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目錄:北京索萊寶科技有限公司>>生化檢測(cè)試劑盒-常量法>>土壤系列>> BC5500-50T/24S土壤碳酸酐酶(S-CA)活性檢測(cè)試劑盒

土壤碳酸酐酶(S-CA)活性檢測(cè)試劑盒
  • 土壤碳酸酐酶(S-CA)活性檢測(cè)試劑盒
參考價(jià) 面議
具體成交價(jià)以合同協(xié)議為準(zhǔn)
參考價(jià) 面議
具體成交價(jià)以合同協(xié)議為準(zhǔn)
  • 品牌 SOLARBIO/索萊寶
  • 型號(hào) BC5500-50T/24S
  • 廠(chǎng)商性質(zhì) 生產(chǎn)商
  • 產(chǎn)品資料 查看pdf文檔
  • 所在地 北京市
屬性

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更新時(shí)間:2024-04-19 16:27:21瀏覽次數(shù):811評(píng)價(jià)

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CAS 詳詢(xún) 純度 詳詢(xún)
分子量 詳詢(xún) 分子式 詳詢(xún)
供貨周期 現(xiàn)貨 規(guī)格 50T/24S
貨號(hào) BC5500 應(yīng)用領(lǐng)域 環(huán)保,化工,生物產(chǎn)業(yè),農(nóng)業(yè),綜合
主要用途 土壤碳酸酐酶(S-CA)活性檢測(cè)
儲(chǔ)存條件
2-8℃
有效期
6個(gè)月
中文名稱(chēng)
土壤碳酸酐酶(S-CA)活性檢測(cè)試劑盒
單位

英文名稱(chēng)
Soil Carbonic Anhydrase Activity Assay kit
檢測(cè)方法
可見(jiàn)分光光度法 Spectrophotometer
規(guī)格
50T/24S
自備試劑
該試劑盒實(shí)驗(yàn)過(guò)程中需自備試劑,詳情見(jiàn)網(wǎng)站說(shuō)明書(shū)

土壤碳酸酐酶(S-CA)活性檢測(cè)試劑盒說(shuō)明書(shū)

可見(jiàn)分光光度法

貨號(hào):BC5500

規(guī)格:50T/24S

產(chǎn)品內(nèi)容:使用前請(qǐng)認(rèn)真核對(duì)試劑體積與瓶?jī)?nèi)體積是否一致,有疑問(wèn)請(qǐng)及時(shí)聯(lián)系索萊寶工作人員。

試劑名稱(chēng)

規(guī)格

保存條件

試劑一

液體75mL×1

2-8℃保存

試劑二

粉劑×2

2-8℃保存

標(biāo)準(zhǔn)品

液體1mL×1

2-8℃保存

溶液的配制:

1、 試劑二:臨用前取一支試劑二,先加入1mL丙酮使粉劑充分溶解,再加入10mL蒸餾水。未用完的試劑分裝保存,-20℃可以分裝保存1周,避免反復(fù)凍融。

2、 標(biāo)準(zhǔn)品:5μmol/mL 酚標(biāo)準(zhǔn)液。臨用前取50μL5μmol/mL 酚標(biāo)準(zhǔn)液于試劑瓶中,加入750μL蒸餾水充分混合,配置成0.3125 μmol/mL的酚標(biāo)準(zhǔn)液。

產(chǎn)品說(shuō)明:

碳酸酐酶(Carbonic Anhydrase, CA, EC4.2.1.1)是一種以 Zn2+為活性中心的金屬酶,可用來(lái)高效催化 CO2 的可逆水合反應(yīng):CO2+H20?HCO3-+H+,催化速率可達(dá)自然條件下的107倍,是目前已知催化速率最快的酶之一。

碳酸酐酶可催化乙酸對(duì)硝基苯酯反應(yīng)生成對(duì)硝基苯*,通過(guò)檢測(cè)405nm處吸光值上升速率反映碳酸酐酶活性。


注意:實(shí)驗(yàn)之前建議選擇2-3個(gè)預(yù)期差異大的樣本做預(yù)實(shí)驗(yàn)。如果樣本吸光值不在測(cè)量范圍內(nèi)建議稀釋或者增加樣本量進(jìn)行檢測(cè)。

需自備的儀器和用品:

可見(jiàn)分光光度計(jì)、水浴鍋/恒溫培養(yǎng)箱、30-50目篩、研缽、分析天平、臺(tái)式離心機(jī)、可調(diào)式移液器、1mL玻璃比色皿、甲苯、蒸餾水和冰。

操作步驟:

一、樣本處理(可適當(dāng)調(diào)整待測(cè)樣本量,具體比例可以參考文獻(xiàn))

新鮮土樣自然風(fēng)干或 37℃烘箱風(fēng)干,過(guò) 30~50目篩。

二、測(cè)定步驟

1、 可見(jiàn)分光光度計(jì)預(yù)熱30min以上,調(diào)節(jié)波長(zhǎng)至405nm,蒸餾水調(diào)零。

2、 試劑一使用前37℃預(yù)熱15min

3、 標(biāo)準(zhǔn)管測(cè)定

(1) 標(biāo)準(zhǔn)管測(cè)定:在2mL EP管內(nèi)中加入320μL標(biāo)準(zhǔn)液,1180μL試劑一,充分混勻后,于1mL玻璃比色皿中測(cè)定405nm處吸光值,記作A標(biāo)準(zhǔn)。

 

 

(2) 標(biāo)準(zhǔn)空白管測(cè)定:在2mL EP管內(nèi)中加入320μL蒸餾水,1180μL試劑一,充分混勻后,于1mL玻璃比色皿中測(cè)定405nm處吸光值,記作A標(biāo)準(zhǔn)空白。

(3) 計(jì)算?A標(biāo)準(zhǔn)=A標(biāo)準(zhǔn)-A標(biāo)準(zhǔn)空白(標(biāo)準(zhǔn)管和標(biāo)準(zhǔn)空白管只需做1-2次。)

4、 操作表:(在2mLEP管內(nèi)加入)

試劑名稱(chēng)(μL

測(cè)定管

對(duì)照管

0.2g

0.2g

甲苯

50

50

充分振蕩使土壤呈潮濕狀態(tài),常溫靜置15min

試劑一

1130

1130

-

-

煮沸10min,冰水冷卻

試劑二

320

320

      37℃反應(yīng)5min后立即放入冰水浴中之后15000g,4℃離心10min吸取上清1mL玻璃比色皿中測(cè)定405nm處吸光值,記作A測(cè)定,A對(duì)照。計(jì)算?A =A測(cè)定-A對(duì)照(每個(gè)測(cè)定管對(duì)應(yīng)一個(gè)對(duì)照管)

三、土壤CA活性計(jì)算

按樣本質(zhì)量計(jì)算

單位的定義:37℃,每g土壤每分鐘催化產(chǎn)生1μmol 對(duì)硝基苯*定義為一個(gè)酶活力單位。

S-CA活性(U/g 質(zhì)量)=C標(biāo)×?A÷?A標(biāo)準(zhǔn)×V標(biāo)準(zhǔn)÷W÷T×F=0.02×?A÷?A標(biāo)準(zhǔn)÷W×F

C標(biāo):標(biāo)準(zhǔn)品濃度,0.3125μmol/mL;V標(biāo)準(zhǔn):反應(yīng)體系中加入的標(biāo)準(zhǔn)液體積,0.32mL;T:反應(yīng)時(shí)間,5minW:樣本質(zhì)量,gF:樣本稀釋倍數(shù)。

注意事項(xiàng):

1、 如果A測(cè)定大于1.5或者?A大于0.8,可以減少樣量或者縮短37℃酶促反應(yīng)時(shí)間;?A小于0.02,可以加大樣本量或者延長(zhǎng)37℃酶促反應(yīng)時(shí)間。注意計(jì)算時(shí)同步修改計(jì)算公式。

2、 如果離心后待測(cè)的上清依然渾濁,可嘗試加大離心轉(zhuǎn)速或延長(zhǎng)時(shí)間,例如20000g4℃離心10min。

實(shí)驗(yàn)實(shí)例:

1、 稱(chēng)取0.2014g土壤樣本65號(hào),按照測(cè)定步驟操作,用1mL玻璃比色皿測(cè)得計(jì)算?A =A測(cè)定-A對(duì)照=0.595-0.400=0.195,?A標(biāo)準(zhǔn)=A標(biāo)準(zhǔn)-A標(biāo)準(zhǔn)空白=0.448-0=0.448,帶入公式計(jì)算:

S-CA活性(U/g 質(zhì)量)=0.02×?A÷?A標(biāo)準(zhǔn)÷W×F =0.043 U/g 質(zhì)量

2、 稱(chēng)取0.2015g土壤樣本1號(hào),按照測(cè)定步驟操作,用1mL玻璃比色皿測(cè)得計(jì)算?A =A測(cè)定-A對(duì)照=0.275-0.137=0.138,?A標(biāo)準(zhǔn)=A標(biāo)準(zhǔn)-A標(biāo)準(zhǔn)空白=0.448-0=0.448帶入公式計(jì)算:

S-CA活性(U/g 質(zhì)量)=0.02×?A÷?A標(biāo)準(zhǔn)÷W×F =0.031 U/g 質(zhì)量

參考文獻(xiàn):

[1] Li W, Yu L J, Yuan D X, et al. A study of the activity and ecological significance of carbonic anhydrase from soil and its microbes from different karst ecosystems of Southwest China[J]. Plant and Soil, 2005, 272(1):133-141.

相關(guān)系列產(chǎn)品:

BC0150/BC0155 土壤纖維素酶(S-CL)活性檢測(cè)試劑盒

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土壤碳酸酐酶(S-CA)活性檢測(cè)試劑盒 土壤碳酸酐酶(S-CA)活性檢測(cè)試劑盒

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