn)
C標(biāo)準(zhǔn)品:標(biāo)準(zhǔn)品濃度,25μg/mL;V提取:提取液體積,1mL;W:樣本質(zhì)量,g;Cpr:樣本蛋白濃度,mg/mL;細(xì)胞數(shù)量:以萬計(jì)。
注意事項(xiàng):
如果樣本吸光值大于1.3,建議將樣本用蒸餾水稀釋后進(jìn)行測(cè)定。
相關(guān)發(fā)表文獻(xiàn):
[1] Xiaoguang Zhu,Jun Shi,Huicong li,et al. PVT1 knockdown alleviates vancomycin-induced acute kidney injury by targeting miR-124 via inactivation of NF-κB signaling. RSC advances. September 2018;(IF3.049)
相關(guān)系列產(chǎn)品:
BC0080/BC0085 硝酸還原酶(NR)活性檢測(cè)試劑盒
BC1450/BC1455 谷氨*胺酶(GLS)活性檢測(cè)試劑盒
尿*氮檢測(cè)試劑盒 氮代謝系列 尿*氮檢測(cè)試劑盒 氮代謝系列
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