目錄:北京索萊寶科技有限公司>>生化檢測試劑盒-常量法>>氮代謝系列>> BC0910-50T/24S谷氨*胺合成酶(GS)活性檢測試劑盒 氮代謝
CAS | 詳詢 | 純度 | 詳詢 |
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分子量 | 詳詢 | 分子式 | 詳詢 |
供貨周期 | 現(xiàn)貨 | 規(guī)格 | 50管/24樣 |
貨號 | BC0910 | 應(yīng)用領(lǐng)域 | 環(huán)保,化工,生物產(chǎn)業(yè),農(nóng)業(yè),綜合 |
主要用途 | 谷氨*胺合成酶活性測定 |
谷*酰胺合成酶(GS)活性檢測試劑盒說明書
可見分光光度法
注意:本產(chǎn)品試劑有所變動,請注意并嚴格按照該說明書操作。
貨號:BC0910
規(guī)格:50T/24S
產(chǎn)品組成:使用前請認真核對試劑體積與瓶內(nèi)體積是否一致,有疑問請及時聯(lián)系索萊寶工作人員。
試劑名稱 | 規(guī)格 | 保存條件 |
提取液 | 液體30 mL×1瓶 | 2-8℃保存 |
試劑一 | 液體12 mL×1瓶 | -20℃保存 |
試劑二 | 液體12 mL×1瓶 | -20℃保存 |
試劑三 | 粉劑×2瓶 | -20℃保存 |
試劑四 | 液體15 mL×1瓶 | 2-8℃保存 |
溶液的配制:
試劑三:臨用前取一瓶加入5mL蒸餾水充分溶解備用,用不完的試劑-20℃分裝可保存4周,避免反復(fù)凍融。
產(chǎn)品說明:
GS(EC 6.3.1.2)主要存在于植物中,是生物體內(nèi)氨同化的關(guān)鍵酶之一,催化銨離子和*氨酸合成谷*酰胺,不僅可以防止過多的銨離子對生物有毒性,而且谷*酰胺也是氨的主要儲存和運輸形式。
GS 在ATP和Mg2+存在下,催化銨離子和*氨酸合成谷*酰胺;谷*酰胺進一步轉(zhuǎn)化為γ-谷氨?;惲u肟酸,在酸性條件下與鐵形成紅色的絡(luò)合物;該絡(luò)合物在540nm處有最大吸收峰。
注意:實驗之前建議選擇2-3個預(yù)期差異大的樣本做預(yù)實驗。如果樣本吸光值不在測量范圍內(nèi)建議稀釋或者增加樣本量進行檢測。
需自備的儀器和用品:
可見分光光度計、水浴鍋、臺式離心機、可調(diào)式移液器、1 mL玻璃比色皿、研缽/勻漿器/細胞破碎儀、冰和蒸餾水。
操作步驟:具體操作步驟詳見“產(chǎn)品資料"附件
實驗實例:
稱取0.125g鼠腎,加入1mL提取液進行冰浴勻漿,按照測定步驟操作,用1mL玻璃比色皿測得計算?A=A測定-A對照=0.323-0.047=0.276,帶入公式計算:
GS(U/g 質(zhì)量)= 19×ΔA÷W = 41.952 U/g 質(zhì)量。
稱取0.110g 鼠肝,加入1mL提取液進行冰浴勻漿,按照測定步驟操作,用1mL玻璃比色皿測得計算?A=A測定-A對照=1.203-0.036=1.167,帶入公式計算:
GS(U/g 質(zhì)量)=19×ΔA÷W = 201.57 U/g 質(zhì)量。
稱取0.158g 黃豆芽,加入1mL提取液進行冰浴勻漿,按照測定步驟操作,用1mL玻璃比色皿測得計算?A=A測定-A
對照=0.198-0.088=0.11,帶入公式計算:
GS(U/g 質(zhì)量)= 19×ΔA÷W =13.223 U/g 質(zhì)量。
參考文獻:
Haghighat N. Estrogen (17β-Estradiol) enhances glutamine synthetase activity in C6-glioma cells[J]. Neurochemical research, 2005, 30(5): 661-667.
Bressler S L, Ahmed S I. Detection of glutamine synthetase activity in marine phytoplankton: optimization of the biosynthetic assay[J]. Mar. Ecol. Prog. Ser, 1984, 14: 207-217.
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