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目錄:北京索萊寶科技有限公司>>生化檢測(cè)試劑盒-微量法>>微量法生化試劑盒>> BC5055-100T/48S血清淀*酶活性檢測(cè)試劑盒 微量法

血清淀*酶活性檢測(cè)試劑盒 微量法
  • 血清淀*酶活性檢測(cè)試劑盒 微量法
參考價(jià) 面議
具體成交價(jià)以合同協(xié)議為準(zhǔn)
參考價(jià) 面議
具體成交價(jià)以合同協(xié)議為準(zhǔn)
  • 品牌 SOLARBIO/索萊寶
  • 型號(hào) BC5055-100T/48S
  • 廠商性質(zhì) 生產(chǎn)商
  • 所在地 北京市
屬性

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更新時(shí)間:2024-07-08 13:55:30瀏覽次數(shù):866評(píng)價(jià)

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CAS 詳詢 純度 詳詢
分子量 詳詢 分子式 詳詢
供貨周期 現(xiàn)貨 規(guī)格 100T/48S
貨號(hào) BC5055 應(yīng)用領(lǐng)域 環(huán)保,化工,生物產(chǎn)業(yè),農(nóng)業(yè),綜合
主要用途 血清淀*酶活性檢測(cè)
血清淀*酶活性檢測(cè)試劑盒 微量法
有效期
6個(gè)月
儲(chǔ)存條件
2-8℃
單位

英文名稱
Serum Amylase(AMY)Activity Assay Kit
檢測(cè)方法
微量法 Spectrophotometer/Microplate Reader
規(guī)格
100T/48S

血清淀*酶(AMY活性檢測(cè)試劑盒(碘-淀粉比色法)說(shuō)明書(shū)

微量法

貨號(hào):BC5055

規(guī)格:100T/48S

產(chǎn)品內(nèi)容:使用前請(qǐng)認(rèn)真核對(duì)試劑體積與瓶?jī)?nèi)體積是否一致,有疑問(wèn)請(qǐng)及時(shí)聯(lián)系索萊寶工作人員。

試劑名稱

規(guī)格

保存條件

試劑一

粉劑×1

2-8℃保存

試劑二

液體30mL×1

2-8℃保存

試劑三A

粉劑×1

2-8℃保存

試劑三B

粉劑×1

2-8℃保存

標(biāo)準(zhǔn)品

粉劑×1

2-8℃保存

溶液的配制:

1、 試劑一:臨用前加入12.5mL試劑二,置于常溫水中并加熱至煮沸,期間不斷攪拌粉劑至溶解;用不完的試劑2-8保存1個(gè)月。

2、 試劑三的配制:將試劑三A倒入試劑三B中,用蒸餾水定容至10mL2-8℃避光保存一個(gè)月。

3、 標(biāo)準(zhǔn)品:10mg淀粉標(biāo)準(zhǔn)品。臨用前加10mL試劑二,置于常溫水中并加熱至煮沸,配成1mg/mL淀粉標(biāo)準(zhǔn)液。用不完的試劑2-8保存1個(gè)月。

產(chǎn)品說(shuō)明:

血清淀*酶( Serum amylase, AMY) 屬于α-淀*酶,以無(wú)規(guī)則方式水解多糖分子內(nèi)部的α-1,4糖苷鍵,生成寡聚糖、麥芽糖和葡萄糖的混合物。AMY主要由唾液腺和胰腺分泌,另外近端十二指腸、肺、子宮、泌乳期的乳腺等器官也有少量分泌。

AMY催化淀粉分子中的α-1,4糖苷鍵水解,產(chǎn)生葡萄糖、麥芽糖以及糊精等,碘可以與未被水解的淀粉結(jié)合,生成在570nm下有特征吸收峰的復(fù)合物,其深淺可計(jì)算出淀*酶的活力單位。

注意:實(shí)驗(yàn)之前建議選擇2-3個(gè)預(yù)期差異大的樣本做預(yù)實(shí)驗(yàn)。如果樣本吸光值不在測(cè)量范圍內(nèi)建議稀釋或者增加樣本量進(jìn)行檢測(cè)。

需自備的儀器和用品:

酶標(biāo)儀/可見(jiàn)分光光度計(jì)、恒溫水浴鍋/培養(yǎng)箱、臺(tái)式離心機(jī)、可調(diào)式移液器、96孔板/微量玻璃比色皿、研缽/勻漿器、蒸餾水。

操作步驟:

一、粗酶液提取

40μL血清和160μL蒸餾水混合(即將血清稀釋5倍),分為2100μL分別作為測(cè)定管和對(duì)照管。若實(shí)驗(yàn)后所測(cè)數(shù)值偏大或者偏小,可以調(diào)整稀釋比例(比如數(shù)值偏小可以將80μL血清和120μL蒸餾水混合即將血清稀釋2.5倍)

二、測(cè)定步驟和加樣表

 

分光光度計(jì)/酶標(biāo)儀預(yù)熱30min以上,調(diào)節(jié)波長(zhǎng)到570 nm,蒸餾水調(diào)零。

將淀粉標(biāo)準(zhǔn)液用蒸餾水稀釋為0.50.4、0.2、0.10.05、0.0250.0125、0.00625mg/mL的標(biāo)準(zhǔn)溶液。

按操作表依次加入各試劑:

試劑(μL

測(cè)定管

對(duì)照管

空白管1

標(biāo)準(zhǔn)管

空白管2

血清稀釋液

100

100

-

-

-

蒸餾水

-

-

100

-

100

標(biāo)準(zhǔn)溶液

-

-

-

100

-

試劑一

100

-

100

-

-

試劑

-

100

-

100

100

37℃恒溫水浴中準(zhǔn)確保溫10min

試劑

50

50

50

50

50

混勻后吸取200μL于微量玻璃比色皿或者96孔板中,于15min內(nèi)讀取測(cè)定管、對(duì)照管、空白管1、標(biāo)準(zhǔn)管、空白管2 570nm下的吸光度,分別記為A測(cè)定、A對(duì)照、A空白1、A標(biāo)準(zhǔn)和A空白2,計(jì)算ΔA測(cè)定=A空白1-A空白2-A測(cè)定-A對(duì)照),ΔA標(biāo)準(zhǔn)=A標(biāo)準(zhǔn)-A空白2。

三、AMY活性計(jì)算

1、 標(biāo)準(zhǔn)曲線的繪制

ΔA標(biāo)準(zhǔn)為y軸,以標(biāo)準(zhǔn)溶液濃度為x軸,繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線,得到方程y=kx+b。將ΔA測(cè)定帶入方程得到xmg/mL)。

2按照血清體積計(jì)算:

單位定義:每mL血清每分鐘消耗1mg淀粉定義為1個(gè)酶活性單位。

AMY活性 (U/mL)= x×V÷V÷T×F =0.1×x×F

V樣:加入反應(yīng)體系中樣本體積,0.1mL;T:反應(yīng)時(shí)間,10minF:稀釋倍數(shù)。

注意事項(xiàng):

1. ΔA測(cè)定大于1.5時(shí),可以對(duì)樣本進(jìn)行適當(dāng)稀釋后測(cè)定。

2. 反應(yīng)完成后需在15min內(nèi)測(cè)定吸光度。

實(shí)驗(yàn)實(shí)例:

1、 40μL牛血清和160μL蒸餾水混合(即血清稀釋5倍)后,按照測(cè)定步驟操作,96孔板測(cè)得計(jì)算ΔA測(cè)定= A空白-A測(cè)定-A對(duì)照)=1.409-0.067-1.297-0.058=0.103,帶入標(biāo)準(zhǔn)曲線y=2.6047x-0.0165,計(jì)算x=0.0459,按公式計(jì)算活性:

AMYU/mL= x×V÷V÷T=0.1×x×F=0.1×x×F =0.0230 U/ mL

相關(guān)系列產(chǎn)品:

BC0700/ BC0705 淀粉含量檢測(cè)試劑盒

BC4260/ BC4265 直鏈淀粉含量檢測(cè)試劑盒

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血清淀*酶活性檢測(cè)試劑盒 微量法 血清淀*酶活性檢測(cè)試劑盒 微量法

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